Stanovení krevní skupiny člověka. Metody stanovení krevní skupiny. Metoda křížové reakce

Každý člověk je nositelem geneticky zděděných vlastností, které se za přirozených podmínek nemění, nebo určitého typu krve. Krevní skupina je charakteristickým znakem bílkovin, sacharidů, glykoproteinů, glykolipidů, které se tvoří na povrchu červených krvinek a nazývají se „antigen“. Jako součást membrány červených tvarovaných prvků se antigeny nacházejí u všech zástupců lidské rasy.

V medicíně je klasifikováno mnoho odrůd antigenů skupiny erytrocytů, to znamená, že různí lidé mohou mít stejnou antigenní sadu. Na základě typologie antigenů existují asi tři desítky systémů krevních skupin, jako je AB0, MNS, Lutheran, Rh, Duffy, Colton atd.

Moderní medicína používá dva – AB0 a Rh, které hrají rozhodující roli při transfuzi. V tomto článku se budeme podrobněji zabývat určenými systémy krevní skupiny "a-be-zero" a "faktor rhesus".

Systém krevní skupiny AB0

Za objev krevní skupiny podle systému AB0 vděčíme rakouskému imunologovi Karlu Landsteinerovi. Byl to on, kdo dospěl k závěru, že stejně vypadající krev se liší vlastnostmi erytrocytů. Tekuté pohyblivé vazivo rozdělil do tří skupin a označil je jako A, B, 0. Později český lékař J. Jánský objevil další skupinu AB a navrhl krevní skupiny označovat čísly I, II, III, IV.

Od té doby je transfuze (transfuze) považována za účinnou terapeutickou metodu, aktivně využívanou při léčbě mnoha onemocnění.

Od roku 1928 schválila hygienická Společnost národů další písmenné označení, které je dodnes akceptováno jako základ klasifikace na celém světě: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).

Krevní skupiny systému AB0 umožnily určit, proč jsou transfuze často úspěšné, ale někdy smrtelné. Landsteiner experimentálně prokázal, že když se erytrocyty jednoho pacienta smíchají s plazmou druhého, krev se sráží a tvoří vločky. Tato schopnost plazmy (séra) lepit (aglutinovat) červené krvinky se nazývá izohemaglutinace. Tato reakce nastává v důsledku přítomnosti v červené uniformě prvků antigenů nazývaných aglutinogeny, které jsou označeny písmeny A, B; a v séru - přirozené protilátky (aglutininy), označované jako a, b. K isohemaglutinaci dochází pouze při výskytu jednopísmenných antigenů a protilátek, např. A-a, B-b.

Proto v lidské krvi není možné kombinovat aglutinogeny a aglutininy stejného jména, protože schopnost aglutinovat erytrocyty povede ke smrti.

Podle Landsteinerovy teorie jsou povoleny pouze čtyři kombinace s vyloučením setkání jednopísmenných antigenů a protilátek nebo 4 typů krve. Základem této separace je schopnost tekutého pohyblivého pojiva obsahovat/neobsahovat antigeny (aglutinogeny) A, B a protilátky (aglutininy) a (alfa nebo anti-A), b (beta nebo anti-B).

Tato tabulka odráží sérologii podle systému krevních skupin AB0:

Jak je z tabulky patrné, v plazmě se vyskytují dva typy hemolyzinů, označované také písmeny a,b. Kombinace jednopísmenných aglutinogenů a hemolyzinů vede k hemolýze (destrukce) erytrocytů. Tato reakce probíhá při teplotě 37-40 °C, přičemž při pokojové teplotě je setkání stejných antigenů a protilátek doprovázeno aglutinací bez hemolýzy.

Plazma majitelů typu II, III, IV obsahuje antiaglutinogeny, které zanechávají červené krvinky a tkáně, které jsou označovány jako aglutinogeny - A, B.

Díky této teorii je transfuze možná a probíhá bez různých druhů komplikací.

Existuje obecně uznávané pravidlo pro stanovení kompatibility krve různých typů: plazma příjemce musí přijmout červené krvinky dárce. Proto u pacienta, který potřebuje transfuzi, je důležité vzít v úvahu význam aglutininů a hemolyzinů, zatímco u pacienta, který daruje krev, je důležité vzít v úvahu aglutinogeny přítomné v červených jednotných prvcích.

Při řešení problému kompatibility krevní skupiny podle AB0 je nutné smíchat tekutou pojivovou tkáň se sérem odebraným od nosičů různých krevních skupin. Aglutinace je pozorována u následujících kombinací:

Z toho vyplývá, že podle systému AB0 se skupina I vyznačuje absolutní kombinací se zbytkem, její nositelé jsou uznáváni jako univerzální dárci. V souladu s tím jsou majitelé skupiny IV univerzálními příjemci, protože červené krvinky tohoto typu by neměly způsobit aglutinaci s plazmou nosičů jiné krevní skupiny.

Vzhledem k tomu, že při tomto přístupu mohou nastat komplikace, je v lékařském prostředí nejčastěji využívána jiná metoda: v případě mnohočetné krevní ztráty je příjemci transfuzován materiál jednoskupinového dárce. Výše popsané pravidlo skupinového míchání se používá zřídka.

Rh krevní systém

Rh (faktor rhesus), objevený ve 40. letech 20. století K. Landsteinerem a K. Wienerem, je po AB0 považován za významný krevní systém. Představuje 50 antigenů detekovaných krevní skupinou. Nejdůležitější jsou 6 (D, C, c, CW, E, e). Nejaktivnější je D-antigen, který určuje, zda lidé patří k Rh-pozitivnímu (Rh +) / Rh-negativnímu (Rh-) faktoru. Přítomnost antigenu indikuje Rh + u 85 % bílých lidí. Zbývajících 15 % nemá žádný antigen (aglutinin), což ukazuje na Rh–. Rh postrádá ve srovnání se systémem AB0 potřebné plazmatické aglutininy. Při transfuzi Rh+ materiálu dárce Rh– příjemci jsou však v krvi testovaného subjektu, kterému byla podána transfuze krve dárce, zjištěny protilátky - anti-Rh - aglutininy. Opakování výkonu vede k aglutinaci erytrocytů, případně transfuznímu šoku.

Vědci došli k závěru, že přenašeči Rh– mohou být transfuzí pouze Rh–.

Podobná situace může nastat u matky - majitelky Rh - při nošení dítěte - nositele Rh +, kdy Rh aglutinogeny, které jsou v jejím těle, aktivně produkují protilátky. První těhotenství zpravidla probíhá úspěšně a končí úspěšným porodem. Podle statistik během následujících těhotenství Rh + protilátky, pronikající placentou, ovlivňují červené krvinky plodu, což vede k potratu nebo hemolytické anémii u novorozenců. Proto se jako imunoprofylaktické opatření podává ženám s Rh– po prvním porodu koncentrát anti-D protilátek.

Vyšetření krevní skupiny a Rh faktoru

Znalost krevní skupiny, Rh faktoru je velmi důležitá pro záchranu života v situacích, nejčastěji spojených s velkou krevní ztrátou nebo jinými patologickými případy, kdy je transfuze jednou z hlavních terapeutických metod.

Výsledky studie ukážou, že krev člověka patří do jedné ze skupin systému „a-be-zero“, založeného na přítomnosti antigenů na červených krvinkách a protilátek.

Určení příslušnosti ke krevní skupině podle systému AB0 probíhá podle aktivní standardní plazmy každé ze skupin s titrem 1:32 a červenými jednotnými prvky odpovídajícími standardu. Někdy se navíc používá plazma skupiny IV. Tyto materiály se smíchají s pacientovou krví, poté se reakce sleduje po dobu 3 minut. Do směsi plazmy s krví se nakape 0,9% roztok chloridu sodného s nástupem lepení a čeká se až 5 minut. Poté je aglutinace čtena přes procházející světlo, na základě čehož je učiněn závěr o skupinové příslušnosti:

• nepřítomnost aglutinace ve všech vzorcích neguje aglutinogen, mluvíme o vztahu k 0(I);
• aglutinace v plazmě se vzorky 0(I), B(III) indikuje aglutinogen A a A(II);
• přítomnost procesu lepení červených tvarovaných prvků v séru 0(I), A(II) indikuje přítomnost aglutinogenu B a vztah k B(III);
• průběh aglutinace ve všech studovaných materiálech ukazuje na přítomnost aglutinogenů A, B a patřících do AB(IV).

V druhém případě je možná nespecifická reakce. Pro potvrzení dat se standardní AB(IV) sérum a krev subjektu smísí a pozorují po dobu 5 minut. Pokud nedojde k aglutinaci erytrocytů, souvisí to se skupinou AB(IV).

V případě mírné aglutinace nebo v případě pochybností se test opakuje znovu.

K testování Rh faktoru se používá standardní činidlo s protilátkami proti Rh antigenům, které se smíchá s krví testovaného. Po přidání fyziologického roztoku po 3-5 minutách se obsah promíchá a vizuálně se v procházejícím světle stanoví přítomnost slepení erytrocytů a precipitace. Když jsou nalezeny červené vločky, je učiněn závěr o vztahu k Rh +. Absence aglutinace ukazuje na Rh–.

Na stejném řádku se obvykle uvádí krevní skupina podle systému AB0 a Rh, např. 0 (I) Rh +, 0 (I) Rh- atd.

Krevní test na příslušnost ke skupině a Rh faktor si můžete udělat v jakékoli klinické laboratoři. Kromě těchto hodnot je v analýze indikována kompatibilita, která určuje materiál, z které skupiny může být Rh faktor v případě naléhavé potřeby transfuzován.

Dědičnost krevních skupin

Je dokázáno, že krevní skupina dítěte se dědí po rodičích. Existuje několik zřejmých vzorců dědičnosti členství ve skupině:

1. V rodině, kde jeden z rodičů má 0 (I), se dítě s IV (AB) skupinou nemůže narodit. V tomto případě nezáleží na skupině druhého rodiče.
2. Maminka a tatínek jsou nositeli 1. krevní skupiny, což znamená, že se děti narodí s podobnou skupinou.
3. Rodiče skupiny 2 mají děti pouze ve skupinách 1 nebo 2.
4. Pokud mají oba manželé skupinu 3, pak jsou děti nositeli pouze 1 nebo 3.
5. Pokud má jeden z rodičů typ IV (AB), nemůže se narodit dítě skupiny 1, bez ohledu na krevní skupinu druhého rodiče.
6. Při kombinaci skupin 2 a 3 u manželů mohou mít děti kteroukoli z možných krevních skupin.

Bylo zaznamenáno, že v 1 případě z deseti milionů může dojít k dědičné mutaci zvané Bombajský fenomén. Její podstatou je, že děti při narození mají skupinu, která neobsahuje antigeny A a B a také složku H. Takoví lidé žijí normální život, potíže mohou nastat pouze s transfuzí nebo stanovením otcovství.

Každý člověk by měl znát svou krevní skupinu, Rh faktor a také kompatibilitu s jinými skupinami. Někdy se stává rozhodujícím faktorem, na kterém závisí život.

V kontaktu s

OBECNÁ USTANOVENÍ

Systém krevních skupin ABO se skládá ze dvou skupinových aglutinogenů, A a B, a dvou odpovídajících plazmatických aglutininů, alfa (anti-A) a beta (anti-B). Různé kombinace těchto antigenů a protilátek tvoří čtyři krevní skupiny: skupina 0(1) - oba antigeny chybí; skupina A (II) - na erytrocytech je přítomen pouze antigen A; skupina B(III) - na erytrocytech je přítomen pouze antigen B; skupina AB (IV) - antigeny A a B jsou přítomny na erytrocytech.

Jedinečnost systému ABO spočívá v tom, že v plazmě neimunizovaných osob jsou přirozené protilátky proti antigenu nepřítomné na erytrocytech: u osob skupiny 0 (1) - protilátky proti A a B; u osob skupiny A (II) - protilátky anti-B; u osob skupiny B (III) - anti-A protilátky; osoby skupiny AB(IV) nemají protilátky proti antigenům systému ABO.

V následujícím textu budou protilátky anti-A a anti-B označovány jako anti-A a anti-B.

Stanovení krevní skupiny ABO se provádí identifikací specifických antigenů a protilátek (dvojitá nebo křížová reakce). Anti-A a anti-B jsou detekovány v krevním séru pomocí standardních erytrocytů A(II) a B(III). Přítomnost nebo nepřítomnost antigenů A a B na erytrocytech se stanoví pomocí monoklonálních nebo polyklonálních protilátek (standardní hemaglutinační séra) příslušné specificity.

Stanovení krevní skupiny se provádí dvakrát: primární studie - na lékařském oddělení (tým pro odběr krve); potvrzující studium - na laboratorním odd. Algoritmus pro provádění imunohematologických laboratorních testů během krevní transfuze je znázorněn na obr. 18.1.

Výsledek stanovení krevní skupiny se zaznamená do pravého horního rohu předního listu anamnézy nebo do deníku (karty) dárce s uvedením data a podepíše se lékařem, který stanovení provedl.

Na severozápadě Ruska je rozložení krevních skupin systému ABO v populaci následující: skupina 0 (I) - 35 %; skupina A(II) - 35-40 %; skupina B(III) - 15-20 %; skupina AB (IV) - 5-10 %.

Je třeba si uvědomit, že existují různé typy (slabé varianty) jak antigenu A (ve větší míře), tak antigenu B. Nejčastějšími typy antigenu A jsou A 1 a A 2. Prevalence antigenu A 1 u jedinců skupin A (II) a AB (IV) je 80 % a antigenu A 2 - asi 20 %. Vzorky krve s A2 mohou obsahovat protilátky anti-A1, které interagují se standardními červenými krvinkami skupiny A (II). Přítomnost anti-A 1 se zjišťuje křížovým stanovením krevních skupin a během testu na individuální kompatibilitu.

Pro diferencované stanovení variant antigenu A (A 1 a A 2) je nutné použít specifická činidla (fytohemaglutininy nebo monoklonální protilátky anti-A 1. Pacienti skupiny A 2 (II) a A 2 B (IV) potřebují být transfuzi hemokomponent obsahujících erytrocyty skupiny A 2 (II) a A 2 B (IV) Lze také doporučit transfuze promytých erytrocytů: 0 (I) - pro pacienty s krevní skupinou A 2 (II); 0 ( I) a B (III) - pro pacienty s krevní skupinou A 2 B(II).

Stanovení krevní skupiny podle systému ABO

Krevní skupiny jsou určeny standardními séry (jednoduchá reakce) a standardními erytrocyty (dvojitá nebo křížová reakce).

Krevní skupina se stanoví jednoduchou reakcí se dvěma sériemi standardních isohemaglutinačních sér.

• Pokrok v definici [ukázat] .

  Stanovení krevní skupiny se provádí za dobrého světla a teploty od + 15 do + 25 ° C na tabletách. Na levé straně tablety napište 0 (1), uprostřed - A (II), na pravé straně - B (III). Uprostřed horního okraje tablety je uvedeno jméno dárce nebo číslo testované krve. Použijte aktivní standardní séra tří skupin (O, A, B) s titrem alespoň 1:32, dvě série. Séra jsou umístěna ve speciálních stojanech ve dvou řadách. Každé sérum odpovídá označené pipetě. Sérová skupina AB(IV) se používá jako další kontrola.

  Jedna nebo dvě kapky standardních sér se aplikují na tabletu ve dvou řadách: skupina 0(1) sérum - vlevo, skupina A(II) sérum - uprostřed, skupina B(III) sérum - vpravo.

  Kapky krve z prstu nebo zkumavky se nanesou pipetou nebo skleněnou tyčinkou do blízkosti každé kapky séra a promíchají se tyčinkou. Množství krve by mělo být 8-10krát menší než sérum. Po promíchání se destička nebo tableta jemně protřepe v rukou, což přispívá k rychlejší a jasnější aglutinaci erytrocytů. Jakmile dojde k aglutinaci, ale ne dříve než po 3 minutách, přidá se jedna kapka 0,9% roztoku chloridu sodného ke kapkám séra s erytrocyty, kde došlo k aglutinaci, a pozorování pokračuje až do uplynutí 5 minut. Po 5 minutách odečtěte reakci v procházejícím světle.

  Pokud je aglutinace nejasná, přidá se do směsi séra a krve navíc jedna kapka 0,9% roztoku chloridu sodného, ​​načež se udělá závěr o příslušnosti ke skupině (tab. 18.4).

• Výsledky reakce [ukázat] .
  1. Absence aglutinace u všech tří kapek ukazuje, že v testované krvi není žádný aglutinogen, to znamená, že krev patří do skupiny 0(I).
  2. Nástup aglutinace po kapkách se sérem 0(I) a B(III) naznačuje, že v krvi je aglutinogen A, to znamená, že krev patří do skupiny A(II).
  3. Přítomnost aglutinace v kapkách se sérem skupiny 0(I) a A(II) naznačuje, že testovaná krev obsahuje aglutinogen B, tedy krev skupiny B(III).
  4. Aglutinace ve všech třech kapkách ukazuje na přítomnost aglutinogenů A a B v testované krvi, to znamená, že krev patří do skupiny AB (IV). Avšak v tomto případě, vzhledem k tomu, že aglutinace se všemi séry je možná v důsledku nespecifické reakce, je nutné aplikovat dvě nebo tři kapky standardního AB(IV) séra na destičku nebo destičku a přidat 1 kapku testu krev k nim. Sérum a krev se smíchají a výsledek reakce je pozorován do 5 minut.

     Pokud nedošlo k aglutinaci, pak je testovaná krev zařazena do skupiny AB(IV). Pokud se objeví aglutinace se sérem skupiny AB (IV), pak je reakce nespecifická. V případě slabé aglutinace a ve všech pochybných případech se krev znovu testuje standardními séry z jiných sérií.

Stanovení krevní skupiny ABO dvojí reakcí
(podle standardních sér a standardních erytrocytů)

Standardní erytrocyty jsou 10-20% suspenze čerstvých nativních erytrocytů (nebo testovaných buněk promytých z konzervačního prostředku) skupin 0 (I), A (II) a B (III) v 0,9% roztoku chloridu sodného nebo fyziologickém roztoku citrátu. Nativní standardní erytrocyty mohou být použity během 2-3 dnů, pokud jsou skladovány v izotonickém fyziologickém roztoku při +4 °C. Konzervované standardní erytrocyty se skladují při +4 °C po dobu 2 měsíců a před použitím se promyjí z konzervačního roztoku.

Ampule nebo lahvičky se standardními séry a standardními erytrocyty jsou umístěny ve speciálních stojanech s příslušným označením. Pro práci s typizačními reagenciemi se používají suché, čisté pipety, oddělené pro každé činidlo. K mytí skleněných (plastových) tyčinek a pipet připravte sklenice s 0,9% roztokem chloridu sodného.

Pro určení skupiny se odebere 3-5 ml krve do zkumavky bez stabilizátoru. Krev by měla stát 1,5-2 hodiny při teplotě + 15-25 ° C.

• Pokrok v definici [ukázat] .

  Na tabletu se aplikují dvě kapky (0,1 ml) standardních sér skupin 0(I), A(II), B(III) dvou sérií. V souladu s tím se do každé skupiny sér umístí jedna malá kapka (0,01 ml) standardních erytrocytů skupin 0(I), A(II), B(III). Jedna kapka testované krve se přidá ke standardnímu séru a dvě kapky testovacího séra se přidají ke standardním erytrocytům. Množství krve by mělo být 8-10krát menší než sérum. Kapky se promíchají skleněnou tyčinkou a třepáním tablety v rukou po dobu 5 minut se sleduje nástup aglutinace. Pokud je aglutinace nejasná, přidá se do směsi séra a krve navíc jedna kapka 0,9% roztoku chloridu sodného (0,1 ml), načež se udělá závěr o příslušnosti ke skupině (tab. 18.4).

• Vyhodnocení výsledků stanovení krevní skupiny systému ABO [ukázat] .
  1. Přítomnost aglutinace se standardními erytrocyty A a B a nepřítomnost aglutinace ve třech standardních sérech ze dvou sérií naznačuje, že v testovacím séru jsou přítomny oba aglutininy, alfa i beta, a v testovaných erytrocytech nejsou žádné aglutinogeny, tzn. , krev patří do skupiny 0 (I) .
  2. Přítomnost aglutinace se standardními séry skupin 0(I), B(III) a se standardními erytrocyty skupiny B(III) naznačuje, že ve studovaných erytrocytech je přítomen aglutinogen A a ve studovaném séru aglutinin beta. Krev tedy patří do skupiny A(II).
  3. Přítomnost aglutinace se standardními séry skupin 0 (I), A (II) a se standardními erytrocyty skupiny A (II) ukazuje, že studované erytrocyty obsahují aglutinogen B a studované sérum obsahuje aglutinin alfa. Krev tedy patří do skupiny B(III).
  4. Přítomnost aglutinace se všemi standardními séry a nepřítomnost aglutinace se všemi standardními erytrocyty naznačuje, že ve studovaných erytrocytech jsou přítomny oba aglutininy, to znamená, že krev patří do skupiny AB(IV).

Stanovení krevní skupiny
pomocí anti-A a anti-B koliklonů

Zoliklony anti-A a anti-B (monoklonální protilátky proti antigenům A a B) jsou určeny k určení krevní skupiny lidského ABO systému namísto standardních isohemaglutinačních sér. Pro každou krevní skupinu se použije jedna šarže reagencií anti-A a anti-B.

• Pokrok v definici [ukázat] .

  Jedna velká kapka anti-A a anti-B tsoliclonů (0,1 ml) se aplikuje na tabletu (destičku) pod příslušnými nápisy: „Anti-A“ nebo „Anti-B“. K ní se kápne jedna malá kapka testované krve (poměr krevního činidla je 1:10), poté se činidlo a krev smísí a mírným kýváním destičkou nebo destičkou se sleduje průběh reakce.

  K aglutinaci s anti-A a anti-B koliklony obvykle dochází během prvních 5-10 sekund. Pozorování by mělo být prováděno po dobu 2,5 minuty, vzhledem k možnosti pozdějšího nástupu aglutinace s erytrocyty obsahujícími slabé odrůdy antigenů A nebo B.

• Vyhodnocení výsledků aglutinační reakce s anti-A a anti-B koliklony je uvedeno v tabulce. 18.4, jehož součástí jsou i výsledky stanovení aglutininů v séru dárců pomocí standardních erytrocytů.

Při podezření na spontánní aglutinaci u osob s krevní skupinou AB(IV) se provádí kontrolní studie s 0,9% roztokem chloridu sodného. Odpověď musí být negativní.

Zoliklony anti-A (růžové) a anti-B (modré) jsou k dispozici v nativní i lyofilizované formě v ampulích po 20, 50, 100 a 200 dávkách s rozpouštědlem připojeným ke každé ampulce, 2, 5, 10, 20 ml, resp. .

Doplňkovou kontrolou správnosti stanovení krevní skupiny ABO činidly anti-A a anti-B je monoklonální činidlo anti-AB (gematolog, Moskva). Je vhodné používat anti-AB reagencie souběžně s imunitními polyklonálními séry a monoklonálními reagenciemi. V důsledku reakce s anti-AB činidlem dochází k aglutinaci erytrocytů skupin A (II), B (III) a AB (IV); erytrocyty skupiny 0(I) nemají žádnou aglutinaci.

CHYBY PŘI URČOVÁNÍ SKUPINOVÉHO PŘÍSLUŠENSTVÍ

Chyby při určování krevních skupin mohou záviset na třech příčinách:

1. technický;
2. méněcennost standardních sér a standardních erytrocytů;
3. biologické vlastnosti studované krve.

Technické chyby zahrnují:

• a) nesprávné uspořádání sér na tabletu;
• b) nesprávné kvantitativní poměry sér a erytrocytů;
• c) používání nedostatečně čistých tablet a jiných předmětů přicházejících do styku s krví. Pro každé sérum by měla být samostatná pipeta; pro mytí pipet by se měl používat pouze 0,9% roztok chloridu sodného;
• d) nesprávný záznam studované krve;
• e) nedodržení času stanoveného pro aglutinační reakci; v případě spěchu, kdy je reakce zohledněna před uplynutím 5 minut, nemusí dojít k aglutinaci, pokud jsou v testované krvi slabé aglutinogeny; pokud je reakce přeexponována déle než 5 minut, mohou kapky z okrajů zaschnout, což simuluje aglutinaci, což také povede k chybnému závěru;
• f) nedostatečná aglutinace v důsledku vysoké (nad 25 °C) okolní teploty. Aby se zabránilo této chybě, je vhodné používat speciálně připravená séra pro práci v horkém klimatu; ke stanovení krevních skupin na talíři nebo plastovém tácku, jehož vnější povrch dna se ponoří do studené vody.
• g) nesprávná centrifugace: nedostatečná centrifugace může vést k falešně negativnímu výsledku a přílišná centrifugace může vést k falešně pozitivnímu výsledku.

Chyby v závislosti na použití vadných standardních sér a standardních erytrocytů:

• a) slabá standardní séra s titrem menším než 1:32 nebo s prošlou exspirací mohou způsobit pozdní a slabou aglutinaci;
• b) použití nevhodných standardních sér nebo erytrocytů, které byly připraveny nesterilně a nedostatečně konzervované, vede k výskytu nespecifické „bakteriální“ aglutinace.

Chyby v závislosti na biologických vlastnostech testované krve:

Chyby v závislosti na biologických charakteristikách studovaných erytrocytů:

• a) pozdní a slabá aglutinace je způsobena "slabými" formami antigenů, erytrocyty, častěji - přítomností slabého aglutinogenu A 2 ve skupinách A a AB. Zároveň lze v případě stanovení krevní skupiny bez vyšetření séra na přítomnost aglutininů (jednoduchá reakce) pozorovat chyby, díky kterým je krev skupiny A 2 B definována jako skupina B (III) a krev A2 - jako skupina 0 (I). Proto, aby se předešlo chybám, musí být stanovení krevní skupiny dárců i příjemců provedeno pomocí standardních erytrocytů (dvojitá nebo zkřížená reakce). Pro identifikaci aglutinogenu A 2 se doporučuje opakovat studii s jinými typy (řadami) činidel, s použitím jiného laboratorního skla, s prodloužením doby registrace reakce.

  Specifickými činidly pro objasnění krevní skupiny v přítomnosti slabých variant antigenu A (A 1, A 2, A 3) metodou přímé aglutinační reakce jsou činidlo anti-A sl a anti-A).

• b) "panaglutinace" nebo "autoaglutinace", tj. schopnost krve poskytnout stejnou nespecifickou aglutinaci se všemi séry a dokonce i s vlastním sérem. Intenzita takové reakce slábne po 5 minutách, zatímco pravá aglutinace se zvyšuje. Nejčastěji se vyskytuje u pacientů hematologických, onkologických, popálených apod. Pro kontrolu se doporučuje posoudit, zda ve standardním séru skupiny AB (IV) a fyziologickém roztoku dochází k aglutinaci testovaných erytrocytů.

  Krevní skupinu při „panaglutinaci“ lze určit po trojím promytí erytrocytů. Pro eliminaci nespecifické aglutinace se tableta umístí na 5 minut do termostatu při +37°C, poté nespecifická aglutinace zmizí, ale ta pravá zůstane. Stanovení je vhodné opakovat pomocí monoklonálních protilátek, Coombsův test.

  V případě, že promytí erytrocytů nepřinese požadovaný výsledek, je nutné znovu odebrat vzorek krve do předehřáté zkumavky, umístit vzorek do termonádoby, aby byla udržována teplota +37 °C a dodat to do laboratoře k analýze. Stanovení krevní skupiny musí být provedeno při teplotě +37 ° C, pro kterou se používají předehřátá činidla, fyziologický roztok a tableta.

• c) erytrocyty testované krve jsou složeny do „sloupců mincí“, které lze při makroskopickém vyšetření zaměnit za aglutináty. Přidání 1-2 kapek izotonického roztoku chloridu sodného s následným jemným kýváním tablety obvykle zničí rouleaux.
• d) smíšená nebo neúplná aglutinace: některé erytrocyty aglutinují a některé zůstávají volné. Je pozorován u pacientů skupin A(II), B(III) a AB(IV) po transplantaci kostní dřeně nebo během prvních tří měsíců po krevní transfuzi skupiny 0(I). Heterogenita erytrocytů periferní krve je jednoznačně ověřena gelovým testem DiaMed.

Chyby v závislosti na biologických vlastnostech studovaného séra:

• a) průkaz protilátek jiné specificity při rutinním testování je výsledkem předchozí senzibilizace. Je vhodné stanovit specificitu protilátek a vybrat typizované erytrocyty bez antigenu, proti kterému byla imunizace detekována. Imunizovaný příjemce musí individuálně vybrat kompatibilní dárcovskou krev;
• b) při zjištění tvorby „coinových sloupců“ standardních erytrocytů v přítomnosti testovacího séra je vhodné potvrdit abnormální výsledek pomocí standardních erytrocytů skupiny 0 (I). Pro rozlišení "peněžních sloupců" a pravých aglutinátů přidejte 1-2 kapky izotonického roztoku chloridu sodného a protřepejte tabletu, zatímco "peněžní sloupce" jsou zničeny;
• c) nepřítomnost anti-A nebo anti-B protilátek. Možná u novorozenců a pacientů s potlačenou humorální imunitou;
celkem stran: 10

LITERATURA [ukázat] .

1. Imunologická selekce dárce a příjemce u krevních transfuzí, jejích složek a transplantace kostní dřeně / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. a další - Leningrad, 1979. - 29 s.
2. Kaleko S. P., Serebryanaya N. B., Ignatovich G. P. et al. Allosenzibilizace v hemokomponentní terapii a optimalizace výběru histokompatibilních párů dárce-příjemce ve vojenských zdravotnických zařízeních / Metoda. doporučení - Petrohrad, 1994. - 16 s.
3. Praktická transfuziologie / Ed. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. atd. - Moskva: Triada-T, 1996. - 435 s.
4. Průvodce vojenskou transfuziologií / Ed. E. A. Něčajev. - Moskva, 1991. - 280 s.
5. Průvodce transfuzním lékařstvím / Ed. E. P. Svedentsová. - Kirov, 1999.- 716s.
6. Rumyantsev A. G., Agranenko V. A. Klinická transfuziologie.- M.: GEOTAR MEDICINE, 1997.- 575 s.
7. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Bezpečná krevní transfuze: Průvodce pro lékaře.- Petrohrad: Peter, 2000.- 320 s.
8. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryanaya N.B. Imunologická a infekční bezpečnost hemokomponentní terapie - Petrohrad: Nauka, 1998. - 232 s.
9. Schiffman F.J. Patofyziologie krve / Per. z angličtiny - M. - Petrohrad: Nakladatelství BINOM - Něvský dialekt, 2000. - 448 s.
10. Krevní transfuze v klinické medicíně / Ed. P. L. Mollison, C. P. Engelfriet, M. Contreras. - Oxford, 1988. - 1233 s.

Zdroj: Lékařská laboratorní diagnostika, programy a algoritmy. Ed. prof. Karpishchenko A.I., Petrohrad, Intermedica, 2001

Krevní skupiny jsou normální dědičné různé imunologické znaky krve. Na základě těchto charakteristik jsou všichni lidé rozděleni do čtyř skupin bez ohledu na rasu, věk a pohlaví. Krevní skupina člověka zůstává po celý život konstantní. Lidé jedné krevní skupiny se liší od lidí jiných krevních skupin přítomností nebo nepřítomností aglutinogenů (A a B) obsažených v erytrocytech a α a β aglutininů obsažených v séru.

Krevní skupiny systému AB0: 0(I) krevní skupina obsahuje aglutininy α a β, chybí v ní aglutinogeny; A (II) krevní skupina - aglutinin α a aglutinogen A; B(III) krevní skupina-aglutinin a aglutinogen B; Krevní skupina AB(IV) – obsahuje aglutinogeny A a B, aglutininy chybí.

Příjemcem je ten, kdo je transfuzí krve, dárcem je ten, kdo dává svou krev k transfuzi. Ideálně kompatibilní pro příjemce je krev stejné skupiny. Krev je absolutně nekompatibilní, pokud má příjemce aglutininy k erytrocytům dárce, protože v těchto případech je aglutinogen A jedné krve kombinován s aglutininem A druhé krve nebo aglutinogen B s aglutininem β. Rozvíjí se tzv., tedy slepování erytrocytů do malých a velkých hrudek. Transfuze nekompatibilní krve vede k vážným následkům a může být příčinou smrti. Příjemci skupiny 0(I) nemůže být podána transfuze krve z žádné jiné skupiny kromě stejné. Příjemce skupiny AB(IV) nemá žádné aglutininy, takže mu může být podána transfuze krve všech skupin. Příjemce skupiny AB(IV) je univerzální příjemce. Krev skupiny 0(I) může být podána transfuzí lidem jakékoli krevní skupiny. Proto se lidé se skupinou 0(I) nazývají univerzální dárci.

Kromě aglutinogenů A a B se v erytrocytech někdy nacházejí i další aglutinogeny (například apod.). V případech, kdy je krev neslučitelná s Rh faktorem (viz), je také nemožné podat transfuzi, aby se předešlo vážným komplikacím spojeným s destrukcí červených krvinek (hemolýza).

Před každou krevní transfuzí, prováděnou podle předpisu a pod dohledem lékaře, je bezpodmínečně nutné určit krevní skupinu a zjistit její kompatibilitu.

Rýže. 1-4. Stanovení krevních skupin standardními séry (A, B, 0).
Rýže. 1. Testovaná krev skupiny 0(I).
Rýže. 2. Testovaná krev skupiny A (II).
Rýže. 3. Testovaná krev skupiny B (III).
Rýže. 4. Testovaná krev skupiny AB (IV).

Metoda stanovení krevních skupin. Pro stanovení krevní skupiny si připravte čistý talíř, skleněnou tužku, standardní séra krevních skupin 0 (I), A (II) a B (III), lahvičky s izotonickým roztokem chloridu sodného, ​​alkohol a jód, savou bavlnu, sklo sklíčko nebo skleněné tyčinky a tři pipety, které musí být suché (voda ničí).

Deska je rozdělena tužkou na tři sektory, které označují 0 (I), A (I), B (III). Jedna velká kapka standardního séra krevních skupin 0 (I), A (II), B (III) se aplikuje do odpovídajícího sektoru různými pipetami. Poté, co se kapka séra uvolní z pipety, je okamžitě spuštěna do lahvičky, ze které byla odebrána. Před odběrem krve se prst otře alkoholem. Po injekci do dřeně prstu se jehlou vytlačí kapka krve. Skleněnou tyčinkou nebo rohem čistého podložního sklíčka se tři kapky krve (každá o velikosti špendlíkové hlavičky) přenesou na destičku vedle sér krve 0 (I), A (II) a B (III). skupiny. Po zaznamenání času na hodinách pokaždé novými skleněnými tyčinkami promíchejte krev střídavě se séry krevních skupin 0 (I), A (II) a B (III), dokud směs nezíská rovnoměrně růžovou barvu. Stanovení krevní skupiny se provádí do 5 minut. (sledujte hodiny). Po této době se ke každé kapce směsi přidá jedna kapka izotonického roztoku chloridu sodného. Poté se destička s krví mírně protřepe, nakloní v různých směrech, aby se směs dobře promíchala s izotonickým roztokem chloridu sodného, ​​ale neroztekla se po skle. Při pozitivní reakci se během prvních minut od začátku míchání, ještě před přidáním izotonického roztoku, objevují ve směsi drobná červená zrníčka, tvořená slepenými červenými krvinkami. Malá zrna se spojují do větších a někdy do různě velkých vloček (fenomén aglutinace). Při negativní reakci zůstává směs rovnoměrně zbarvená do růžova. Při provádění testu se třemi výše uvedenými séry pro každou krevní skupinu může vypadnout určitá kombinace pozitivních a negativních reakcí (obr. 1-4). Pokud všechna tři séra vykazovala negativní reakci, tj. všechny směsi zůstaly rovnoměrně růžové, testovaná krev patří do skupiny 0 (I). Pokud pouze sérum A (I) krevní skupiny vykázalo negativní reakci a séra krevních skupin 0 (I) a B (III) pozitivně reagovala, tj. objevila se v nich zrna, pak testovaná krev patří skupina A (II). Pokud sérum B(III) krevní skupiny vykázalo negativní reakci a séra krevních skupin 0(I) a A(II) pozitivní, pak testovaná krev patří do skupiny B(III). Pokud všechna tři séra vykazovala pozitivní reakce, tj. zrnitost se objevila všude, testovaná krev patří do skupiny AB (IV). Jakékoli jiné kombinace znamenají chybu v definici. Příčiny chyb při určování krevních skupin a opatření k jejich prevenci. 1. Přebytečná krev, pokud se vezme příliš velká kapka. Kapka krve by měla být 10x menší než kapka séra. 2. Pokud jsou séra slabá nebo se erytrocyty subjektu dobře neslepují, lze pozorovat aglutinaci (viz), protože reakce začíná pozdě nebo je mírná. Je nutné odebírat spolehlivá séra, jejichž aktivita je kontrolována a nevypršela doba použitelnosti. 3. Při nízkých okolních teplotách může docházet k nespecifické chladové aglutinaci – panaglutinaci. Přidání izotonického chloridu sodného s následným protřepáním destičky obvykle eliminuje studenou aglutinaci. Aby se tomu zabránilo, teplota okolního vzduchu by neměla být nižší než 12 a vyšší než 25 °. 4. Dlouhým pozorováním začíná směs vysychat od periferie, kde se někdy objevuje zrnitost. Při absenci zrnitosti v kapalné části směsi lze mluvit o negativní aglutinační reakci.

Po určení krevní skupiny musí lékař okamžitě provést záznam na přední list. Po ukončení práce je třeba destičku, pipety a podložní sklíčka důkladně omýt pod tekoucí vodou teplou vodou, osušit a umístit do skříňky. v ampulích nebo lahvičkách se skladují v suché a teplé místnosti v uzamčené skříni při t ° ne vyšší než 20 °.

Stanovení krevní skupiny standardními erytrocyty (tzv. dvojitá reakce) se používá pouze v laboratořích a na stanicích. V každodenní práci využívají aglutinační reakci se standardními séry podle výše popsané metody.

V závislosti na typech antigenů, které tvoří krvinky (erytrocyty), se určuje konkrétní krevní skupina. Pro každého člověka je konstantní a nemění se od narození do smrti.

Počet červených krvinek určuje krevní skupinu

Kdo objevil krevní skupinu u lidí

Rakouskému imunologovi Karlu Landsteinerovi se v roce 1900 podařilo identifikovat třídu lidského biologického materiálu. V membránách erytrocytů byly tehdy identifikovány pouze 3 typy antigenu - A, B a C. V roce 1902 bylo možné identifikovat 4 třídy erytrocytů.

Karl Landsteiner byl první, kdo objevil krevní skupiny

Karl Landsteiner dokázal v medicíně dosáhnout dalšího významného úspěchu. V roce 1930 objevil vědec v tandemu s Alexandrem Wienerem Rh faktor krve (negativní a pozitivní).

Klasifikace a charakteristika krevních skupin a Rh faktoru

Skupinové antigeny jsou klasifikovány podle jediného systému ABO (a, b, nula). Zavedený koncept rozděluje složení krvinek do 4 hlavních typů. Jejich rozdíly jsou v alfa a beta aglutininech v plazmě a také v přítomnosti specifických antigenů na membráně erytrocytů, které se označují písmeny A a B.

Tabulka "Charakteristiky krevních tříd"

Rh faktor

Kromě systému AB0 je biologický materiál klasifikován podle krevního fenotypu - přítomnosti nebo nepřítomnosti specifického D antigenu v něm, který se nazývá Rh faktor (Rh). Kromě proteinu D pokrývá Rh systém ještě 5 hlavních antigenů - C, c, d, E, e. Nacházejí se ve vnějším obalu červených krvinek.

Rh faktor a třída krvinek jsou uloženy v dítěti v děloze a přenášejí se na něj od rodičů po celý život.

Metoda stanovení krevní skupiny a Rh faktoru

Metody identifikace členství ve skupině

K detekci specifických antigenů v erytrocytech se používá několik metod:

• jednoduchá reakce - odebírá se standardní sérum tříd 1, 2 a 3, se kterým se porovnává biologický materiál pacienta;
• dvojitá reakce - znakem techniky je použití nejen standardních sér (ve srovnání se studovanými krvinkami), ale i standardních erytrocytů (ve srovnání se sérem pacienta), které jsou předběžně připravovány v krevních transfuzních centrech;
• monoklinické protilátky - používají se anti-A a anti-B cyklony (připravené pomocí genového inženýrství z krve sterilních myší), se kterými se porovnává zkoumaný biologický materiál.

Metoda detekce krevní skupiny pomocí monoklinických protilátek

Samotná specifičnost studia plazmy pro její skupinovou příslušnost spočívá v porovnání vzorku biologického materiálu pacienta se standardním sérem nebo standardními erytrocyty.

Pořadí takového procesu je následující:

• příjem žilní tekutiny na prázdný žaludek v množství 5 ml;
• distribuce standardních vzorků na podložní sklíčko nebo speciální destičku (každá třída je podepsána);
• paralelně se vzorky je umístěna krev pacienta (množství materiálu by mělo být několikanásobně menší než objem standardních kapek séra);
• krevní tekutina se smíchá s připravenými vzorky (jednoduchá nebo dvojitá reakce) nebo s cyklóny (monoklinální protilátky);
• po 2,5 minutách se do těch kapek, kde došlo k aglutinaci (vznikly proteiny skupiny A, B nebo AB), přidá speciální fyziologický roztok.

Přítomnost aglutinace (slepení a precipitace erytrocytů odpovídajícími antigeny) v biologickém materiálu umožňuje přiřadit erytrocyty do té či oné třídy (2, 3, 4). Ale absence takového procesu ukazuje na nulovou (1) formu.

Jak určit Rh faktor

Existuje několik metod pro detekci Rh-příbuznosti - použití anti-Rh sér a monoklinického činidla (proteiny skupiny D).

V prvním případě je postup následující:

• materiál se odebírá z prstu (je povoleno použít konzervovanou krev nebo samotné erytrocyty, které vznikly po usazení séra);
• 1 kapka vzorku anti-Rhesus se umístí do zkumavky;
• kapka zkoumané plazmy se nalije do připraveného materiálu;
• mírné protřepávání umožňuje sérum rovnoměrně se usadit ve skleněné nádobě;
• po 3 minutách se do nádoby se sérem a zkoumanými krvinkami přidá roztok chloridu sodného.

Po několika inverzích zkumavky odborník dešifruje. Pokud se aglutininy objevily na pozadí vyčištěné kapaliny, mluvíme o Rh + - pozitivním Rh faktoru. Absence změn barvy a konzistence séra ukazuje na negativní Rh.

Stanovení krevní skupiny podle Rh systému

Studium Rh pomocí monoklinického činidla zahrnuje použití anti-D super tsoliklonu (speciální roztok). Proces analýzy zahrnuje několik fází.

1. Činidlo (0,1 ml) se nanese na připravený povrch (deska, sklo).
2. Vedle roztoku se umístí kapka pacientovy krve (ne více než 0,01 ml).
3. Dvě kapky hmoty se smíchají.
4. K dekódování dojde 3 minuty po zahájení studie.

Většina lidí na planetě má ve svých erytrocytech aglutinogen systému Rhesus. Při pohledu v procentech má 85 % příjemců protein D a jsou Rh-pozitivní, zatímco 15 % jej nemá – to je Rh-negativní.

Kompatibilita

Krevní kompatibilita je shodou skupiny a Rh faktoru. Toto kritérium je velmi důležité při transfuzi životně důležité tekutiny, stejně jako při plánování těhotenství a těhotenství.

Jakou krevní skupinu bude mít dítě?

Věda genetiky zajišťuje dědění skupinové příslušnosti a Rhesus od rodičů dětmi. Geny přenášejí informace o složení krvinek (aglutinin alfa a beta, antigeny A, B), ale i Rh.

Tabulka "Dědičnost krevních skupin"

Míchání skupin červených krvinek s různými Rh vede k tomu, že Rh faktor dítěte může být „plus“ i „mínus“.

1. Pokud je Rh u manželů stejné (jsou přítomny protilátky skupiny D), děti zdědí dominantní protein v 75 % a ve 25 % bude chybět.
2. Při absenci specifického proteinu D v membránách erytrocytů matky a otce bude dítě také Rh negativní.
3. U ženy Rh- au muže Rh + - kombinace naznačuje přítomnost nebo nepřítomnost Rh u dítěte v poměru 50 ku 50, přičemž je možný konflikt mezi antigenem matky a dítěte.
4. Pokud má matka Rh + a otec nemá anti-D, Rh se přenese na dítě s pravděpodobností 50/50, ale nehrozí konflikt protilátek.

Je důležité pochopit, že Rh faktor se přenáší na genetické úrovni. Pokud jsou tedy rodiče Rh-pozitivní a dítě se narodilo s Rh-, neměli by muži spěchat se zpochybňováním jejich otcovství. Takoví lidé v rodině prostě mají člověka bez dominantního proteinu D v červených krvinkách, který miminko zdědilo.

Krevní skupina pro transfuzi

Při provádění krevní transfuze (transfuze krve) je důležité dodržet kompatibilitu skupin antigenů a Rh. Specialisté se řídí Ottenbergovým pravidlem, které říká, že krvinky dárce by se neměly slepovat s plazmou příjemce. V malých dávkách se rozpouštějí ve velkém objemu biologického materiálu pacienta a nesrážejí se. Tato zásada platí v případě transfuze životně důležité tekutiny do 500 ml a není vhodná při velké ztrátě krve.

Zástupci vzácné 4. třídy pro krevní transfuzi jsou vhodní pro 1, 2 a 3 druhy krevní tekutiny. Jsou považováni za univerzální příjemce (lidé, kteří dostávají krevní infuze).

Pacientům s 1 (0) pozitivním bude podána transfuze stupně 1 (Rh+/-), zatímco osobě s negativním Rh může být podána pouze nula s Rh-.

Pro lidi, kteří mají 2 pozitivní, jsou vhodné 1 (+/-) a 2 (+/-). Pacienti s Rh- mohou používat pouze 1 (-) a 2 (-). U 3. třídy je situace podobná. Pokud Rh + - můžete nalít 1 a 3, pozitivní i negativní. V případě Rh- se bez anti-D obejdou pouze 1 a 3.

Kompatibilita při početí

Při plánování těhotenství má velký význam kombinace Rh faktoru muže a ženy. To se provádí, aby se zabránilo konfliktu Rhesus. To se stane, když matka má Rh- a dítě zdědilo Rh + po otci. Když se dominantní protein dostane do lidské krve, kde není přítomen, může dojít k imunologické reakci a produkci aglutininů. Tento stav vyvolává adhezi vzniklých erytrocytů a jejich další destrukci.

Tabulka krevní kompatibility pro početí dítěte

Neslučitelnost Rhesus matky a dítěte během prvního těhotenství není nebezpečná, ale před druhým početím je lepší přerušit produkci anti-Rhesus tělísek. Ženě je aplikován speciální globulin, který ničí imunologické řetězce. Pokud tak neučiníte, Rh konflikt může vyvolat potrat.

Může se krevní skupina změnit?

V lékařské praxi se vyskytují případy změn skupinové příslušnosti během těhotenství nebo v důsledku závažných onemocnění. Je to proto, že za takových podmínek je možné silné zvýšení tvorby červených krvinek. Tím se zpomalí adheze a destrukce červených krvinek. V analýze se takový jev odráží jako změna markerů ve složení plazmy. Časem vše do sebe zapadne.

Krevní třída, stejně jako Rh faktor, je geneticky dána člověku již před narozením a nemůže se během života měnit.

Dieta podle krevní skupiny

Hlavním principem výživy členstvím ve skupině je výběr produktů, které jsou geneticky blízké tělu a umožňují zlepšit fungování trávicího systému a také zhubnout.

Peter D'Adamo byl první, kdo navrhl zvážit krevní skupinu při výběru jídla. Naturopatický lékař vydal několik knih, ve kterých nastínil svou myšlenku zdravé výživy. Pokud zvolíte správné jídlo, můžete zapomenout na špatné vstřebávání živin a problémy se žaludkem a střevy.

Tabulka "Dieta podle krevní skupiny"

Dieta podle příslušnosti ke skupině zahrnuje omezení alkoholu, kouření. Důležitý je také aktivní životní styl – běh, procházky na čerstvém vzduchu, plavání.

Charakterové rysy podle krevní skupiny

Krevní skupina ovlivňuje nejen fyziologické vlastnosti těla, ale také charakter člověka.

Nulová skupina

Ve světě je asi 37 % nositelů nulové krevní skupiny.

Jejich hlavní rysy jsou:

• odolnost proti stresu;
• vůdcovské sklony;
• cílevědomost;
• energie;
• odvaha;
• ctižádost;
• družnost.

Majitelé nulté skupiny se raději věnují nebezpečným sportům, rádi cestují a nebojí se neznámého (snadno přijmou jakoukoli práci, rychle se učí).

2 skupina

Nejběžnější skupinou je 2 (A). Jejími nositeli jsou rezervovaní lidé, kteří dokážou najít přístup k nejobtížnějším osobnostem. Snaží se vyhýbat stresovým situacím, jsou vždy přátelští a pracovití. Majitelé 2. skupiny jsou velmi hospodární, svědomitě plní své povinnosti a jsou vždy připraveni pomoci.

Mezi nedostatky charakteru se rozlišuje tvrdohlavost a neschopnost střídat práci s odpočinkem. Je těžké takové lidi vyburcovat k nějakým unáhleným činům nebo nečekaným událostem.

3 skupina

Člověk, v jehož krvi dominují antigeny skupiny B, je proměnlivé povahy. Tito lidé se vyznačují zvýšenou emocionalitou, kreativitou a nezávislostí na názorech ostatních. Snadno se vydávají na cesty, přijímají nové věci. V přátelství - oddaný, v lásce - smyslný.

Mezi negativní vlastnosti se často projevují:

• časté změny nálady;
• nestálost v jednání;
• vysoké nároky na ostatní.

Majitelé 3. krevní skupiny se často ve svých fantaziích snaží skrývat před realitou světa, což není vždy kladný charakterový rys.

4 skupina

Nositelé 4. skupiny mají dobré vůdčí vlastnosti, což se projevuje schopností vyjednávat a nechat se sebrat v rozhodující chvíli. Takoví lidé jsou společenští, snadno se sbližují s ostatními, středně emocionální, všestranní a chytří.

Navzdory mnoha povahovým přednostem představitelé 4. skupiny často nedokážou dospět k jedinému rozhodnutí, trpí dualitou pocitů (vnitřní konflikt) a jsou pomalí.

Specifické složení krve a přítomnost či nepřítomnost dominantního faktoru (antigenu D) v ní se přenáší na člověka s geny. Existují 4 krevní skupiny a Rh faktor. Díky klasifikaci podle systému AB0 a Rh se specialisté naučili, jak bezpečně provádět transfuzi dárcovské krve, určit otcovství a vyhnout se Rh konfliktu během dítěte. Svou příslušnost ke skupině si každý může ověřit v laboratoři předáním biologického materiálu z prstu nebo žíly.

Plazmatické (sérové) antigeny jsou určité komplexy aminokyselin nebo sacharidů na povrchu proteinových molekul krevní plazmy (séra).

KONCEPCE KREVNÍ SKUPINY

KREVNÍ SKUPINA je kombinací normálních imunologických a genetických vlastností krve, která je dědičně podmíněna a je biologickou vlastností každého jedince.

Krevní skupiny jsou dědičné, tvoří se ve 3-4 měsících vývoje plodu a zůstávají nezměněny po celý život. Předpokládá se, že krevní skupina člověka zahrnuje několik desítek antigenů v různých kombinacích. Těchto kombinací – krevních skupin – může být ve skutečnosti několik miliard. V praxi jsou stejné pouze u jednovaječných dvojčat se stejným genotypem.

V praktické medicíně termín "krevní skupina" zpravidla odráží kombinaci erytrocytárních antigenů systému ABO a Rh faktoru a odpovídajících protilátek v krevním séru.

SKUPINOVÉ PROTILÁTKY

Pro každý známý antigen byly nalezeny protilátky stejného jména (anti-A, anti-B, anti-Rhesus, anti-Kell atd.). Protilátky krevních skupin nejsou tak trvalou vlastností lidského těla jako antigeny. Pouze v systému skupiny ABO jsou protilátky normální vrozenou vlastností krevní plazmy. Tyto protilátky (aglutininy a a b) jsou neustále přítomny v lidské plazmě.

Stanovení krevní skupiny podle avo systému

1. Krevní skupiny podle systému AVO

Pod pojmem "kompatibilita" se rozumí kombinace krve dárce a příjemce z hlediska antigenů a protilátek, která nezpůsobuje imunologické interakce.

V závislosti na přítomnosti aglutinogenů A a B v erytrocytech a v séru odpovídajících aglutininů a a b jsou všichni lidé rozděleni do čtyř skupin:

Skupina O (I) - v erytrocytech nejsou žádné aglutinogeny, v séru jsou aglutininy a a b.

Skupina A (II) - aglutinogen A v erytrocytech, aglutinin b v séru.

Skupina B (III) - aglutinogen B v erytrocytech, aglutinin a v séru.

Skupina AB (IV) - v erytrocytech aglutinogeny A a B, v séru nejsou žádné aglutininy.

Antigen A není homogenní, existují dva hlavní podtypy: V souladu s tím má skupina A (II) dvě podskupiny A (P) a A 2 (II) a skupinu AB (IV) - AB (IV) a A 2 B (IV).

Antigen skupiny B je homogennější, i když byly popsány vzácné varianty. To však nemá žádný významný klinický význam.

Metoda stanovení krevních skupin

Krevní skupina podle systému ABO se určuje pomocí aglutinační reakce. V současné době se pro stanovení krevních skupin podle systému ABO používají tři metody:

Podle standardních izohemaglutinačních sér,

Podle standardních izohemaglutinačních sér a standardních erytrocytů (křížová metoda),

S pomocí monoklonálních protilátek (anti-A a anti-B zoliklony).

V plánované studii stanoví nemocniční lékař krevní skupinu pomocí standardních isohemaglutinačních sér nebo pomocí koliklonů, poté odešle krev do sérologické laboratoře ke kontrole skupiny křížovou metodou.

Krevní skupina je považována za jistou, až když laboratoř potvrdí údaje získané lékařem nemocnice. Pokud se výsledky studií liší, měly by být obě studie opakovány.

V naléhavých případech (v případě krvácení je nutná urgentní transfuze krve) si nemocniční lékař určí skupinu sám (v laboratoři se provádí rekontrola, ale dodatečně).

STANOVENÍ KREVNÍCH SKUPIN NA STANDARDNÍM IZOHEMAGGLUTINÁTOVÉM SÉRU

Nejběžnější v klinické a laboratorní praxi.

Podstatou metody je průkaz skupinových antigenů A a B v testované krvi pomocí standardních izohemaglutinačních sér. Provádí se v místnosti s dobrým osvětlením při teplotě 15-25 ° C.

a) Nezbytné vybavení

Standardní isohemaglutinační séra skupin O (I), A (II), B (III) a AB (IV) dvou různých sérií. Syrovátka by měla být průhledná, bez známek rozkladu. Pro pohodlí jsou standardní hemaglutinační séra různých skupin zabarvená v určité barvě: O (I) - bezbarvá (šedá), A (II) - modrá, B (III) - červená, AB (IV) - jasně žlutá. Je třeba poznamenat, že tyto barvy doprovázejí všechny štítky na krevních produktech, které mají příslušnost ke skupině (krev, erytrocytární hmota, plazma atd.).

Bílé porcelánové nebo smaltované talíře nebo jakýkoli jiný smáčitelný talíř s označením 0(1), A(P), H(W), AB(IV).

Izotonický roztok chloridu sodného.

Jehly, pipety, skleněné tyčinky (sklíčka).

b) Technika reakce

1. Standardní isohemaglutinační séra skupin I, II, III se aplikují na destičku (destičku) v objemu 0,1 ml (jedna velká kapka o průměru asi 1 cm). Aby se předešlo chybám, aplikují se dvě série sér z každé skupiny. Celkem je 6 kapek.

2. Šest kapek testované krve přibližně o velikosti špendlíkové hlavičky 0,01 ml (malá kapka) se postupně přenese suchou skleněnou tyčinkou na destičku v 6 bodech, každá vedle kapky standardního séra (množství krve, které má být testované by mělo být přibližně 10krát menší než množství standardního séra), poté je opatrně promíchejte skleněnými tyčinkami se zaoblenými hranami.

3. Po promíchání destičku pravidelně protřepávejte.

Aglutinace začíná během prvních 10-30 sekund.

4. Do těch kapek, kde došlo k aglutinaci, přidejte jednu kapku izotonického roztoku chloridu sodného, ​​poté se vyhodnotí výsledek reakce.

Při pozitivní reakci, obvykle během prvních 10-30 sekund, se ve směsi objeví malá červená zrnka (aglutináty) viditelná pouhým okem, sestávající z nalepených červených krvinek.

Pokud séra všech tří skupin vykázala pozitivní reakci, znamená to, že testovaná krev obsahuje oba aglutinogeny - A i B a patří do skupiny AB(IV). V takových případech je však pro vyloučení nespecifické aglutinační reakce (studená aglutinace, panglutinace, alergie) nutné provést doplňkovou kontrolní studii testované krve se standardním izohemaglutinačním sérem skupiny AB (IV), které neobsahuje aglutininy. Pouze nepřítomnost aglutinace v této kapce v přítomnosti aglutinace v kapkách obsahujících standardní séra skupin 0(1), A(II) a B(III) umožňuje považovat reakci za specifickou a přisuzovat zkoumanou krev skupina AB 0 (IV).

Je třeba poznamenat, že v přítomnosti slabého podtypu antigenu A v testované krvi začíná aglutinační reakce s hemaglutinačními séry skupin 0 (1) a B (III) později (za 3-4 minuty). K přesnému určení podtypu antigenu A je nutné provést dodatečnou reakci s tzv. anti-A činidlem.

STANOVENÍ KREVNÍCH SKUPIN NA STANDARDNÍM IZOHEMAGGLUTINOVACÍM SÉRU A STANDARDNÍCH ERYTROCYTECH (KŘÍŽOVÁ METODA)

Metoda se nejčastěji používá v sérologických laboratořích. Podstatou metody je stanovení přítomnosti nebo nepřítomnosti skupinových antigenů A a B v testované krvi pomocí standardních isohemaglutinačních sér a skupinových protilátek a a b pomocí standardních erytrocytů.

Vybavení pro reakci se standardními erytrocyty se liší tím, že aglutinační reakce vyžaduje standardní erytrocyty tří krevních skupin: 0(1), A(II), B(III).

Standardní erytrocyty se připravují z krve dárců s dříve známou krevní skupinou, skladované při 4-8°C.

Na označenou destičku s pipetou v šesti buňkách se aplikuje jedna velká kapka séra testované krve ze zkumavky (0,1 ml) a vedle nich jedna malá kapka (0,01 ml) standardních erytrocytů skupiny 0 ( 1), A (P), V(Sh) (každá dvě série).

Charakteristickým rysem interpretace výsledků reakce se standardními erytrocyty je, že erytrocyty skupiny 0(1) jsou kontrolní (neobsahují antigeny, což zásadně znemožňuje specifickou aglutinační reakci s jakýmkoli sérem).

STANOVENÍ KREVNÍCH SKUPIN MONOKLONÁLNÍMI PROTILÁTKAMI

K určení krevní skupiny se používají monoklonální protilátky, k jejichž výrobě se využívá hybridomová biotechnologie.

Hybridom je buněčný hybrid vzniklý fúzí nádorové buňky kostní dřeně (myelom) s imunitním lymfocytem, ​​který syntetizuje specifické monoklonální protilátky. Hybridom získává vlastnosti obou „rodičů“: schopnost neomezeného růstu, která je charakteristická pro nádorovou buňku, a schopnost syntetizovat protilátky, která je vlastní imunitnímu lymfocytu.

Byla vyvinuta standardní činidla - monoklonální protilátky (MCA): anti-A a anti-B koliklony, které se používají ke stanovení aglutinogenů erytrocytů. Tsoliklony jsou červený (anti-A) nebo modrý (anti-B) lyofilizovaný prášek, který se bezprostředně před studií zředí izotonickým roztokem chloridu sodného.

Anti-A a anti-B soliklony se aplikují na bílou tabletu jedna velká kapka (0,1 ml), každá pod příslušnými štítky: anti-A nebo anti-B. Jedna malá kapka (0,01 ml) testované krve se aplikuje vedle kapek protilátek. Po smíchání složek je pozorována aglutinační reakce po dobu 2-3 minut.

STANOVENÍ RH FAKTORU

V roce 1940 objevili K. Landsteiner a A. S. Wiener v lidských erytrocytech zcela nový antigen, který nazvali Rh faktor (Rh). Rh faktor je přítomen v krvi 85 % lidí a 15 % lidí tento faktor neobsahuje. Jmenuje se tedy po makakovi Rhesusovi, který ho má vždy.

Rh antigeny jsou klasifikovány jako lipoproteiny. Jsou velmi aktivní a schopné vyvolat tvorbu imunitních protilátek.

Přítomnost Rh antigenu je detekována v lidském plodu počínaje 5-8 týdnem a je dobře exprimována u 3-4měsíčního embrya.