Asmens kraujo grupės nustatymas. Kraujo grupės nustatymo metodai. Kryžminės reakcijos metodas

Kiekvienas žmogus yra genetiškai paveldimų savybių, kurios natūraliomis sąlygomis nekinta, arba tam tikros rūšies kraujo nešiotojas. Kraujo grupė yra baltymų, angliavandenių, glikoproteinų, glikolipidų, susidarančių raudonųjų kraujo kūnelių paviršiuje ir vadinamų „antigenu“, požymis. Kaip raudonos formos elementų membranos dalis, antigenai randami visuose žmonių rasės atstovuose.

Medicinoje daugelis eritrocitų grupės antigenų rūšių yra klasifikuojami, tai yra, skirtingi žmonės gali turėti tą patį antigenų rinkinį. Remiantis antigenų tipologija, yra apie tris dešimtis kraujo grupių sistemų, tokių kaip AB0, MNS, liuteronų, Rh, Duffy, Colton ir kt.

Šiuolaikinė medicina naudoja du – AB0 ir Rh, kurie atlieka lemiamą vaidmenį transfuzijoje. Šiame straipsnyje mes išsamiau apsvarstysime paskirtas kraujo grupės „a-be-nulis“ ir „rezus faktoriaus“ sistemas.

AB0 kraujo grupės sistema

Už kraujo grupės atradimą pagal AB0 sistemą esame skolingi austrų imunologui Karlui Landsteineriui. Būtent jis padarė išvadą, kad vienodai atrodantis kraujas skiriasi eritrocitų savybėmis. Skystą judrų jungiamąjį audinį jis suskirstė į tris grupes, skirdamas jas A, B, 0. Vėliau čekų gydytojas J. Jansky atrado papildomą AB grupę ir pasiūlė kraujo grupes žymėti naudojant I, II, III, IV skaičius.

Nuo tada perpylimas (transfuzija) buvo laikomas efektyviu gydymo metodu, aktyviai naudojamas daugelio ligų gydymui.

Nuo 1928 m. higieninė Tautų Lyga patvirtino kitą raidžių žymėjimą, kuris iki šiol pripažįstamas kaip klasifikavimo pagrindas visame pasaulyje: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).

AB0 sistemos kraujo grupės leido nustatyti, kodėl transfuzija dažnai būna sėkminga, bet kartais mirtina. Landsteineris eksperimentiškai įrodė, kad vieno paciento eritrocitams susimaišius su kito paciento plazma, kraujas koaguliuoja, susidaro dribsniai. Šis plazmos (serumo) gebėjimas suklijuoti (agliutinuoti) raudonuosius kraujo kūnelius vadinamas izohemagliutinacija. Ši reakcija atsiranda dėl to, kad raudonoje spalvoje yra vienodų antigenų elementų, vadinamų agliutinogenais, kurie žymimi raidėmis A, B; o serume – natūralūs antikūnai (agliutininai), žymimi a, b. Izohemagliutinacija atsiranda tik tada, kai atsiranda vienos raidės antigenai ir antikūnai, pvz., A-a, B-b.

Atitinkamai, žmogaus kraujyje neįmanoma sujungti to paties pavadinimo agliutinogenų ir agliutininų, nes gebėjimas agliutinuoti eritrocitus sukels mirtį.

Pagal Landsteinerio teoriją, leidžiamos tik keturios kombinacijos, neįskaitant vienos raidės antigenų ir antikūnų arba 4 kraujo rūšių susitikimo. Šio atskyrimo pagrindas yra skysto judriojo jungiamojo audinio gebėjimas turėti / neturėti antigenų (agliutinogenų) A, B ir antikūnų (agliutininų) a (alfa arba anti-A), b (beta arba anti-B).

Šioje lentelėje pateikiama serologija pagal AB0 kraujo grupių sistemą:

Kaip matyti iš lentelės, plazmoje yra dviejų tipų hemolizinai, taip pat žymimi raidėmis a, b. Vienos raidės agliutinogenų ir hemolizinų derinys sukelia eritrocitų hemolizę (sunaikinimą). Ši reakcija vyksta 37-40 ° C temperatūroje, o kambario temperatūroje tų pačių antigenų ir antikūnų susitikimą lydi agliutinacija be hemolizės.

II, III, IV tipo savininkų plazmoje yra antiagliutinogenų, kurie paliko raudonuosius kraujo kūnelius ir audinius, kurie yra pažymėti kaip agliutinogenai - A, B.

Šios teorijos dėka perpylimas tapo įmanomas, vykstantis be įvairių komplikacijų.

Yra visuotinai priimta skirtingų tipų kraujo suderinamumo nustatymo taisyklė: recipiento plazma turi priimti donoro raudonuosius kraujo kūnelius. Todėl pacientui, kuriam reikia perpylimo, svarbu atsižvelgti į agliutininų ir hemolizinų reikšmę, o kraują dovanojančiam pacientui svarbu atsižvelgti į agliutinogenus, esančius raudonuose uniforminiuose elementuose.

Sprendžiant kraujo grupių suderinamumo problemą pagal AB0, reikia sumaišyti skystą jungiamąjį audinį su serumu, paimtu iš skirtingų kraujo tipų nešiotojų. Agliutinacija stebima naudojant šiuos derinius:

Iš to išplaukia, kad pagal AB0 sistemą I grupei būdingas absoliutus derinys su likusiais, jos nešiotojai pripažįstami universaliais donorais. Atitinkamai, IV grupės savininkai yra universalūs recipientai, nes šio tipo raudonieji kraujo kūneliai neturėtų sukelti agliutinacijos su kitos kraujo grupės nešiotojų plazma.

Kadangi taikant šį metodą gali kilti komplikacijų, medicinos aplinkoje dažniausiai taikomas kitas metodas: recipientui perpilama vienos grupės donoro medžiaga daugybinio kraujo netekimo atveju. Aukščiau aprašyta grupinio maišymo taisyklė naudojama retai.

Rh kraujo sistema

Rh (rezus faktorius), kurį XX amžiaus 40-aisiais atrado K. Landsteineris ir K. Wieneris, laikomas reikšminga kraujo sistema po AB0. Jis atstovauja 50 antigenų, aptiktų pagal kraujo grupę. Svarbiausi yra 6 (D, C, c, CW, E, e). Aktyviausias yra D-antigenas, kuris nustato, ar žmonės priklauso Rh teigiamam (Rh +) / Rh-neigiamam (Rh-) faktoriui. Antigeno buvimas rodo Rh + 85% baltųjų žmonių. Likę 15% neturi antigeno (agliutinino), kuris rodo Rh–. Palyginti su AB0 sistema, Rh trūksta reikiamų plazmos agliutininų. Tačiau perpilant Rh– donoro Rh+ medžiagą recipientui, tiriamojo, kuriam buvo perpiltas donoro kraujas, kraujyje aptinkami antikūnai - anti-Rh - agliutininai. Procedūros kartojimas sukelia eritrocitų agliutinaciją arba transfuzinį šoką.

Mokslininkai priėjo prie išvados, kad Rh- nešiotojai gali būti perpilami tik Rh-.

Panaši situacija gali susidaryti ir motinai – Rh savininkei – nešiojant vaiką – Rh+ nešioją, kai Rh agliutinogenai, būdami jos kūne, aktyviai gamina antikūnus. Paprastai pirmasis nėštumas vyksta sėkmingai ir baigiasi sėkmingu gimdymu. Remiantis statistika, vėlesnio nėštumo metu Rh + antikūnai, prasiskverbę į placentą, veikia vaisiaus raudonuosius kraujo kūnelius, o tai sukelia persileidimą arba hemolizinę anemiją naujagimiams. Todėl, kaip imunoprofilaktikos priemonė, anti-D antikūnų koncentratas skiriamas moterims, sergančioms Rh– po pirmojo gimdymo.

Kraujo grupės ir Rh faktoriaus tyrimas

Žinios apie kraujo grupę, Rh faktorių yra labai svarbios gelbstint gyvybes situacijose, dažniausiai susijusiose su dideliu kraujo netekimu ar kitais patologiniais atvejais, kai perpylimas yra vienas pagrindinių gydymo būdų.

Tyrimo rezultatai parodys, kad žmogaus kraujas priklauso vienai iš „a-be-zero“ sistemos grupių, remiantis antigenų buvimu ant raudonųjų kraujo kūnelių ir antikūnų.

Priklausymas kraujo grupei pagal AB0 sistemą nustatomas pagal kiekvienos grupės aktyvias standartines plazmas, kurių titras yra 1:32, ir raudonus vienodus elementus, atitinkančius standartą. Kartais papildomai naudojama IV grupės plazma. Šios medžiagos sumaišomos su paciento krauju, tada reakcija stebima 3 minutes. Į plazmos ir kraujo mišinį, prasidėjus klijavimui, lašinamas 0,9% natrio chlorido tirpalas ir laukiama iki 5 minučių. Tada per skleidžiamą šviesą skaitoma agliutinacija, kurios pagrindu daroma išvada apie priklausomybę grupei:

• agliutinacijos nebuvimas visuose mėginiuose paneigia agliutinogeną, kalbant apie santykį su 0 (I);
• agliutinacija plazmoje su mėginiais 0(I), B(III) rodo agliutinogeną A ir A(II);
• raudonos formos elementų klijavimo proceso buvimas serume 0(I), A(II) rodo agliutinogeno B buvimą ir ryšį su B(III);
• agliutinacijos eiga visose tirtose medžiagose rodo, kad yra agliutinogenų A, B ir priklauso AB(IV).

Pastaruoju atveju galima nespecifinė reakcija. Norint patvirtinti duomenis, standartinis AB(IV) serumas ir tiriamojo kraujas sumaišomi ir stebimi 5 minutes. Jei eritrocitų agliutinacija nevyksta, tai susijusi su AB(IV) grupe.

Esant lengvai agliutinacijai arba kilus abejonių, tyrimas kartojamas dar kartą.

Rh faktoriui ištirti naudojamas standartinis reagentas su antikūnais prieš Rh antigenus, sumaišant jį su tiriamojo krauju. Po 3-5 minučių įpylus fiziologinio tirpalo, turinys sumaišomas ir vizualiai praleidžiamoje šviesoje nustatomas eritrocitų sulipimas ir kritulių buvimas. Kai randami raudoni dribsniai, daroma išvada apie santykį su Rh +. Agliutinacijos nebuvimas rodo Rh–.

Kraujo grupė pagal AB0 ir Rh sistemą dažniausiai nurodoma toje pačioje eilutėje, pavyzdžiui, 0 (I) Rh +, 0 (I) Rh- ir kt.

Bet kurioje klinikinėje laboratorijoje galite atlikti kraujo tyrimą dėl priklausomybės grupei ir Rh faktoriaus. Be šių verčių, analizėje nurodomas suderinamumas, nustatant, kurios grupės medžiagą, esant būtinybei, Rh faktorius gali būti perpiltas.

Kraujo tipų paveldėjimas

Įrodyta, kad vaiko kraujo grupė paveldima iš tėvų. Yra keletas akivaizdžių grupės narystės paveldėjimo modelių:

1. Šeimoje, kurioje vienas iš tėvų turi 0 (I), negali gimti kūdikis su IV (AB) grupe. Šiuo atveju antrojo tėvo grupė neturi reikšmės.
2. Mama ir tėtis yra 1-osios kraujo grupės nešiotojai, o tai reiškia, kad vaikai gims su panašia grupe.
3. 2 grupės tėvai turi kūdikių tik su 1 arba 2 grupėmis.
4. Jei abu sutuoktiniai turi 3 grupę, tada vaikai yra tik 1 ar 3 nešiotojai.
5. Jei vienas iš tėvų turi IV (AB) tipą, 1 grupės vaikas negali gimti, nepaisant kito tėvo kraujo grupės.
6. Sutuoktiniams derinant 2 ir 3 grupes, vaikai gali turėti bet kurią iš galimų kraujo grupių.

Užfiksuota, kad 1 atveju iš dešimties milijonų gali atsirasti paveldima mutacija, vadinama Bombėjaus fenomenu. Jo esmė ta, kad vaikai gimdami turi grupę, kurioje nėra antigenų A ir B, taip pat komponento H. Tokie žmonės gyvena įprastą gyvenimą, sunkumų gali kilti tik perpylus ar nustatant tėvystę.

Kiekvienas žmogus turėtų žinoti savo kraujo grupę, Rh faktorių, taip pat suderinamumą su kitomis grupėmis. Kartais tai tampa lemiamu veiksniu, nuo kurio priklauso gyvybė.

Susisiekus su

BENDROSIOS NUOSTATOS

ABO kraujo grupių sistema susideda iš dviejų grupių agliutinogenų – A ir B, ir dviejų atitinkamų plazmos agliutininų – alfa (anti-A) ir beta (anti-B). Įvairūs šių antigenų ir antikūnų deriniai sudaro keturias kraujo grupes: grupė 0(1) – abiejų antigenų nėra; A grupė (II) – ant eritrocitų yra tik antigenas A; grupė B(III) – ant eritrocitų yra tik antigenas B; AB (IV) grupė – eritrocituose yra antigenų A ir B.

ABO sistemos išskirtinumas slypi tame, kad neimunizuotų žmonių plazmoje yra natūralių antikūnų prieš antigeną, kurio eritrocituose nėra: 0 (1) grupės asmenims - antikūnai prieš A ir B; A (II) grupės asmenims - anti-B antikūnai; B (III) grupės asmenims - anti-A antikūnai; AB(IV) grupės asmenų neturi antikūnų prieš ABO sistemos antigenus.

Tolesniame tekste anti-A ir anti-B antikūnai bus vadinami anti-A ir anti-B.

ABO kraujo grupės nustatymas atliekamas identifikuojant specifinius antigenus ir antikūnus (dviguba arba kryžminė reakcija). Anti-A ir anti-B nustatomi kraujo serume naudojant standartinius A(II) ir B(III) eritrocitus. Antigenų A ir B buvimas ar nebuvimas eritrocituose nustatomas naudojant atitinkamo specifiškumo monokloninius arba polikloninius antikūnus (standartinį hemagliutinuojantį serumą).

Kraujo grupės nustatymas atliekamas du kartus: pirminis tyrimas – medicinos skyriuje (kraujo paėmimo komanda); patvirtinantis tyrimas – laboratoriniame skyriuje. Imunohematologinių laboratorinių tyrimų atlikimo kraujo perpylimo metu algoritmas parodytas fig. 18.1.

Kraujo grupės nustatymo rezultatas įrašomas ligos istorijos priekinio lapo viršutiniame dešiniajame kampe arba donoro žurnale (kortelėje) nurodant datą ir pasirašo nustatymą atlikęs gydytojas.

Rusijos šiaurės vakaruose ABO sistemos kraujo grupių pasiskirstymas populiacijoje yra toks: 0 grupė (I) - 35%; grupė A(II) - 35-40%; grupė B(III) - 15-20%; grupė AB (IV) - 5-10 proc.

Reikia pažymėti, kad yra skirtingų tipų (silpnų variantų) tiek antigeno A (didesniu mastu), tiek antigeno B. Dažniausi antigeno A tipai yra A 1 ir A 2. Antigeno A 1 paplitimas tarp A (II) ir AB (IV) grupių asmenų yra 80 proc., o antigeno A 2 – apie 20 proc. Kraujo mėginiuose su A 2 gali būti anti-A 1 antikūnų, kurie sąveikauja su standartiniais A (II) grupės raudonaisiais kraujo kūneliais. Anti-A 1 buvimas nustatomas kryžminiu kraujo grupių nustatymu ir individualaus suderinamumo testu.

Skirtingam antigeno variantų A (A 1 ir A 2) nustatymui būtina naudoti specifinius reagentus (fitohemagliutininus arba anti-A 1 monokloninius antikūnus. A 2 (II) ir A 2 B (IV) grupių pacientai turi būti perpilama atitinkamai A 2 (II) ir A 2 B (IV) grupių hemokomponentais, turinčiais eritrocitų. Taip pat gali būti rekomenduojamas išplauto eritrocitų perpylimas: 0 (I) - pacientams, kurių kraujo grupė A 2 (II); 0 ( I) ir B (III) – pacientams, kurių kraujo grupė A 2 B(II).

Kraujo grupės nustatymas pagal ABO sistemą

Kraujo grupes nustato standartiniai serumai (paprasta reakcija) ir standartiniai eritrocitai (dviguba arba kryžminė reakcija).

Kraujo grupė nustatoma atliekant paprastą reakciją su dviem standartinių izohemagliutinuojančių serumų serijomis.

• Apibrėžimo pažanga [Rodyti] .

  Kraujo grupės nustatymas tabletėse atliekamas esant geram apšvietimui ir temperatūrai nuo + 15 iki + 25 ° C. Kairėje tabletės pusėje užrašykite 0 (1), viduryje - A (II), dešinėje - B (III). Viršutinio tabletės krašto viduryje pažymimas donoro vardas arba tiriamo kraujo numeris. Naudokite aktyvius standartinius trijų grupių serumus (O, A, B), kurių titras ne mažesnis kaip 1:32, dvi serijos. Serumai dedami į specialias stelažus dviem eilėmis. Kiekvienas serumas atitinka pažymėtą pipetę. AB(IV) serumo grupė naudojama kaip papildoma kontrolė.

  Ant tabletės dviem eilėmis lašinamas vienas arba du lašai standartinio serumo: 0(1) grupės serumas – kairėje, A(II) grupės serumas – viduryje, B(III) grupės serumas – dešinėje.

  Prie kiekvieno serumo lašo pipete arba stikline lazdele užlašinami kraujo lašai iš piršto ar mėgintuvėlio ir sumaišomi pagaliuku. Kraujo kiekis turi būti 8-10 kartų mažesnis nei serumo. Sumaišius, lėkštė ar tabletė švelniai papurtoma rankose, o tai prisideda prie greitesnės ir aiškesnės eritrocitų agliutinacijos. Atsiradus agliutinacijai, bet ne anksčiau kaip po 3 min., į serumo lašus su eritrocitais, kur įvyko agliutinacija, įlašinamas vienas lašas 0,9 % natrio chlorido tirpalo ir stebima tol, kol praeis 5 minutės. Po 5 minučių perskaitykite reakciją sklindančioje šviesoje.

  Jei agliutinacija neaiški, į serumo ir kraujo mišinį papildomai įlašinamas vienas lašas 0,9 % natrio chlorido tirpalo, po to daroma išvada apie priklausomybę grupei (18.4 lentelė).

• Reakcijos rezultatai [Rodyti] .
  1. Agliutinacijos nebuvimas visuose trijuose lašuose rodo, kad tiriamajame kraujyje nėra agliutinogeno, tai yra, kraujas priklauso 0(I) grupei.
  2. Agliutinacijos pradžia lašuose su serumu 0(I) ir B(III) rodo, kad kraujyje yra agliutinogeno A, tai yra, kraujas priklauso A(II) grupei.
  3. Agliutinacijos buvimas lašuose su 0(I) ir A(II) grupės serumais rodo, kad tiriamajame kraujyje yra agliutinogeno B, ty B(III) grupės kraujo.
  4. Agliutinacija visuose trijuose lašuose rodo, kad tiriamajame kraujyje yra agliutinogenų A ir B, tai yra, kraujas priklauso AB (IV) grupei. Tačiau šiuo atveju, atsižvelgiant į tai, kad dėl nespecifinės reakcijos galima agliutinacija su visais serumais, ant plokštelės ar plokštelės būtina užlašinti du ar tris lašus standartinio AB(IV) serumo ir įlašinti 1 lašą testo. kraujas jiems. Serumas ir kraujas sumaišomi ir reakcijos rezultatas pastebimas per 5 minutes.

     Jei agliutinacija neįvyko, tiriamasis kraujas priskiriamas AB(IV) grupei. Jei su AB (IV) grupės serumu atsiranda agliutinacija, reakcija yra nespecifinė. Esant silpnai agliutinacijai ir visais abejotinais atvejais kraujas pakartotinai tiriamas standartiniais kitų serijų serumais.

ABO kraujo grupės nustatymas dviguba reakcija
(pagal standartinius serumus ir standartinius eritrocitus)

Standartiniai eritrocitai – tai 0 (I), A (II) ir B (III) grupių šviežių natūralių eritrocitų (arba tiriamųjų ląstelių, nuplautų nuo konservanto) 10-20 % suspensija 0,9 % natrio chlorido tirpale arba citrato-fiziologiniame tirpale. Natūralūs standartiniai eritrocitai gali būti naudojami per 2-3 dienas, jei jie laikomi izotoniniame fiziologiniame tirpale +4°C temperatūroje. Konservuoti standartiniai eritrocitai 2 mėnesius laikomi +4°C temperatūroje ir prieš naudojimą nuplaunami iš konservanto tirpalo.

Ampulės ar buteliukai su standartiniais serumais ir standartiniais eritrocitais dedami į specialias stelažus su atitinkamais ženklais. Norint dirbti su tipavimo reagentais, naudojamos sausos, švarios pipetės, atskiros kiekvienam reagentui. Norėdami plauti stiklines (plastikines) lazdeles ir pipetes, paruoškite stiklines 0,9% natrio chlorido tirpalu.

Grupei nustatyti į mėgintuvėlį be stabilizatoriaus paimama 3-5 ml kraujo. Kraujas turi stovėti 1,5–2 valandas + 15–25 ° C temperatūroje.

• Apibrėžimo pažanga [Rodyti] .

  Ant tabletės užlašinami du lašai (0,1 ml) dviejų serijų 0(I), A(II), B(III) grupių standartinių serumų. Atitinkamai į kiekvieną serumo grupę įlašinamas vienas mažas lašelis (0,01 ml) standartinių 0(I), A(II), B(III) grupių eritrocitų. Vienas lašas tiriamojo kraujo įlašinamas į standartinius serumus, o du lašai tiriamojo serumo – į standartinius eritrocitus. Kraujo kiekis turi būti 8-10 kartų mažesnis nei serumo. Lašai sumaišomi su stikline lazdele ir, 5 minutes purtant tabletę rankose, stebima agliutinacijos pradžia. Jei agliutinacija neryški, į serumo ir kraujo mišinį papildomai įlašinamas vienas lašas 0,9 % natrio chlorido tirpalo (0,1 ml), po to daroma išvada apie priklausomybę grupei (18.4 lentelė).

• ABO sistemos kraujo grupės nustatymo rezultatų įvertinimas [Rodyti] .
  1. Agliutinacijos su standartiniais eritrocitais A ir B buvimas ir agliutinacijos nebuvimas trijuose standartiniuose dviejų serijų serumuose rodo, kad tiriamajame serume yra ir alfa, ir beta agliutinino, o tiriamuosiuose eritrocituose nėra agliutinogenų, t. , kraujas priklauso 0 (I) grupei.
  2. Agliutinacijos buvimas su standartiniais 0(I), B(III) grupių serumais ir su standartiniais B(III) grupės eritrocitais rodo, kad tirtuose eritrocituose yra agliutinogeno A, o tirtame serume – agliutinino beta. Todėl kraujas priklauso A(II) grupei.
  3. Agliutinacijos buvimas su standartiniais 0 (I), A (II) grupių serumais ir su standartiniais A (II) grupės eritrocitais rodo, kad tirtuose eritrocituose yra agliutinogeno B, o tirtame serume yra agliutinino alfa. Todėl kraujas priklauso B(III) grupei.
  4. Agliutinacijos su visais standartiniais serumais buvimas ir agliutinacijos su visais standartiniais eritrocitais nebuvimas rodo, kad tirtuose eritrocituose yra abu agliutininai, tai yra, kraujas priklauso AB(IV) grupei.

Kraujo grupės nustatymas
naudojant anti-A ir anti-B koliklonus

Zoliclonai anti-A ir anti-B (monokloniniai antikūnai prieš A ir B antigenus) yra skirti žmogaus ABO sistemos kraujo grupei nustatyti vietoj standartinių izohemagliutinuojančių serumų. Kiekvienam kraujo tipui nustatyti naudojama viena anti-A ir anti-B reagentų partija.

• Apibrėžimo pažanga [Rodyti] .

  Ant tabletės (plokštelės) užlašinamas vienas didelis lašas anti-A ir anti-B tsoliclones (0,1 ml) su atitinkamais užrašais: „Anti-A“ arba „Anti-B“. Šalia dedamas vienas nedidelis tiriamojo kraujo lašas (kraujo reagento santykis 1:10), tada reagentas ir kraujas sumaišomi ir reakcijos eiga stebima švelniai siūbuojant lėkštelę ar plokštelę.

  Agliutinacija su anti-A ir anti-B koliklonais paprastai įvyksta per pirmąsias 5-10 sekundžių. Stebėti reikia 2,5 minutės, nes vėliau gali prasidėti agliutinacija su eritrocitais, turinčiais silpnų A arba B antigenų atmainų.

• Agliutinacijos reakcijos su anti-A ir anti-B koliklonais rezultatų įvertinimas pateiktas lentelėje. 18.4, kuriame taip pat pateikiami agliutininų nustatymo donorų serume, naudojant standartinius eritrocitus, rezultatai.

Įtarus spontanišką agliutinaciją asmenims, turintiems AB(IV) kraujo grupę, atliekamas kontrolinis tyrimas su 0,9 % natrio chlorido tirpalu. Atsakymas turi būti neigiamas.

Zoliclonai anti-A (rožinė) ir anti-B (mėlyna) tiekiami natūralios ir liofilizuotos formos ampulėse po 20, 50, 100 ir 200 dozių su tirpikliu, pridedamu prie kiekvienos ampulės, atitinkamai 2, 5, 10, 20 ml. .

Papildoma ABO kraujo grupės nustatymo su anti-A ir anti-B reagentais teisingumo kontrolė yra anti-AB monokloninis reagentas (Gematologas, Maskva). Patartina anti-AB reagentą naudoti lygiagrečiai tiek su imuniniais polikloniniais serumais, tiek su monokloniniais reagentais. Dėl reakcijos su anti-AB reagentu išsivysto A (II), B (III) ir AB (IV) grupių eritrocitų agliutinacija; 0(I) grupės eritrocitai neturi agliutinacijos.

KLAIDOS NUSTATANT GRUPĖS PRIEDUS

Klaidos nustatant kraujo grupes gali priklausyti nuo trijų priežasčių:

1. techninis;
2. standartinių serumų ir standartinių eritrocitų nepakankamumas;
3. tiriamo kraujo biologinės savybės.

Techninės klaidos apima:

• a) neteisingas serumų išdėstymas ant tabletės;
• b) neteisingi kiekybiniai serumų ir eritrocitų santykiai;
• c) nepakankamai švarių tablečių ir kitų su krauju besiliečiančių daiktų naudojimas. Kiekvienam serumui turi būti atskira pipetė; pipetėms plauti turi būti naudojamas tik 0,9% natrio chlorido tirpalas;
• d) neteisingas tirto kraujo užrašymas;
• e) agliutinacijos reakcijai nustatyto laiko nesilaikymas; skubant, kai į reakciją atsižvelgiama nepasibaigus 5 minutėms, agliutinacija gali neįvykti, jei tiriamajame kraujyje yra silpnų agliutinogenų; jei reakcija yra per daug eksponuojama ilgiau nei 5 minutes, lašai iš kraštų gali išdžiūti, imituodami agliutinaciją, dėl kurios taip pat bus padaryta klaidinga išvada;
• f) agliutinacijos trūkumas dėl aukštos (virš 25°C) aplinkos temperatūros. Norint išvengti šios klaidos, patartina naudoti specialiai paruoštus serumus darbui karštame klimate; kraujo grupėms nustatyti lėkštėje arba plastikiniame padėkle, kurio dugno išorinis paviršius nuleidžiamas į šaltą vandenį.
• g) neteisingas centrifugavimas: nepakankamas centrifugavimas gali sukelti klaidingai neigiamą rezultatą, o per didelis centrifugavimas gali sukelti klaidingai teigiamą rezultatą.

Klaidos, priklausančios nuo sugedusių standartinių serumų ir standartinių eritrocitų naudojimo:

• a) silpni standartiniai serumai, kurių titras mažesnis nei 1:32 arba pasibaigęs, gali sukelti vėlyvą ir silpną agliutinaciją;
• b) naudojant netinkamus standartinius serumus ar eritrocitus, kurie buvo paruošti nesteriliai ir nepakankamai konservuoti, atsiranda nespecifinė „bakterinė“ agliutinacija.

Klaidos, priklausančios nuo tiriamojo kraujo biologinių savybių:

Klaidos, priklausančios nuo tirtų eritrocitų biologinių savybių:

• a) vėlyva ir silpna agliutinacija atsiranda dėl „silpnų“ antigenų formų, eritrocitų, dažniau – silpno agliutinogeno A 2 buvimo A ir AB grupėse. Tuo pačiu metu, nustatant kraujo grupę netiriant serumo agliutininų buvimui (paprasta reakcija), galima pastebėti klaidų, dėl kurių A 2 B grupės kraujas apibrėžiamas kaip B (III) grupė. , o kraujas A 2 – kaip 0 grupė (I). Todėl, siekiant išvengti klaidų, tiek donorų, tiek recipientų kraujo grupės nustatymas turi būti atliekamas naudojant standartinius eritrocitus (dviguba arba kryžminė reakcija). Norint nustatyti agliutinogeną A 2, rekomenduojama pakartoti tyrimą su kitų tipų (serija) reagentais, naudojant kitus laboratorinius stiklinius indus, ilginant reakcijos registravimo laiką.

  Specifiniai reagentai kraujo grupei išaiškinti esant silpniems antigeno A variantams (A 1, A 2, A 3) tiesioginės agliutinacijos reakcijos būdu yra anti-A sl ir anti-A reagentas).

• b) „panagliutinacija“ arba „autoagliutinacija“, tai yra, kraujo gebėjimas duoti tą pačią nespecifinę agliutinaciją su visais ir net savo serumais. Tokios reakcijos intensyvumas susilpnėja po 5 minučių, o tikroji agliutinacija didėja. Dažniausiai pasireiškia hematologiniams, onkologiniams ligoniams, apdegusiems ligoniams ir kt. Kontrolei rekomenduojama įvertinti, ar tirtų eritrocitų agliutinacija neįvyksta standartiniame AB (IV) grupės serume ir fiziologiniame tirpale.

  „Panagliutinacijos“ kraujo grupę galima nustatyti tris kartus nuplovus eritrocitus. Nespecifinei agliutinacijai pašalinti tabletė 5 minutėms dedama į +37°C termostatą, po to nespecifinė agliutinacija išnyksta, tačiau išlieka tikroji. Patartina pakartoti nustatymą naudojant monokloninius antikūnus, Kumbso testą.

  Tuo atveju, jei eritrocitų plovimas neduoda norimo rezultato, būtina pakartotinai paimti kraujo mėginį į pašildytą mėgintuvėlį, mėginį įdėti į terminį indą, kad temperatūra būtų +37 °C, ir pristatyti. į laboratoriją analizei. Kraujo grupės nustatymas turi būti atliekamas +37 ° C temperatūroje, kuriai naudojami iš anksto pašildyti reagentai, fiziologinis tirpalas ir tabletė.

• c) tirto kraujo eritrocitai sulankstomi į „monetų stulpelius“, kuriuos makroskopinio tyrimo metu galima supainioti su agliutinatais. Įpylus 1-2 lašus izotoninio natrio chlorido tirpalo, po to švelniai papurtant tabletę, rutuliukai paprastai sunaikinami.
• d) mišri arba nepilna agliutinacija: dalis eritrocitų agliutinuojasi, o dalis lieka laisvi. Jis stebimas A(II), B(III) ir AB(IV) grupių pacientams po kaulų čiulpų transplantacijos arba per pirmuosius tris mėnesius po 0(I) grupės kraujo perpylimo. Periferinio kraujo eritrocitų nevienalytiškumas aiškiai patvirtintas DiaMed gelio testu.

Klaidos, priklausančios nuo tiriamo serumo biologinių savybių:

• a) skirtingo specifiškumo antikūnų aptikimas atliekant įprastinius tyrimus yra ankstesnio jautrinimo rezultatas. Patartina nustatyti antikūnų specifiškumą ir atrinkti tipiškus eritrocitus be antigeno, nuo kurio buvo nustatyta imunizacija. Imunizuotas recipientas turi individualiai pasirinkti suderinamą donoro kraują;
• b) nustačius standartinių eritrocitų „monetų stulpelių“ susidarymą esant tiriamajam serumui, nenormalų rezultatą patartina patvirtinti naudojant standartinius 0 (I) grupės eritrocitus. Norėdami atskirti "pinigų stulpelius" ir tikrus agliutinatus, įlašinkite 1-2 lašus izotoninio natrio chlorido tirpalo ir suplakite tabletę, kol "pinigų stulpeliai" sunaikinami;
• c) anti-A arba anti-B antikūnų nebuvimas. Galbūt naujagimiams ir pacientams, kurių humoralinis imunitetas yra slopinamas;
iš viso puslapių: 10

LITERATŪRA [Rodyti] .

1. Imunologinė donoro ir recipiento atranka atliekant kraujo perpylimą, jo komponentai ir kaulų čiulpų transplantacija / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. ir kiti - Leningradas, 1979. - 29 p.
2. Kaleko S. P., Serebryanaya N. B., Ignatovich G. P. ir kt.. Allosensibilizacija hemokomponentinėje terapijoje ir histo-suderinamų donoro ir recipiento porų atrankos optimizavimas karinėse medicinos įstaigose / Metodas. rekomendacijos - Sankt Peterburgas, 1994. - 16 p.
3. Praktinė transfuziologija / Red. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. ir tt - Maskva: Triada-T, 1996. - 435 p.
4. Karinės transfuziologijos vadovas / Red. E. A. Nechajevas. - Maskva, 1991. - 280 p.
5. Transfuzijos medicinos vadovas / Red. E. P. Svedentsova. - Kirovas, 1999.- 716s.
6. Rumyantsev A. G., Agranenko V. A. Klinikinė transfuziologija.- M.: GEOTAR MEDICINA, 1997.- 575 p.
7. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Saugus kraujo perpylimas: vadovas gydytojams. - Sankt Peterburgas: Petras, 2000. - 320 p.
8. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryanaya N.B. Hemokomponentinės terapijos imunologinis ir infekcinis saugumas - Sankt Peterburgas: Nauka, 1998. - 232 p.
9. Schiffmanas F.J. Kraujo patofiziologija / Per. iš anglų kalbos - M. - Sankt Peterburgas: leidykla BINOM - Nevskio tarmė, 2000. - 448 p.
10. Kraujo perpylimas klinikinėje medicinoje / Red. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras.- Oksfordas, 1988.- 1233 p.

Šaltinis: Medicinos laboratorinė diagnostika, programos ir algoritmai. Red. prof. Karpishchenko A.I., Sankt Peterburgas, Intermedica, 2001 m

Kraujo grupės yra normalios paveldimos įvairių imunologinių kraujo požymių. Remiantis šiomis savybėmis, visi žmonės yra suskirstyti į keturias grupes, nepriklausomai nuo rasės, amžiaus ir lyties. Žmogaus kraujo grupė visą gyvenimą išlieka pastovi. Vienos kraujo grupės žmonės skiriasi nuo kitų kraujo grupių žmonių agliutinogenų (A ir B) buvimu arba nebuvimu eritrocituose ir α bei β agliutininų, esančių serume.

AB0 sistemos kraujo grupės: 0(I) kraujo grupėje yra agliutininų α ir β, agliutinogenų joje nėra; A (II) kraujo grupė – agliutininas α ir agliutinogenas A; B(III) kraujo grupė – agliutininas ir agliutinogenas B; AB(IV) kraujo grupė – yra agliutinogenų A ir B, agliutininų nėra.

Recipientas – asmuo, kuriam perpilamas kraujas, donoras – tas, kuris duoda savo kraują perpilti. Idealiai tinka recipientui tos pačios grupės kraujas. Kraujas yra visiškai nesuderinamas, jei recipientas turi agliutininų su donoro eritrocitais, nes tokiais atvejais vieno kraujo agliutinogenas A yra derinamas su kito agliutininu A arba agliutinogenas B su agliutininu β. Vystosi vadinamasis, t.y., eritrocitų sulipimas į mažus ir didelius gumuliukus. Nesuderinamo kraujo perpylimas sukelia rimtų pasekmių ir gali būti mirties priežastimi. 0(I) grupės recipientui negalima perpilti jokios kitos grupės kraujo, išskyrus tą pačią. AB(IV) grupės recipientas neturi agliutininų, todėl jam gali būti perpiltas visų grupių kraujas. AB(IV) grupės gavėjas yra universalus gavėjas. 0(I) grupės kraują galima perpilti bet kurios kraujo grupės žmonėms. Todėl žmonės, turintys 0(I) grupę, vadinami universaliais donorais.

Be agliutinogenų A ir B, eritrocituose kartais randama ir kitų agliutinogenų (pavyzdžiui, ir kt.). Tais atvejais, kai kraujas nesuderinamas su Rh faktoriumi (žr.), perpilti taip pat neįmanoma, kad būtų išvengta rimtų komplikacijų, susijusių su raudonųjų kraujo kūnelių sunaikinimu (hemolizė).

Prieš kiekvieną kraujo perpylimą, atliekamą pagal receptą ir prižiūrint gydytojui, būtina nustatyti kraujo grupę ir nustatyti jos suderinamumą.

Ryžiai. 1-4. Kraujo grupių nustatymas standartiniais serumais (A, B, 0).
Ryžiai. 1. Ištirtas 0(I) grupės kraujas.
Ryžiai. 2. Ištirtas A (II) grupės kraujas.
Ryžiai. 3. Ištirtas B (III) grupės kraujas.
Ryžiai. 4. Ištirtas AB (IV) grupės kraujas.

Kraujo grupių nustatymo metodas. Kraujo grupei nustatyti paruoškite švarią lėkštę, stiklinį pieštuką, standartinius 0 (I), A (II) ir B (III) kraujo grupių serumus, buteliukus su izotoniniu natrio chlorido tirpalu, alkoholiu ir jodu, sugeriančią medvilnę, stiklą. stiklelis arba stikliniai strypai ir trys pipetės, kurios turi būti sausos (vanduo ardo).

Plokštelė pieštuku padalinta į tris sektorius, kurie žymi 0 (I), A (I), B (III). Į atitinkamą sektorių įvairiomis pipetėmis užlašinamas vienas didelis lašas standartinio 0 (I), A (II), B (III) kraujo grupių serumo. Iš pipetės išleidus serumo lašą, jis nedelsiant nuleidžiamas į buteliuką, iš kurio buvo paimtas. Prieš paimant kraują, pirštas nušluostomas alkoholiu. Sušvirkštus į piršto minkštimą, adata išspaudžiamas kraujo lašas. Stiklo lazdele arba švaraus stiklelio kampu trys kraujo lašai (kiekvienas smeigtuko galvutės dydžio) perpilami į plokštelę šalia 0 (I), A (II) ir B (III) kraujo serumų. grupės. Pasižymėjus laikrodyje laiką, kiekvieną kartą naujais stikliniais strypais kraują maišyti pakaitomis su 0 (I), A (II) ir B (III) kraujo grupių serumais, kol mišinys taps tolygiai rausvas. Kraujo grupės nustatymas atliekamas per 5 minutes. (sekite laikrodį). Praėjus šiam laikui, į kiekvieną mišinio lašą įlašinamas vienas lašas izotoninio natrio chlorido tirpalo. Po to lėkštė su krauju šiek tiek pakratoma, pakreipiama į skirtingas puses, kad mišinys gerai susimaišytų su izotoniniu natrio chlorido tirpalu, bet neišsisklaidytų ant stiklo. Esant teigiamai reakcijai, per pirmąsias minutes nuo maišymo pradžios, net prieš pridedant izotoninio tirpalo, mišinyje atsiranda mažų raudonų grūdelių, susidedančių iš sulipusių raudonųjų kraujo kūnelių. Smulkūs grūdeliai susilieja į didesnius, o kartais ir į įvairaus dydžio dribsnius (agliutinacijos reiškinys). Esant neigiamai reakcijai, mišinys išlieka tolygiai rausvos spalvos. Atliekant tyrimą su trimis aukščiau išvardytais kiekvienos kraujo grupės serumais, gali iškristi tam tikras teigiamų ir neigiamų reakcijų derinys (1-4 pav.). Jei visi trys serumai davė neigiamą reakciją, t. y. visi mišiniai liko tolygiai rožinės spalvos, tirtas kraujas priklauso 0 (I) grupei. Jei tik kraujo grupės A (I) serumas davė neigiamą reakciją, o 0 (I) ir B (III) kraujo grupių serumas davė teigiamą reakciją, t. y. juose atsirado grūdelių, tai tirtas kraujas priklauso A (II) grupė. Jei kraujo grupės B(III) serumas davė neigiamą reakciją, o 0(I) ir A(II) kraujo grupių serumas – teigiamas, tai tirtas kraujas priklauso B(III) grupei. Jeigu visi trys serumai davė teigiamas reakcijas, t.y., visur pasireiškė granuliuotumas, tirtas kraujas priklauso AB (IV) grupei. Bet kokie kiti deriniai rodo apibrėžimo klaidą. Kraujo grupių nustatymo klaidų priežastys ir jų prevencijos priemonės. 1. Kraujo perteklius, jei išgertas per didelis lašas. Kraujo lašas turi būti 10 kartų mažesnis nei serumo lašas. 2. Jei serumai yra silpni arba tiriamojo eritrocitai blogai sulimpa, galima matyti agliutinaciją (žr.), nes reakcija prasideda vėlai arba yra lengva. Būtina paimti patikimus serumus, kurių aktyvumas yra patikrintas ir galiojimo laikas nepasibaigęs. 3. Esant žemai aplinkos temperatūrai, gali pasireikšti nespecifinė šalta agliutinacija – panagliutinacija. Įdėjus izotoninio natrio chlorido ir sukratant plokštelę, paprastai pašalinama šalta agliutinacija. Norint to išvengti, aplinkos oro temperatūra turi būti ne žemesnė kaip 12 ir ne aukštesnė kaip 25°. 4. Ilgai stebint, mišinys pradeda džiūti iš periferijos, kur kartais atsiranda grūdėtumas. Nesant granuliuotumo skystoje mišinio dalyje, galima kalbėti apie neigiamą agliutinacijos reakciją.

Nustatęs kraujo grupę, gydytojas turi nedelsdamas padaryti įrašą priekiniame lape. Baigus darbą, plokštelę, pipetes ir stiklelius reikia gerai nuplauti po čiaupu šiltu vandeniu, sausai nušluostyti ir sudėti į spintelę. ampulėse ar buteliukuose yra laikomi sausoje ir šiltoje patalpoje užrakintoje spintelėje t ° ne aukštesnėje kaip 20 °.

Kraujo grupės nustatymas standartiniais eritrocitais (vadinamoji dviguba reakcija) taikomas tik laboratorijose ir stotyse. Kasdieniame darbe jie naudoja agliutinacijos reakciją su standartiniais serumais pagal aukščiau aprašytą metodą.

Priklausomai nuo antigenų, sudarančių kraujo ląsteles (eritrocitus), tipų, nustatoma konkreti kraujo grupė. Kiekvienam žmogui ji yra pastovi ir nekinta nuo gimimo iki mirties.

Raudonųjų kraujo kūnelių skaičius lemia kraujo tipą

Kas atrado žmonių kraujo grupę

Austrų imunologas Karlas Landsteineris sugebėjo nustatyti žmogaus biologinės medžiagos klasę 1900 m. Tuo metu eritrocitų membranose buvo nustatyti tik 3 antigenų tipai – A, B ir C. 1902 metais pavyko nustatyti 4 eritrocitų klases.

Karlas Landsteineris pirmasis atrado kraujo tipus

Karlas Landsteineris sugebėjo pasiekti dar vieną svarbų laimėjimą medicinoje. 1930 m. mokslininkas kartu su Aleksandru Wieneriu atrado kraujo Rh faktorių (neigiamą ir teigiamą).

Kraujo grupių ir Rh faktoriaus klasifikacija ir charakteristikos

Grupės antigenai klasifikuojami pagal vieną sistemą AB0 (a, b, nulis). Nustatyta koncepcija skirsto kraujo ląstelių sudėtį į 4 pagrindinius tipus. Jų skirtumai yra alfa ir beta agliutininai plazmoje, taip pat specifinių antigenų buvimas eritrocitų membranoje, kurie žymimi A ir B raidėmis.

Lentelė "Kraujo klasių charakteristikos"

Rh faktorius

Be AB0 sistemos, biologinė medžiaga klasifikuojama pagal kraujo fenotipą – specifinio D antigeno buvimą ar nebuvimą joje, kuris vadinamas Rh faktoriumi (Rh). Be baltymo D, Rh sistema apima dar 5 pagrindinius antigenus – C, c, d, E, e. Jie randami išoriniame raudonųjų kraujo kūnelių apvalkale.

Rh faktorius ir kraujo kūnelių klasė nustatomi vaiko įsčiose ir perduodami jam iš tėvų visam gyvenimui.

Kraujo grupės ir Rh faktoriaus nustatymo metodas

Narystės grupėje nustatymo metodai

Norint nustatyti specifinius antigenus eritrocituose, naudojami keli metodai:

• paprasta reakcija – imamas standartinis 1, 2 ir 3 klasių serumas, su kuriuo lyginama paciento biologinė medžiaga;
• dviguba reakcija - technikos bruožas yra ne tik standartinių serumų (palyginti su tiriamomis kraujo ląstelėmis), bet ir standartinių eritrocitų (palyginti su paciento serumu), kurie iš anksto paruošiami kraujo perpylimo centruose, naudojimas;
• monoklininiai antikūnai – naudojami anti-A ir anti-B ciklonai (paruošti naudojant genų inžineriją iš sterilių pelių kraujo), su kuriais lyginama tiriama biologinė medžiaga.

Kraujo grupės nustatymo monoklininiais antikūnais metodas

Pats plazmos tyrimo specifiškumas priklausomybės grupei yra paciento biologinės medžiagos mėginio palyginimas su standartiniu serumu arba standartiniais eritrocitais.

Tokio proceso seka yra tokia:

• 5 ml veninio skysčio suvartojimas tuščiu skrandžiu;
• standartinių mėginių paskirstymas ant stiklelio arba specialios plokštelės (pasirašoma kiekviena klasė);
• lygiagrečiai su mėginiais dedamas paciento kraujas (medžiagos kiekis turi būti kelis kartus mažesnis už standartinių serumo lašų tūrį);
• kraujo skystis maišomas su paruoštais mėginiais (paprasta arba dviguba reakcija) arba su ciklonais (monoklininiais antikūnais);
• po 2,5 minutės į tuos lašus, kuriuose įvyko agliutinacija (susidarė A, B ar AB grupių baltymai), įlašinama specialaus druskos tirpalo.

Biologinėje medžiagoje esanti agliutinacija (eritrocitų sulipimas ir nusodinimas atitinkamais antigenais) leidžia priskirti eritrocitus vienai ar kitai klasei (2, 3, 4). Tačiau tokio proceso nebuvimas rodo nulinę (1) formą.

Kaip nustatyti Rh faktorių

Yra keli Rh priklausomybės nustatymo metodai – anti-Rh serumo ir monoklininio reagento (D grupės baltymų) naudojimas.

Pirmuoju atveju procedūra yra tokia:

• medžiaga paimama iš piršto (leidžiama naudoti konservuotą kraują arba pačius eritrocitus, kurie susidarė nusistovėjus serumui);
• 1 lašas antireuso mėginio įlašinamas į mėgintuvėlį;
• į paruoštą medžiagą įpilamas lašelis tiriamos plazmos;
• lengvas purtymas leidžia serumui tolygiai nusistovėti stikliniame inde;
• po 3 minučių į indą su serumu ir tiriamomis kraujo ląstelėmis įpilamas natrio chlorido tirpalas.

Po kelių vamzdelio apvertimų specialistas iššifruoja. Jei agliutininai pasirodė skaidraus skysčio fone, mes kalbame apie Rh + - teigiamą Rh faktorių. Serumo spalvos ir konsistencijos pokyčių nebuvimas rodo neigiamą Rh.

Kraujo grupės nustatymas pagal Rh sistemą

Rh tyrimas naudojant monoklininį reagentą apima anti-D supertsoliklon (specialų tirpalą) naudojimą. Analizės procedūra apima kelis etapus.

1. Reagentas (0,1 ml) užtepamas ant paruošto paviršiaus (lėkštelės, stiklo).
2. Prie tirpalo įlašinamas lašelis paciento kraujo (ne daugiau kaip 0,01 ml).
3. Du lašai medžiagos sumaišomi.
4. Dekodavimas vyksta praėjus 3 minutėms nuo tyrimo pradžios.

Daugumos planetos žmonių eritrocituose yra rezus sistemos agliutinogeno. Vertinant procentais, 85% recipientų turi baltymo D ir yra Rh teigiami, o 15% jo neturi – tai yra Rh neigiamas.

Suderinamumas

Suderinamumas su krauju atitinka grupę ir Rh faktorių. Šis kriterijus labai svarbus perpilant gyvybiškai svarbų skystį, taip pat planuojant nėštumą ir nėštumo laikotarpį.

Kokią kraujo grupę turės vaikas?

Genetikos mokslas numato, kad vaikai gali paveldėti priklausomybę grupei ir rezusą iš tėvų. Genai perduoda informaciją apie kraujo ląstelių sudėtį (agliutininas alfa ir beta, antigenai A, B), taip pat Rh.

Lentelė "Kraujo grupių paveldėjimas"

Raudonųjų kraujo kūnelių grupių sumaišymas su skirtingu Rh lemia tai, kad vaiko Rh faktorius gali būti ir „pliusas“, ir „minusas“.

1. Jei sutuoktinių Rh yra vienodas (yra D grupės antikūnų), vaikai paveldės dominuojantį baltymą 75 proc., o jo nebus 25 proc.
2. Jei motinos ir tėvo eritrocitų membranose nėra specifinio baltymo D, vaikas taip pat bus Rh neigiamas.
3. Moterims Rh-, o vyrui Rh + - derinys rodo Rh buvimą ar nebuvimą vaikui santykiu nuo 50 iki 50, tuo tarpu galimas konfliktas tarp motinos ir kūdikio antigeno.
4. Jei motina turi Rh +, o tėvas neturi anti-D, Rh bus perduotas kūdikiui su 50/50 tikimybe, tačiau antikūnų konflikto rizikos nėra.

Svarbu suprasti, kad Rh faktorius perduodamas genetiniu lygmeniu. Todėl jei tėvai yra Rh-teigiami, o vaikas gimė su Rh-, vyrai neturėtų skubėti abejoti savo tėvyste. Tokie žmonės šeimoje tiesiog turi žmogų be raudonuosiuose kraujo kūneliuose dominuojančio D baltymo, kurį kūdikis paveldėjo.

Kraujo grupė perpylimui

Atliekant kraujo perpylimą (kraujo perpylimą), svarbu stebėti antigenų grupių ir Rh suderinamumą. Specialistai vadovaujasi Ottenbergo taisykle, kuri teigia, kad donoro kraujo ląstelės neturi sulipti su recipiento plazma. Mažomis dozėmis jie ištirpsta dideliame paciento biologinės medžiagos tūryje ir nenusėda. Šis principas galioja perpilant gyvybiškai svarbių skysčių iki 500 ml ir netinka, kai žmogus smarkiai netenka kraujo.

Retos 4 klasės atstovai kraujo perpylimui tinka 1, 2 ir 3 tipų kraujo skysčiams. Jie laikomi universaliais recipientais (žmonėmis, kurie gauna kraujo infuzijas).

Pacientams, turintiems 1 (0) teigiamą perpylimo rezultatą, bus tinkama 1 klasė (Rh+/-), o žmogui, kurio Rh yra neigiamas, galima infuzuoti tik nulį su Rh-.

Žmonėms, turintiems 2 teigiamus, tinka 1 (+/-) ir 2 (+/-). Pacientai, sergantys Rh-, gali naudoti tik 1 (-) ir 2 (-). Panaši situacija ir su 3 klase. Jei Rh + - galite įpilti 1 ir 3, tiek teigiamų, tiek neigiamų. Rh- atveju tik 1 ir 3 apsieis be anti-D.

Suderinamumas pastojimo metu

Planuojant nėštumą, didelę reikšmę turi vyro ir moters Rh faktoriaus derinys. Tai daroma siekiant išvengti rezus konflikto. Taip atsitinka, kai mama turi Rh-, o vaikas Rh+ paveldėjo iš tėvo. Dominuojančiam baltymui patekus į žmogaus kraują, kur jo nėra, gali prasidėti imunologinė reakcija ir susidaryti agliutininai. Ši būklė provokuoja susidariusių eritrocitų sukibimą ir tolesnį jų naikinimą.

Suderinamumo su krauju lentelė vaiko pastojimui

Motinos ir vaiko rezus nesuderinamumas pirmojo nėštumo metu nėra pavojingas, tačiau prieš antrąjį pastojimą geriau nutraukti antireusinių kūnų gamybą. Moteriai suleidžiamas specialus globulinas, kuris ardo imunologines grandines. Jei to nepadarysite, Rh konfliktas gali išprovokuoti abortą.

Ar gali pasikeisti kraujo grupė?

Medicinos praktikoje pasitaiko atvejų, kai grupinė priklausomybė keičiasi nėštumo metu ar dėl sunkių ligų. Taip yra todėl, kad tokiomis sąlygomis galimas stiprus raudonųjų kraujo kūnelių gamybos padidėjimas. Tai sulėtina raudonųjų kraujo kūnelių sukibimą ir sunaikinimą. Analizėje toks reiškinys atsispindi kaip plazmos sudėties žymenų pasikeitimas. Laikui bėgant viskas stoja į savo vietas.

Kraujo klasė, kaip ir Rh faktorius, yra genetiškai nulemta žmogui dar prieš gimimą ir negali keistis visą gyvenimą.

Dieta pagal kraujo grupes

Pagrindinis mitybos principas pagal narystę grupėje – genetiškai organizmui artimų produktų pasirinkimas, leidžiantis pagerinti virškinimo sistemos veiklą, taip pat numesti svorio.

Peteris D'Adamo buvo pirmasis asmuo, kuris pasiūlė atsižvelgti į kraujo grupę renkantis maistą. Gydytojas natūropatas yra išleidęs keletą knygų, kuriose išdėstė savo sveikos mitybos idėją. Jei pasirinksite tinkamą maistą, galite pamiršti apie prastą maistinių medžiagų pasisavinimą ir skrandžio bei žarnyno problemas.

Lentelė "Dieta pagal kraujo grupę"

Dieta pagal priklausomybę grupei apima alkoholio, rūkymo ribojimą. Svarbus ir aktyvus gyvenimo būdas – bėgimas, vaikščiojimas gryname ore, plaukimas.

Charakterio bruožai pagal kraujo grupę

Kraujo grupė turi įtakos ne tik fiziologinėms organizmo savybėms, bet ir žmogaus charakteriui.

Nulinė grupė

Pasaulyje nulinės kraujo grupės nešiotojų apie 37 proc.

Pagrindinės jų savybės yra šios:

• atsparumas stresui;
• lyderystės polinkiai;
• tikslingumas;
• energija;
• drąsa;
• ambicijos;
• visuomeniškumas.

Nulinės grupės savininkai mieliau užsiima pavojingomis sporto šakomis, mėgsta keliauti ir nebijo nežinomybės (lengvai imasi bet kokio darbo, greitai mokosi).

2 grupė

Labiausiai paplitusi grupė yra 2 (A). Jo nešėjai – santūrūs žmonės, gebantys rasti požiūrį į sunkiausias asmenybes. Jie stengiasi vengti stresinių situacijų, visada yra draugiški ir darbštūs. 2-os grupės savininkai labai ekonomiški, sąžiningai atlieka savo pareigas ir visada pasiruošę padėti.

Tarp charakterio trūkumų išskiriamas užsispyrimas ir nesugebėjimas kaitalioti darbo su poilsiu. Tokius žmones sunku sujaudinti kažkokiems neapgalvotiems poelgiams ar netikėtiems įvykiams.

3 grupė

Žmogus, kurio kraujyje vyrauja B grupės antigenai, yra permainingo pobūdžio. Tokie žmonės išsiskiria padidėjusiu emocionalumu, kūrybiškumu ir nepriklausomumu nuo kitų nuomonės. Jie lengvai leidžiasi į keliones, imasi naujų dalykų. Draugystėje – atsidavęs, meilėje – jausmingas.

Tarp neigiamų savybių dažnai pasireiškia:

• dažni nuotaikos pokyčiai;
• veiksmų nenuoseklumas;
• aukštus reikalavimus kitiems.

3 kraujo grupės savininkai dažnai savo fantazijose bando pasislėpti nuo pasaulio realijų, o tai ne visada yra teigiama charakterio savybė.

4 grupė

4-os grupės vežėjai pasižymi geromis lyderio savybėmis, kurios pasireiškia gebėjimu derėtis ir būti surinktiems lemiamu momentu. Tokie žmonės yra bendraujantys, lengvai susilieja su kitais, vidutiniškai emocingi, universalūs ir protingi.

Nepaisant daugybės charakterio dorybių, 4-osios grupės atstovai dažnai negali priimti vieno sprendimo, kenčia nuo jausmų dvilypumo (vidinio konflikto) ir yra lėto proto.

Specifinė kraujo sudėtis ir dominuojančio faktoriaus (antigeno D) buvimas ar nebuvimas jame perduodamas žmogui su genais. Yra 4 kraujo grupės ir Rh faktorius. Dėl klasifikacijos pagal AB0 ir Rh sistemą specialistai išmoko saugiai perpilti donoro kraują, nustatyti tėvystę ir išvengti Rh konflikto vaikystėje. Kiekvienas žmogus laboratorijoje gali pasitikrinti savo priklausomybę grupei, perduodamas biologinę medžiagą iš piršto ar venos.

Plazmos (serumo) antigenai yra tam tikri aminorūgščių arba angliavandenių kompleksai, esantys kraujo plazmos (serumo) baltymų molekulių paviršiuje.

KRAUJO GRUPĖS SAMPRATA

KRAUJO GRUPĖ – normalių imunologinių ir genetinių kraujo savybių derinys, kuris yra paveldimas ir yra kiekvieno individo biologinė savybė.

Kraujo grupės yra paveldimos, susidaro 3-4 vaisiaus vystymosi mėnesius ir išlieka nepakitusios visą gyvenimą. Manoma, kad žmogaus kraujo grupė apima kelias dešimtis antigenų įvairiais deriniais. Šių derinių – kraujo grupių – iš tikrųjų gali būti keli milijardai. Praktiškai jie yra vienodi tik identiškiems dvyniams, turintiems tą patį genotipą.

Praktinėje medicinoje terminas „kraujo grupė“, kaip taisyklė, atspindi ABO sistemos eritrocitų antigenų ir Rh faktoriaus derinį bei atitinkamus antikūnus kraujo serume.

GRUPINIAI ANTIKŪNAI

Kiekvienam žinomam antigenui buvo rasti to paties pavadinimo antikūnai (anti-A, anti-B, anti-Rhesus, anti-Kell ir kt.). Kraujo grupės antikūnai nėra tokia nuolatinė žmogaus organizmo savybė kaip antigenai. Tik ABO grupės sistemoje antikūnai yra normali įgimta kraujo plazmos savybė. Šių antikūnų (agliutininai a ir b) nuolat yra žmogaus plazmoje.

Kraujo grupės nustatymas pagal avo sistemą

1. Kraujo grupės pagal AVO sistemą

Sąvoka „suderinamumas“ suprantama kaip donoro ir recipiento kraujo derinys antigenų ir antikūnų atžvilgiu, nesukeliantis imunologinės sąveikos.

Priklausomai nuo agliutinogenų A ir B buvimo eritrocituose ir atitinkamų agliutininų a ir b serume, visi žmonės skirstomi į keturias grupes:

O grupė (I) – eritrocituose nėra agliutinogenų, serume yra a ir b agliutininų.

A (II) grupė – agliutinogenas A eritrocituose, agliutininas b serume.

B grupė (III) – agliutinogenas B eritrocituose, agliutininas a serume.

AB (IV) grupė – eritrocituose agliutinogenai A ir B, serume agliutininų nėra.

Antigenas A nėra vienalytis, yra du pagrindiniai potipiai: Pagal tai A (II) grupė turi du pogrupius A (P) ir A 2 (II), o grupė AB (IV) - AB (IV) ir A 2 B (IV).

B grupės antigenas yra homogeniškesnis, nors buvo aprašyti reti jo variantai. Tačiau tai neturi didelės klinikinės reikšmės.

Kraujo grupių nustatymo metodas

Kraujo grupė pagal ABO sistemą nustatoma naudojant agliutinacijos reakciją. Šiuo metu naudojami trys kraujo grupių nustatymo pagal ABO sistemą metodai:

Pagal standartinius izohemagliutinuojančius serumus,

Pagal standartinius izohemagliutinuojančius serumus ir standartinius eritrocitus (kryžminis metodas),

Monokloninių antikūnų (anti-A ir anti-B zoliklonų) pagalba.

Planuojamame tyrime ligoninės gydytojas nustato kraujo grupę naudodamas standartinius izohemagliutinuojančius serumus arba naudodamas koliklonus, po to kraują siunčia į serologinę laboratoriją, kad grupė patikrintų kryžminiu metodu.

Tikra kraujo grupė laikoma tik tada, kai laboratorija patvirtina ligoninės gydytojo gautus duomenis. Jei tyrimų rezultatai skiriasi, abu tyrimai turi būti kartojami.

Skubiu atveju (esant kraujavimui, būtinas skubus kraujo perpylimas) ligoninės gydytojas pats nustato grupę (laboratorijoje atliekama pakartotinė patikra, bet po fakto).

KRAUJO GRUPIŲ NUSTATYMAS STANDARTINIAME IZOHEMAGGLUTINATO SERUME

Labiausiai paplitęs klinikinėje ir laboratorinėje praktikoje.

Metodo esmė – naudojant standartinius izohemagliutinuojančius serumus tiriamajame kraujyje aptikti A ir B grupės antigenus. Jis atliekamas patalpoje su geru apšvietimu 15-25 ° C temperatūroje.

a) Reikalinga įranga

Standartiniai O (I), A (II), B (III) ir AB (IV) grupių izohemagliutinuojantys serumai iš dviejų skirtingų serijų. Išrūgos turi būti skaidrios, be skilimo požymių. Patogumo dėlei standartiniai įvairių grupių hemagliutinuojantys serumai yra nudažyti tam tikra spalva: O (I) - bespalvis (pilkas), A (II) - mėlynas, B (III) - raudonas, AB (IV) - ryškiai geltonas. Pažymėtina, kad šios spalvos pateikiamos ant visų kraujo produktų, turinčių grupinę priklausomybę, etiketėse (kraujas, eritrocitų masė, plazma ir kt.).

Baltos porcelianinės arba emaliuotos lėkštės arba bet kuri kita drėkinama lėkštė, pažymėta 0(1), A(P), H(W), AB(IV).

Izotoninis natrio chlorido tirpalas.

Adatos, pipetės, stiklinės lazdelės (stiklinės stiklinės).

b) Reakcijos technika

1. Standartiniai I, II, III grupių izohemagliutinuojantys serumai užlašinami ant plokštelės (lėkštelės) 0,1 ml tūrio (vienas didelis lašas apie 1 cm skersmens). Siekiant išvengti klaidų, naudojamos dvi serumų serijos iš kiekvienos grupės. Iš viso yra 6 lašai.

2. Šeši lašai tiriamojo kraujo, maždaug 0,01 ml smeigtuko galvutės dydžio (mažas lašelis), paeiliui užlašinami sausu stikliniu lazdele ant plokštelės 6 taškuose, kiekvienas šalia standartinio serumo lašo (kraujo kiekis, kurį reikia atlikti). Išbandytas kiekis turi būti maždaug 10 kartų mažesnis nei standartinio serumo kiekis), tada atsargiai sumaišykite juos su stikliniais strypais su užapvalintais kraštais.

3. Išmaišę lėkštę periodiškai pakratykite.

Agliutinacija prasideda per pirmąsias 10-30 sekundžių.

4. Į tuos lašus, kuriuose įvyko agliutinacija, įlašinkite vieną lašą izotoninio natrio chlorido tirpalo, po kurio įvertinamas reakcijos rezultatas.

Esant teigiamai reakcijai, dažniausiai per pirmąsias 10-30 sekundžių, mišinyje atsiranda plika akimi matomi maži raudoni grūdeliai (agliutinatai), susidedantys iš priklijuotų raudonųjų kraujo kūnelių.

Jei visų trijų grupių serumai davė teigiamą reakciją, tai rodo, kad tirtame kraujyje yra tiek agliutinogenų – A, tiek B ir jis priklauso AB(IV) grupei. Tačiau tokiais atvejais, siekiant atmesti nespecifinę agliutinacijos reakciją (šalčio agliutinaciją, pangliutinaciją, alergiją), būtina atlikti papildomą kontrolinį tiriamo kraujo tyrimą su standartiniu AB (IV) grupės izohemagliutinuojančiu serumu, kuriame nėra agliutininai. Tik tai, kad šiame laše nėra agliutinacijos, kai yra agliutinacijos lašuose, kuriuose yra standartinių 0(1), A(II) ir B(III) grupių serumų, galime reakciją laikyti specifine ir priskirti tiriamą kraują AB 0 (IV) grupė.

Pažymėtina, kad tiriamajame kraujyje esant silpnam antigeno A potipiui, agliutinacijos reakcija su 0 (1) ir B (III) grupių hemagliutinuojančiais serumais prasideda vėliau (po 3-4 min.). Norint tiksliai nustatyti antigeno A potipį, būtina atlikti papildomą reakciją su vadinamuoju anti-A reagentu.

KRAUJO GRUPČIŲ NUSTATYMAS STANDARTINIU IZOHEMAGLIUTININGU SERUMU IR STANDARTINIU ERITROCITU (KRYŽIAMO METODAS)

Metodas dažniausiai naudojamas serologinėse laboratorijose. Metodo esmė – nustatyti A ir B grupės antigenų buvimą ar nebuvimą tiriamajame kraujyje naudojant standartinius izohemagliutinuojančius serumus, taip pat a ir b grupės antikūnus, naudojant standartinius eritrocitus.

Reakcijos su standartiniais eritrocitais įranga skiriasi tuo, kad agliutinacijos reakcijai reikia trijų kraujo grupių standartinių eritrocitų: 0(1), A(II), B(III).

Standartiniai eritrocitai ruošiami iš anksčiau žinomos kraujo grupės donorų kraujo, laikomo 4-8°C temperatūroje.

Ant pažymėtos plokštelės su pipete šešiose ląstelėse užlašinamas vienas didelis lašas tiriamojo kraujo serumo iš mėgintuvėlio (0,1 ml), o šalia jų - vienas mažas lašas (0,01 ml) standartinių 0 grupės eritrocitų ( 1), A (P), V (Sh) (po dvi serijas).

Reakcijos su standartiniais eritrocitais rezultatų interpretavimo ypatybė yra ta, kad 0(1) grupės eritrocitai yra kontroliniai (jie neturi antigenų, todėl specifinė agliutinacijos reakcija su bet kokiu serumu iš esmės neįmanoma).

KRAUJO GRUPIŲ SU MONOKLONINIAIS ANTIKŪNAIS NUSTATYMAS

Kraujo grupei nustatyti naudojami monokloniniai antikūnai, kurių gamybai naudojama hibridomos biotechnologija.

Hibridoma yra ląstelinis hibridas, susidarantis kaulų čiulpų naviko ląstelei (mielomai) susiliejus su imuniniu limfocitu, sintezuojančiu specifinius monokloninius antikūnus. Hibridoma įgyja abiejų „tėvų“ savybes: auglio ląstelei būdingą gebėjimą neribotai augti ir gebėjimą sintetinti antikūnus, būdingus imuniniam limfocitui.

Sukurti standartiniai reagentai – monokloniniai antikūnai (MCA): anti-A ir anti-B coliclones, kurie naudojami eritrocitų agliutinogenams nustatyti. Tsoliklonai yra raudoni (anti-A) arba mėlyni (anti-B) liofilizuoti milteliai, kurie prieš pat tyrimą praskiedžiami izotoniniu natrio chlorido tirpalu.

Anti-A ir anti-B soliclonai užlašinami ant baltos tabletės po vieną didelį lašą (0,1 ml) po atitinkamomis etiketėmis: anti-A arba anti-B. Šalia antikūnų lašų lašinamas vienas nedidelis lašelis (0,01 ml) tiriamojo kraujo. Sumaišius komponentus, agliutinacijos reakcija stebima 2-3 minutes.

RH FAKTORIUS NUSTATYMAS

1940 metais K. Landsteineris ir A. S. Wieneris žmogaus eritrocituose atrado visiškai naują antigeną, kurį pavadino Rh faktoriumi (Rh). Rh faktoriaus yra 85% žmonių kraujyje, o 15% žmonių šio faktoriaus nėra. Taigi jis pavadintas makakos Rhesus vardu, kuris visada jį turi.

Rh antigenai klasifikuojami kaip lipoproteinai. Jie yra labai aktyvūs ir gali sukelti imuninių antikūnų susidarymą.

Rh antigeno buvimas žmogaus vaisiui aptinkamas nuo 5–8 savaičių ir gerai išreiškiamas 3–4 mėnesių embrione.