Jokainen ihminen on geneettisesti perittyjen ominaisuuksien, muuttumattomina luonnollisissa olosuhteissa, tai tietyn veriryhmän kantaja. Veriryhmä on proteiinien, hiilihydraattien, glykoproteiinien ja glykolipidien erottuva piirre, jotka muodostuvat punasolujen pinnalle ja joita kutsutaan "antigeeniksi". Antigeenejä, jotka ovat osa punaisten muodostuneiden elementtien kalvoa, löytyy kaikista ihmisrodun edustajista.

Lääketieteessä luokitellaan monen tyyppisiä erytrosyyttiryhmän antigeenejä, eli eri ihmisillä voi olla sama antigeenisarja. Antigeenien typologian perusteella erotetaan noin kolme tusinaa veriryhmäjärjestelmää, kuten AB0, MNS, Lutheran, Rh, Duffy, Colton jne.

Nykyaikainen lääketiede käyttää kahta - AB0 ja Rh, joilla on ratkaiseva rooli verensiirrossa. Käsittelemme tässä artikkelissa yksityiskohtaisemmin nimettyjä veriryhmäjärjestelmiä "a-be-zero" ja "Rh-tekijä".

AB0-veriryhmäjärjestelmä

Olemme ABO-veriryhmän löytämisen velkaa itävaltalaiselle immunologille Karl Landsteinerille. Hän päätteli, että näennäisesti identtinen veri eroaa punasoluominaisuuksiltaan. Hän jakoi nestemäisen liikkuvan sidekudoksen kolmeen ryhmään ja nimesi ne A, B, 0. Myöhemmin tšekkiläinen lääkäri J. Jansky löysi lisäryhmän AB ja ehdotti veriryhmien nimeämistä numeroilla I, II, III, IV.

Siitä lähtien verensiirtoa (transfuusiota) on pidetty tehokkaana hoitomenetelmänä, jota on käytetty aktiivisesti monien sairauksien hoidossa.

Vuodesta 1928 lähtien Hygieeninen Kansakuntien Liitto on hyväksynyt toisen kirjainmerkinnän, joka tähän päivään asti on hyväksytty luokituksen perustaksi kaikkialla maailmassa: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).

ABO-järjestelmän veriryhmät ovat tehneet mahdolliseksi määrittää, miksi verensiirrot ovat usein onnistuneita, mutta joskus kuolemaan johtavat. Landsteiner osoitti kokeellisesti, että kun yhden potilaan punasolut sekoitetaan toisen potilaan plasmaan, veri hyytyy muodostaen hiutaleita. Tätä plasman (seerumin) kykyä tarttua yhteen (agglutinoida) punasoluja kutsutaan isohemagglutinaatioksi. Tämä reaktio johtuu agglutinogeeneiksi kutsuttujen antigeenien läsnäolosta punasoluissa, jotka on merkitty kirjaimilla A, B; ja seerumissa - luonnolliset vasta-aineet (agglutiniinit), merkitty a, b. Isohemagglutinaatiota tapahtuu vain, kun yksikirjaiminen antigeenit ja vasta-aineet kohtaavat esimerkiksi A-a, B-b.

Näin ollen samannimisen agglutinogeenien ja agglutiniinien yhdistelmä on mahdotonta ihmisen veressä, koska kyky agglutinoida punasoluja johtaa kuolemaan.

Landsteinerin teorian mukaan vain neljä yhdistelmää sallitaan, lukuun ottamatta yksikirjaimien antigeenien ja vasta-aineiden tai neljän verityypin kohtaamista. Tämän jaon perustana on nestemäisen liikkuvan sidekudoksen kyky sisältää/ei sisällä antigeenejä (agglutinogeenit) A, B ja vasta-aineita (agglutiniinit) a (alfa tai anti-A), b (beeta tai anti-B).

Tämä taulukko näyttää serologian A0-veriryhmäjärjestelmän mukaan:

Kuten taulukosta voidaan nähdä, plasmassa on kahden tyyppisiä hemolysiinejä, jotka on myös merkitty kirjaimilla a, b. Yksikirjaimien agglutinogeenien ja hemolysiinien yhdistelmä johtaa punasolujen hemolyysiin (tuhoamiseen). Tämä reaktio tapahtuu lämpötilassa 37-40 °C, kun taas huoneenlämpötilassa samojen antigeenien ja vasta-aineiden kohtaamiseen liittyy agglutinaatio ilman hemolyysiä.

Tyyppejä II, III, IV sairastavien plasma sisältää antiagglutinogeenejä, jolloin punasolut ja kudokset jäävät agglutinogeeneiksi - A, B.

Tämän teorian ansiosta verensiirto on tullut mahdolliseksi ilman komplikaatioita.

Erilaisten veren yhteensopivuuden määrittämiseen on yleisesti hyväksytty sääntö: vastaanottajan plasman on hyväksyttävä luovuttajien punasoluja. Siksi verensiirron tarpeessa olevalla potilaalla on tärkeää ottaa huomioon agglutiniinien ja hemolysiinien merkitys, kun taas verta luovuttavalla potilaalla punaisissa muodostuneissa alkuaineissa on agglutinogeenejä.

Ratkaistaessa veriryhmän yhteensopivuusongelmaa AB0:n mukaan, on tarpeen sekoittaa nestemäistä sidekudosta seerumiin, joka on otettu eri verityyppien kantajilta. Agglutinaatiota havaitaan seuraavissa yhdistelmissä:

Tästä seuraa, että AB0-järjestelmän mukaan ryhmälle I on ominaista absoluuttinen yhdistelmä muiden kanssa, sen kantajat tunnustetaan universaaleiksi luovuttajiksi. Näin ollen ryhmän IV haltijat ovat yleisiä vastaanottajia, koska tämän tyyppiset punasolut eivät saa aiheuttaa agglutinaatiota toisen verityypin kantajien plasman kanssa.

Koska tämä lähestymistapa voi aiheuttaa komplikaatioita, lääketieteellisessä yhteisössä käytetään useimmiten toista menetelmää: vastaanottajalle siirretään saman ryhmän luovuttajamateriaalia, jos verenhukkaa on useita. Edellä kuvattua ryhmien sekoitussääntöä käytetään harvoin.

Rh-verijärjestelmä

Rh-tekijää (Rh-tekijä), jonka K. Landsteiner ja K. Wiener löysivät 1900-luvun 40-luvulla, pidetään merkittävänä verijärjestelmänä AB0:n jälkeen. Se edustaa 50 veriryhmittäin havaittua antigeeniä. Tärkeimmät ovat 6 (D, C, c, CW, E, e). Aktiivisin on D-antigeeni, joka määrittää, kuuluvatko ihmiset Rh-positiiviseen (Rh+)/Rh-negatiiviseen (Rh–) tekijään. Antigeenin läsnäolo osoittaa Rh+:n 85 %:lla valkoisen rodun ihmisistä. Loput 15 %:lla ei ole antigeeniä (agglutiniinia), mikä osoittaa Rh–:n. Verrattuna AB0-järjestelmään, Rh:sta puuttuu plasmasta tarvittavat agglutiniinit. Mutta kun materiaalia siirretään Rh+-luovuttajalta Rh-saajalle, sen henkilön verestä, jolle luovuttajaveri siirrettiin, havaitaan vasta-aineita - anti-Rhesus-agglutiniinit. Toimenpiteen toistaminen johtaa punasolujen agglutinaatioon tai verensiirtosokkiin.

Tutkijat ovat tulleet siihen johtopäätökseen, että Rh- kantajat voivat saada vain Rh-siirtoja.

Samanlainen tilanne voi syntyä Rh:n omistajalla äidillä, joka kantaa Rh+:n kantajaa, kun Rh-agglutinogeenit tuottavat aktiivisesti vasta-aineita hänen kehossaan. Ensimmäinen raskaus on yleensä onnistunut ja päättyy onnistuneeseen synnytykseen. Tilastojen mukaan Rh+-sikiön myöhempien raskauksien aikana istukan läpi tunkeutuvat vasta-aineet vaikuttavat sikiön punasoluihin, mikä johtaa vastasyntyneiden keskenmenoon tai hemolyyttiseen anemiaan. Siksi immunoprofylaktisena toimenpiteenä naisille, joilla on Rh–, annetaan anti-D-vasta-ainekonsentraattia ensimmäisen syntymän jälkeen.

Veriryhmän ja Rh-tekijän testaus

Veriryhmän ja Rh-tekijän tunteminen on erittäin tärkeää ihmishenkien pelastamiseksi tilanteissa, jotka liittyvät useimmiten suureen verenhukkaan tai muihin patologisiin tapauksiin, joissa verensiirto on yksi tärkeimmistä hoitomenetelmistä.

Tutkimuksen tulokset osoittavat, kuuluuko ihmisen veri johonkin "a-be-nil" -järjestelmän ryhmiin perustuen antigeenien esiintymiseen punasoluissa ja vasta-aineissa.

Veriryhmäjäsenyyden määrittäminen AB0-järjestelmän mukaan tapahtuu käyttämällä kunkin ryhmän aktiivisia standardiplasmoja, joiden tiitteri on 1:32, ja punaisia ​​muodostuneita alkuaineita, jotka vastaavat standardia. Joskus käytetään lisäksi ryhmän IV plasmaa. Nämä materiaalit sekoitetaan potilaan vereen, jonka jälkeen reaktiota seurataan 3 minuuttia. Plasma-veriseokseen tiputetaan 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta, kun tarttuminen on tapahtunut, ja sitä odotetaan enintään 5 minuuttia. Sitten agglutinaatio luetaan läpäisevän valon kautta, jonka perusteella tehdään johtopäätös ryhmään kuulumisesta:

  • agglutinaation puuttuminen kaikissa näytteissä kieltää agglutinogeenin, puhuen sen suhteesta arvoon 0 (I);
  • agglutinaatio plasmassa näytteillä 0(I), B(III) osoittaa agglutinogeenin A ja A(II);
  • punaisten muodostuneiden elementtien liimausprosessin läsnäolo seerumissa 0(I), A(II) osoittaa agglutinogeeni B:n läsnäolon ja sen suhteen B(III:aan);
  • agglutinaation esiintyminen kaikissa tutkituissa materiaaleissa osoittaa agglutinogeenien A, B ja AB:hen (IV) kuulumisen.

Jälkimmäisessä tapauksessa epäspesifinen reaktio on mahdollinen. Tietojen vahvistamiseksi sekoita standardi AB(IV)-seerumi ja koehenkilön veri ja tarkkaile 5 minuuttia. Jos punasolujen adheesiota ei tapahdu, se kuuluu ryhmään AB(IV).

Jos agglutinaatio on lievää tai jos on epäselvyyttä, testi toistetaan uudelleen.

Rh-tekijän testaamiseen käytetään standardireagenssia, jossa on Rh-antigeenien vasta-aineita, ja se sekoitetaan koehenkilön veren kanssa. Kun olet lisännyt suolaliuosta 3-5 minuuttia myöhemmin, sekoita sisältö ja havaitse visuaalisesti punasolujen tarttuminen ja sedimentaatio läpäisevän valon avulla. Jos punaisia ​​hiutaleita havaitaan, tehdään johtopäätös suhteesta Rh+:aan. Agglutinaation puuttuminen osoittaa Rh-.

Veriryhmä on tapana merkitä yhdelle riville AB0- ja Rh-järjestelmän mukaan, esimerkiksi 0 (I)Rh+, 0 (I)Rh- jne.

Voit ottaa verikokeen ryhmään kuulumisesta ja Rh-tekijästä missä tahansa kliinisessä laboratoriossa. Näiden arvojen lisäksi analyysi osoittaa yhteensopivuuden ja määrittää minkä ryhmän materiaalin, Rh-tekijän, voidaan siirtää kiireellisessä tarpeessa.

Veriryhmien periytyminen

On todistettu, että lapsen veriryhmä on peritty vanhemmiltaan. Ryhmäjäsenyyden periytymisessä on useita ilmeisiä kaavoja:

  1. Perheeseen, jossa toisella vanhemmista on 0(I), ei voi syntyä IV(AB)-ryhmän vauvaa. Tässä tapauksessa toisen vanhemman ryhmällä ei ole väliä.
  2. Äiti ja isä ovat veriryhmän 1 kantajia, mikä tarkoittaa, että lapset syntyvät samanlaiseen veriryhmään.
  3. Ryhmän 2 vanhemmilla on vauvoja vain ryhmässä 1 tai 2.
  4. Jos molemmilla puolisoilla on ryhmä 3, lapset ovat vain 1 tai 3 kantajia.
  5. Jos toisella vanhemmista on tyyppi IV(AB), tyypin 1 lasta ei voi syntyä toisen vanhemman veriryhmästä riippumatta.
  6. Kun ryhmät 2 ja 3 yhdistetään puolisoissa, lapsilla voi olla mikä tahansa mahdollinen veriryhmä.

On todettu, että 1 tapaus kymmenestä miljoonasta voi tapahtua perinnöllinen mutaatio, jota kutsutaan Bombay-ilmiöksi. Sen ydin on, että syntyessään lapsilla on ryhmä, joka ei sisällä antigeenejä A ja B sekä komponenttia H. Tällaiset ihmiset elävät normaalia elämää, vaikeuksia voi syntyä vain verensiirrossa tai isyyden vahvistamisessa.

Jokaisen tulisi tietää veriryhmänsä, Rh-tekijänsä sekä yhteensopivuus muiden ryhmien kanssa. Joskus tästä tulee ratkaiseva tekijä, josta elämä riippuu.

Yhteydessä

YLEISET MÄÄRÄYKSET

ABO-veriryhmäjärjestelmä koostuu kahdesta ryhmän agglutinogeenista - A ja B ja kahdesta vastaavasta agglutiniinista plasmassa - alfa (anti-A) ja beeta (anti-B). Näiden antigeenien ja vasta-aineiden erilaiset yhdistelmät muodostavat neljä veriryhmää: ryhmä 0(1) - molemmat antigeenit puuttuvat; ryhmä A (II) - punasoluissa on vain antigeeni A; ryhmä B (III) - punasoluissa on vain antigeeni B; ryhmä AB (IV) - antigeenit A ja B ovat punasoluissa.

ABO-järjestelmän ainutlaatuisuus on, että immunisoimattomien ihmisten plasmassa on luonnollisia vasta-aineita antigeenille, jota ei ole punasoluissa: ryhmän 0(1) ihmisillä - A- ja B-vasta-aineita; ryhmän A (II) henkilöillä - anti-B-vasta-aineet; ryhmän B(III) henkilöillä - anti-A-vasta-aineet; AB(IV)-ryhmän henkilöillä ei ole vasta-aineita ABO-järjestelmän antigeeneille.

Seuraavassa tekstissä anti-A- ja anti-B-vasta-aineita kutsutaan anti-A- ja anti-B-vasta-aineiksi.

ABO-veriryhmän määritys suoritetaan tunnistamalla spesifiset antigeenit ja vasta-aineet (kaksois- tai ristireaktio). Anti-A ja anti-B havaitaan seerumista käyttämällä standardeja punasoluja A(II) ja B(III). Antigeenien A ja B läsnäolo tai puuttuminen erytrosyyteissä määritetään käyttämällä monoklonaalisia tai polyklonaalisia vasta-aineita (standardeja hemagglutinoivaa seerumia), joilla on sopiva spesifisyys.

Veriryhmän määritys suoritetaan kahdesti: ensisijainen tutkimus - lääketieteellisellä osastolla (verenottoryhmä); varmistustutkimus - laboratorioosastolla. Algoritmi immunohematologisten laboratoriotestien suorittamiseksi verensiirron aikana on esitetty kuvassa. 18.1.

Veriryhmän määrityksen tulos kirjataan sairaushistorian etusivun oikeaan yläkulmaan tai luovuttajapäiväkirjaan (korttiin) päivämäärällä ja määrityksen tehneen lääkärin allekirjoituksella.

Luoteis-Venäjällä ABO-veriryhmien jakautuminen väestössä on seuraava: ryhmä 0(I) - 35 %; ryhmä A(II) - 35-40 %; ryhmä B(III) - 15-20 %; ryhmä AB (IV) - 5-10 %.

On huomattava, että sekä antigeeni A (suuremmassa määrin) että antigeeni B ovat eri tyyppejä (heikkoja variantteja). Yleisimmät antigeeni A:t ovat A 1 ja A 2. A1-antigeenin esiintyvyys ryhmien A (II) ja AB (IV) yksilöillä on 80 % ja A2-antigeenin noin 20 %. A2:ta sisältävät verinäytteet voivat sisältää anti-A1-vasta-aineita, jotka reagoivat standardiryhmän A(II) punasolujen kanssa. Anti-A 1:n esiintyminen havaitaan veriryhmien ristiinmäärityksellä ja yksilöllisen yhteensopivuustestin aikana.

Antigeeni A -varianttien (A 1 ja A 2) erilaiseen määritykseen on käytettävä erityisiä reagensseja (fytohemagglutiniinit tai monoklonaaliset vasta-aineet anti-A 1. A 2 (II) ja A 2 B (IV) ryhmien potilaiden on oltava siirretty punasoluja sisältävillä hemokomponenteilla ryhmistä A 2 (II) ja A 2 B (IV). Pestyjen punasolujen siirtoa voidaan myös suositella: 0 (I) - potilaat, joiden veriryhmä on A 2 (II); 0(I) ja B(III) - potilaat, joiden veriryhmä on A 2 B(II).

Taulukko 18.4. ABO-veriryhmän määrityksen tulokset
Tutkimustulokset Testattavan veren ryhmäkuuluvuus
punasolut reagenssilla seerumi (plasma) tavallisilla punasoluilla
anti-AV anti-A anti-B 0(I) A(II) B (III)
- - - - + + 0(I)
+ + - - - + A(II)
+ - + - + - B(III)
+ + + - - - AB(IV)
Nimitykset: + - agglutinaation esiintyminen, - - agglutinaation puuttuminen

Veriryhmän määritys ABO-järjestelmän mukaan

Veriryhmät määritetään käyttämällä standardiseerumia (yksinkertainen reaktio) ja standardeja erytrosyyttejä (kaksois- tai ristireaktio).

Veriryhmä määritetään yksinkertaisella reaktiolla käyttämällä kahta standardisarjaa isohemagglutinoivaa seerumia.

  • Päättäväisyyden edistyminen [näytä] .

    Veriryhmämääritys tehdään hyvässä valaistuksessa ja lämpötilassa + 15 - + 25 ° C tableteilla. 0(1) on kirjoitettu tabletin vasemmalle puolelle, A(II) keskelle ja B(III) oikealle puolelle. Merkitse tabletin yläreunan keskelle luovuttajan nimi tai tutkittavan veren numero. Käytä kolmen ryhmän (O, A, B) aktiivisia standardiseerumeja, joiden tiitteri on vähintään 1:32, kahdessa sarjassa. Seerumit asetetaan erityisiin telineisiin kahdessa rivissä. Jokaisessa seerumissa on merkitty pipetti. Lisäkontrollina käytetään ryhmän AB(IV) seerumia.

    Yksi tai kaksi tippaa standardiseerumia levitetään tabletille kahdessa rivissä: ryhmän 0 seerumi (1) - vasemmalla, ryhmän A (II) seerumi - keskellä, ryhmän B (III) seerumi - oikein.

    Veripisarat sormesta tai koeputkesta levitetään pipetillä tai lasisauvalla jokaisen seerumipisaran lähelle ja sekoitetaan tikulla. Veren määrän tulee olla 8-10 kertaa pienempi kuin seerumin. Sekoituksen jälkeen levyä tai tablettia heilutetaan hellävaraisesti käsissä, mikä edistää punasolujen nopeampaa ja tarkempaa agglutinaatiota. Agglutinaation tapahtuessa, mutta aikaisintaan 3 minuutin kuluttua, lisätään yksi tippa 0,9-prosenttista natriumkloridiliuosta seerumipisaroihin, joissa on punasoluja, joissa on tapahtunut agglutinaatiota, ja havainnointia jatketaan, kunnes 5 minuuttia on kulunut. 5 minuutin kuluttua lue reaktio läpäisevässä valossa.

    Jos agglutinaatio on epäselvä, lisätään seerumin ja veren seokseen lisäksi yksi tippa 0,9 % natriumkloridiliuosta, minkä jälkeen tehdään johtopäätös ryhmään kuulumisesta (taulukko 18.4).

  • Reaktiotulokset [näytä] .
    1. Agglutinaation puuttuminen kaikissa kolmessa pisarassa osoittaa, että testattavassa veressä ei ole agglutinogeenia, eli veri kuuluu ryhmään 0(I).
    2. Agglutinaation alkaminen pisaroissa, joissa on seerumit 0(I) ja B(III), osoittaa, että veressä on agglutinogeeni A, eli veri kuuluu ryhmään A(II).
    3. Agglutinaation esiintyminen pisaroissa, joissa on ryhmän 0(I) ja A(II) seerumit, osoittaa, että testattava veri sisältää agglutinogeeni B, eli ryhmän B(III) verta.
    4. Agglutinaatio kaikissa kolmessa pisarassa osoittaa, että testattavassa veressä on agglutinogeenejä A ja B, eli veri kuuluu ryhmään AB (IV). Tässä tapauksessa kuitenkin, koska agglutinaatio kaikilla seerumeilla on mahdollista epäspesifisen reaktion vuoksi, on tarpeen levittää kaksi tai kolme tippaa ryhmän AB (IV) standardiseerumia tabletille tai levylle ja lisätä 1 tippa testiä. verta heille. Seerumi ja veri sekoitetaan ja reaktiotulosta tarkkaillaan 5 minuutin ajan.

      Jos agglutinaatiota ei tapahdu, tutkittava veri luokitellaan ryhmään AB(IV). Jos agglutinaatio ilmenee ryhmän AB (IV) seerumin kanssa, reaktio on epäspesifinen. Heikosti agglutinaatiossa ja kaikissa epäilyttävissä tapauksissa veri testataan uudelleen muiden sarjojen standardiseerumeilla.

ABO-veriryhmän määritys kaksoisreaktiolla
(perustuu standardiseerumiin ja standardeihin punasoluihin)

Normaalit punasolut ovat 10-20 % suspensio ryhmien 0(I), A(II) ja B(III) tuoreista alkuperäisistä punasoluista (tai säilöntäaineista pestyjä testisoluja) 0,9 % natriumkloridiliuoksessa tai sitraatissa - suolaliuos. Natiivit standardipunasolut voidaan käyttää 2-3 päivässä, jos niitä säilytetään isotonisessa suolaliuoksessa +4°C:n lämpötilassa. Säilötyt standardipunasolut säilytetään +4°C:ssa 2 kuukautta ja pestään säilöntäaineliuoksesta ennen käyttöä.

Ampullit tai injektiopullot, joissa on vakioseerumia ja standardeja punasoluja, asetetaan erityisiin telineisiin, joissa on asianmukaiset merkinnät. Käytä tyypitysreagenssien kanssa kuivia, puhtaita pipettejä, erillisiä kullekin reagenssille. Valmista lasit 0,9-prosenttisella natriumkloridiliuoksella, kun haluat pestä lasitangot ja -pipetit.

Ryhmän määrittämiseksi otetaan 3-5 ml verta koeputkeen ilman stabilointiainetta. Veren tulee seistä 1,5-2 tuntia +15-25 °C:n lämpötilassa.

  • Päättäväisyyden edistyminen [näytä] .

    Tabletille laitetaan kaksi tippaa (0,1 ml) kahden sarjan ryhmien 0(I), A(II), B(III) standardiseerumia. Tämän mukaisesti kullekin seerumiryhmälle annetaan yksi pieni pisara (0,01 ml) ryhmien 0(I), A(II), B(III) standardierytrosyyttejä. Yksi tippa testiverta lisätään standardiseerumiin ja kaksi tippaa testiseerumia tavallisiin punasoluihin. Veren määrän tulee olla 8-10 kertaa pienempi kuin seerumin. Tipat sekoitetaan lasisauvalla ja ravistamalla tablettia käsissäsi 5 minuuttia, seuraa agglutinaation alkamista. Jos agglutinaatio on epäselvä, lisätään seerumin ja veren seokseen vielä tippa 0,9 % natriumkloridiliuosta (0,1 ml), minkä jälkeen tehdään johtopäätös ryhmään kuulumisesta (taulukko 18.4).

  • ABO-veriryhmän määritystulosten arviointi [näytä] .
    1. Agglutinaation esiintyminen standardien erytrosyyttien A ja B kanssa ja agglutinaation puuttuminen kolmessa kahden sarjan vakioseerumissa osoittaa, että testiseerumi sisältää sekä agglutiniinit - alfa- että beeta-, eikä testipunasoluissa, eli veressä, ole agglutinogeenejä. kuuluu ryhmään 0 (I) .
    2. Agglutinaation esiintyminen ryhmien 0(I), B(III) ja ryhmän B(III) standardierytrosyyttien kanssa osoittaa, että testierytrosyytit sisältävät agglutinogeeni A:ta ja testiseerumi sisältää agglutiniini-betaa. Siksi veri kuuluu ryhmään A (II).
    3. Agglutinaation esiintyminen ryhmien 0(I), A(II) ja ryhmän A(II) standardierytrosyyttien kanssa osoittaa, että testipunasolut sisältävät agglutinogeeni B:tä ja testiseerumi sisältää agglutiniini alfaa. Siksi veri kuuluu ryhmään B (III).
    4. Agglutinaation läsnäolo kaikilla standardiseerumeilla ja agglutinaation puuttuminen kaikkien standardierytrosyyttien kanssa osoittaa, että tutkittavat punasolut sisältävät molemmat agglutiniinit, eli veri kuuluu ryhmään AB (IV).

Veriryhmän määrittäminen
käyttämällä anti-A- ja anti-B-tsolikloneita

Anti-A- ja anti-B-tsoliklonit (monoklonaaliset vasta-aineet antigeeneille A ja B) on tarkoitettu ihmisen ABO-järjestelmän veriryhmän määrittämiseen tavallisten isohemagglutinoivan seerumin sijaan. Jokaisessa veriryhmämäärityksessä käytetään yhtä sarjaa anti-A- ja anti-B-reagensseja.

  • Päättäväisyyden edistyminen [näytä] .

    Yksi iso tippa anti-A- ja anti-B-tsolikloneja (0,1 ml) levitetään tabletille (levylle) asianmukaisten merkintöjen alla: "Anti-A" tai "Anti-B". Yksi pieni pisara testattavaa verta asetetaan lähelle (verireagenssisuhde on 1:10), sitten reagenssi ja veri sekoitetaan ja reaktion etenemistä seurataan ravistamalla varovasti tablettia tai levyä.

    Agglutinaatio anti-A- ja anti-B-kolikloneilla tapahtuu yleensä ensimmäisten 5-10 sekunnin aikana. Tarkkailu on suoritettava 2,5 minuutin ajan, koska on mahdollista, että myöhempi agglutinaatio alkaa punasoluilla, jotka sisältävät heikkoja antigeenejä A tai B.

  • Taulukossa on arvio agglutinaatioreaktion tuloksista anti-A- ja anti-B-sykloneilla. 18.4, joka sisältää myös tulokset luovuttajan seerumin agglutiniinien määrittämisestä standardeja punasoluja käyttäen.

Jos epäillään spontaania agglutinaatiota henkilöillä, joiden veriryhmä on AB(IV), suoritetaan kontrollitutkimus 0,9-prosenttisella natriumkloridiliuoksella. Reaktion tulee olla negatiivinen.

Coliclones anti-A (vaaleanpunainen) ja anti-B (sininen) on saatavana sekä alkuperäisessä että lyofilisoidussa muodossa 20, 50, 100 ja 200 annoksen ampulleissa, joissa jokaiseen ampulliin on kiinnitetty liuotin, vastaavasti 2, 5, 10 ja 20 ml. .

Lisäkontrolli ABO-veriryhmän oikeaan määritykseen käyttämällä anti-A- ja anti-B-reagensseja on monoklonaalinen anti-AB-reagenssi (Hematologist, Moskova). On suositeltavaa käyttää anti-AB-reagenssia samanaikaisesti sekä polyklonaalisten immuuniseerumien että monoklonaalisten reagenssien kanssa. Reaktion seurauksena anti-AB-reagenssin kanssa kehittyy ryhmien A (II), B (III) ja AB (IV) punasolujen agglutinaatiota; ryhmän 0(I) punasoluilla ei ole agglutinaatiota.

VIRHEET RYHMÄN JÄSENYYDEN MÄÄRITTÄMISESSÄ

Virheet veriryhmien määrittämisessä voivat johtua kolmesta syystä:

  1. tekninen;
  2. standardiseerumien ja standardien punasolujen huonolaatuisuus;
  3. tutkittavan veren biologiset ominaisuudet.

Teknisistä syistä johtuvia virheitä ovat mm.

  • a) seerumien väärä sijoitus lautaselle;
  • b) seerumin ja punasolujen väärät kvantitatiiviset suhteet;
  • c) riittämättömästi puhtaiden tablettien ja muiden veren kanssa kosketuksiin joutuvien esineiden käyttö. Jokaiselle seerumille tulee olla erillinen pipetti; Pipettien pesuun tulee käyttää vain 0,9 % natriumkloridiliuosta;
  • d) tutkittavan veren virheellinen tallennus;
  • e) agglutinaatioreaktiolle vaaditun ajan noudattamatta jättäminen; kiireessä, kun reaktio otetaan huomioon ennen kuin 5 minuuttia on kulunut, agglutinaatiota ei välttämättä tapahdu, jos testattavassa veressä on heikkoja agglutinogeenejä; jos reaktio ylivalottuu yli 5 minuuttia, pisarat voivat kuivua reunoista simuloiden agglutinaatiota, mikä johtaa myös virheelliseen johtopäätökseen;
  • f) korkeasta (yli 25 °C) ympäristön lämpötilasta johtuva agglutinaation puuttuminen. Tämän virheen välttämiseksi on suositeltavaa käyttää kuumassa ilmastossa työskentelyyn erityisesti valmistettuja seerumeja; suorittaa veriryhmien määritys lautasella tai muovialustalla, jonka pohjan ulkopinta on upotettu kylmään veteen.
  • g) väärä sentrifugointi: riittämätön sentrifugointi voi johtaa väärään negatiiviseen tulokseen ja liiallinen sentrifugointi voi johtaa väärään positiiviseen tulokseen.

Virheet, jotka johtuvat huonompien standardiseerumien ja standardien punasolujen käytöstä:

  • a) heikot standardiseerumit, joiden tiitteri on alle 1:32 tai vanhentuneet, voivat aiheuttaa myöhäistä ja heikkoa agglutinaation;
  • b) sopimattomien standardiseerumien tai erytrosyyttien käyttö, jotka on valmistettu epästeriilisti ja riittämättömästi säilytettynä, johtaa epäspesifisen "bakteeri-agglutinaation" esiintymiseen.

Virheet, jotka riippuvat tutkittavan veren biologisista ominaisuuksista:

Virheet, jotka riippuvat tutkittavien punasolujen biologisista ominaisuuksista:

  • a) Myöhäinen ja heikko agglutinaatio selittyy antigeenien, erytrosyyttien "heikoilla" muodoilla ja useammin heikon agglutinogeenin A 2 läsnäololla ryhmissä A ja AB. Samanaikaisesti, jos veriryhmä määritetään ilman seerumin testaamista aglutiniinien esiintymisen varalta (yksinkertainen reaktio), voi tapahtua virheitä, joiden seurauksena A 2 B -ryhmän veri määritellään ryhmäksi B (III) ja veri A 2 - ryhmänä 0 (I). Siksi virheiden välttämiseksi sekä luovuttajien että vastaanottajien veriryhmä on määritettävä tavallisilla punasoluilla (kaksois- tai ristireaktio). Agglutinogeeni A 2:n tunnistamiseksi on suositeltavaa toistaa tutkimus muun tyyppisillä (sarjoilla) reagensseilla käyttämällä muita laboratoriolaseja, mikä lisää reaktion rekisteröintiaikaa.

    Spesifisiä reagensseja veriryhmän selkeyttämiseen A-antigeenin heikkojen varianttien (A 1, A 2, A 3) läsnä ollessa käyttämällä suoraa agglutinaatioreaktiota ovat anti-A cl zolikoni ja anti-A reagenssi).

  • b) "panagglutinaatio" tai "autoagglutinaatio", toisin sanoen veren kyky antaa sama epäspesifinen agglutinaatio kaikkien seerumeiden kanssa ja jopa omalla seerumillaan. Tällaisen reaktion intensiteetti heikkenee 5 minuutin kuluttua, kun taas todellinen agglutinaatio lisääntyy. Sitä esiintyy useimmiten hematologisilla, onkologisilla potilailla, palaneilla potilailla jne. Kontrollia varten on suositeltavaa arvioida, esiintyykö testattujen punasolujen agglutinaatiota AB-ryhmän (IV) standardiseerumissa ja fysiologisessa liuoksessa.

    Veriryhmä "panagglutinaation" aikana voidaan määrittää punasolujen pesun jälkeen kolme kertaa. Epäspesifisen agglutinaation eliminoimiseksi tabletti asetetaan termostaattiin +37°C lämpötilaan 5 minuutiksi, jonka jälkeen epäspesifinen agglutinaatio katoaa, mutta todellinen agglutinaatio jää. On suositeltavaa toistaa määritys käyttämällä monoklonaalisia vasta-aineita ja Coombs-testiä.

    Mikäli punasolujen pesu ei anna toivottua tulosta, on tarpeen ottaa verinäyte uudelleen esilämmitettyyn koeputkeen, laittaa näyte lämpösäiliöön, jotta lämpötila pysyy +37°C:ssa. ja toimita se laboratorioon analysoitavaksi. Veriryhmämääritys tulee tehdä +37°C:n lämpötilassa, johon käytetään esilämmitettyjä reagensseja, suolaliuosta ja tablettia.

  • c) testatun veren punasolut muodostavat ”kolikkopylväitä”, jotka voidaan sekoittaa agglutinaateiksi makroskooppisessa tutkimuksessa. 1-2 tippa isotonista natriumkloridiliuosta ja sen jälkeen tabletin hellävarainen keinuttaminen tuhoaa yleensä "kolikkopylväät".
  • d) sekalainen tai epätäydellinen agglutinaatio: osa punasoluista agglutinoituu ja osa pysyy vapaina. Sitä havaitaan ryhmien A(II), B(III) ja AB(IV) potilailla luuytimensiirron jälkeen tai kolmen ensimmäisen kuukauden aikana ryhmän 0(I) verensiirron jälkeen. Ääreisveren erytrosyyttien heterogeenisuus varmistuu selvästi DiaMed-geelitestissä.

Virheet, jotka riippuvat testattavan seerumin biologisista ominaisuuksista:

  • a) erilaisen spesifisyyden omaavien vasta-aineiden havaitseminen rutiinitestauksen aikana on seurausta aikaisemmasta herkistymisestä. On suositeltavaa määrittää vasta-aineiden spesifisyys ja valita tyypityt punasolut ilman antigeeniä, jolle immunisaatio on havaittu. Immunisoidun vastaanottajan on valittava yksilöllisesti yhteensopiva luovuttajan veri;
  • b) jos havaitaan standardien punasolujen muodostumista testiseerumin läsnä ollessa, on suositeltavaa varmistaa epänormaali tulos käyttämällä ryhmän 0 (I) standardierytrosyyttejä. Erottaaksesi ”kolikkopylväät” ja todelliset agglutinaatit, lisää 1-2 tippaa isotonista natriumkloridiliuosta ja ravista tablettia samalla kun ”kolikkopylväät” tuhoutuvat.
  • c) anti-A- tai anti-B-vasta-aineiden puuttuminen. Mahdollista vastasyntyneillä ja potilailla, joilla on heikentynyt humoraalinen immuniteetti;
  • sivuja yhteensä: 10

    KIRJALLISUUS [näytä] .

  1. Immunologinen luovuttajan ja vastaanottajan valinta verensiirtoja varten, sen komponentit ja luuydinsiirrot / Comp. Shabalin V.N., Serova L.D., Bushmarina T.D. ja muut - Leningrad, 1979. - 29 s.
  2. Kaleko S. P., Serebryannaya N. B., Ignatovich G. P. et ai. Allosensibilisaatio hemokomponenttihoidon aikana ja histoyhteensopivien luovuttaja-vastaanottaja-parien valinnan optimointi sotilaslääketieteellisissä laitoksissa / Metodologinen. suositukset - Pietari, 1994. - 16 s.
  3. Käytännön transfusiologia / Toim. Kozinets G.I., Biryukova L.S., Gorbunova N.A. ja muut - Moskova: Triada-T, 1996. - 435 s.
  4. Opas sotilaalliseen transfusiologiaan / Toim. E. A. Nechaev. - Moskova, 1991. - 280 s.
  5. Opas verensiirtolääketieteeseen / Toim. E. P. Svedentsova. - Kirov, 1999.- 716 s.
  6. Rumyantsev A. G., Agranenko V. A. Kliininen transfusiologia - M.: GEOTAR MEDICINE, 1997. - 575 s.
  7. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Turvallinen verensiirto: opas lääkäreille - St. Petersburg: Peter, 2000. - 320 s.
  8. Shevchenko Yu.L., Zhiburt E.B., Serebryannaya N.B. Hemokomponenttihoidon immunologinen ja infektioturvallisuus - St. Petersburg: Nauka, 1998. - 232 s.
  9. Shiffman F.J. Veren patofysiologia / Käännös. englanniksi - M. - Pietari: BINOM Publishing House - Nevsky Dialect, 2000. - 448 s.
  10. Verensiirto kliinisessä lääketieteessä / Toim. P.L.Mollison, C.P. Engelfriet, M. Contreras. - Oxford, 1988. - 1233 s.

Lähde: Lääketieteellinen laboratoriodiagnostiikka, ohjelmat ja algoritmit. Ed. prof. Karpishchenko A.I., Pietari, Intermedica, 2001

Veriryhmät ovat normaaleja, periytyviä erilaisia ​​veren immunologisia ominaisuuksia. Näiden ominaisuuksien perusteella kaikki ihmiset jaetaan neljään ryhmään rodusta, iästä ja sukupuolesta riippumatta. Ihmisen veriryhmä pysyy vakiona koko hänen elämänsä. Yhden veriryhmän ihmiset eroavat muiden veriryhmien ihmisistä punasolujen sisältämien agglutinogeenien (A ja B) sekä seerumin sisältämien α- ja β-agglutiniinien läsnäololla tai puuttumisella.

AB0-järjestelmän veriryhmät: 0(I)-veriryhmä sisältää α- ja β-agglutiniinit, siinä ei ole agglutinogeenejä; A (II) veriryhmä - agglutiniini a ja agglutinogeeni A; B(III)-veriryhmä - agglutiniini ja agglutinogeeni B; AB(IV) veriryhmä - sisältää agglutinogeenit A ja B, agglutiniinit puuttuvat.

Vastaanottaja on henkilö, joka saa verensiirtoa, luovuttaja on henkilö, joka antaa verensä siirtoon. Ihanteellisesti vastaanottajalle sopii samaan ryhmään kuuluva veri. Veri on täysin yhteensopimatonta, jos vastaanottajalla on agglutiniinit luovuttajan punasoluihin, koska näissä tapauksissa toisen veren agglutinogeeni A yhdistyy toisen agglutiniiniin tai agglutinogeeni B agglutiniini β:n kanssa. Kehityy ns. punasolujen liimaaminen pieniksi ja suuriksi kokkareiksi. Yhteensopimattoman veren siirto johtaa vakaviin seurauksiin ja voi aiheuttaa kuoleman. Ryhmän 0(I) vastaanottajalle ei voida siirtää minkään muun kuin saman ryhmän verta. AB(IV)-ryhmän vastaanottajalla ei ole agglutiniinia, joten hänelle voidaan siirtää kaikkien ryhmien verta. Ryhmän AB(IV) vastaanottaja on yleinen vastaanottaja. Ryhmän 0(I) verta voidaan siirtää mille tahansa veriryhmälle. Siksi ryhmään 0(I) kuuluvia ihmisiä kutsutaan yleisluovuttajiksi.

Agglutinogeenien A ja B lisäksi erytrosyyteistä löytyy joskus muita agglutinogeenejä (esimerkiksi jne.). Tapauksissa, joissa veri on yhteensopimaton Rh-tekijän mukaan (katso), verensiirtoja ei myöskään voida suorittaa punasolujen tuhoutumiseen (hemolyysiin) liittyvien vakavien komplikaatioiden välttämiseksi.

Ennen jokaista verensiirtoa, joka suoritetaan määräysten mukaisesti ja lääkärin valvonnassa, on tarpeen määrittää veriryhmä ja määrittää sen yhteensopivuus.


Riisi. 1-4. Veriryhmien määritys standardiseerumeilla (A, B, 0).
Riisi. 1. Testaa veriryhmä 0(I).
Riisi. 2. Testattu A-ryhmän veri (II).
Riisi. 3. Testattu B-ryhmän veri (III).
Riisi. 4. Testattu veri ryhmästä AB (IV).

Menetelmä veriryhmien määrittämiseen. Veriryhmän määrittämiseksi valmistele puhdas levy, lasikynä, 0(I), A(II) ja B(III) veriryhmien standardiseerumit, pullot isotonisella natriumkloridin, alkoholin ja jodin liuoksella, imukykyinen puuvilla. villa, lasilevy tai lasitangot ja kolme pipettiä, joiden tulee olla kuivia (vesi tuhoaa).

Levy jaetaan kynällä kolmeen sektoriin, jotka on merkitty 0(I), A(I), B(III). Yksi suuri pisara veriryhmien 0(I), A(II), B(III) standardiseerumia levitetään vastaavalle sektorille erilaisilla pipeteillä. Kun pisara seerumia on vapautunut pipetistä, se lasketaan välittömästi pulloon, josta se on otettu. Sormi pyyhitään alkoholilla ennen veren ottamista. Kun olet ruiskuttanut sormen lihan neulalla, purista pisara verta. Siirrä kolme tippaa verta (kukin neulanpään kokoinen) lasisauvalla tai puhtaan lasilevyn kulmalla 0(I), A(II) ja B(III) veriryhmien seerumien viereen. Kun kelloon on merkitty kellon aika, sekoita veri aina uusilla lasisauvoilla vuorotellen veriryhmäseerumien 0(I), A(II) ja B(III) kanssa, kunnes seos muuttuu tasaisen vaaleanpunaiseksi. Veriryhmämääritys tehdään 5 minuutin sisällä. (katso kelloa). Tämän ajan kuluttua jokaiseen seoksen tippaan lisätään yksi tippa isotonista natriumkloridiliuosta. Tämän jälkeen levyä, jossa on verta, heilutetaan hieman, kallistetaan eri suuntiin niin, että seos sekoittuu hyvin isotoniseen natriumkloridiliuokseen, mutta ei leviä lasille. Jos reaktio on positiivinen, ensimmäisten minuuttien aikana sekoittamisen aloittamisesta, jopa ennen isotonisen liuoksen lisäämistä, seokseen ilmestyy pieniä punaisia ​​rakeita, jotka koostuvat yhteen tarttuneista punasoluista. Pienet jyvät sulautuvat suuremmiksi ja joskus erikokoisiksi hiutaleiksi (agglutinaation ilmiö). Jos reaktio on negatiivinen, seos pysyy tasaisen vaaleanpunaisena. Kun testi suoritetaan kolmella yllä luetellulla seerumilla kullekin veriryhmälle, voi esiintyä tietty positiivisten ja negatiivisten reaktioiden yhdistelmä (kuvat 1-4). Jos kaikki kolme seerumia antoivat negatiivisen reaktion, eli kaikki seokset pysyivät tasaisen vaaleanpunaisina, testattu veri kuuluu ryhmään 0(I). Jos vain veriryhmän seerumi A(I) antoi negatiivisen reaktion ja veriryhmän 0(I) ja B(III) seerumit antoivat positiivisen reaktion, eli niissä esiintyi jyviä, niin tutkittu veri kuuluu ryhmään A(II) ). Jos B(III)-veriryhmän seerumi antoi negatiivisen reaktion ja 0(I)- ja A(II)-veriryhmien seerumi antoi positiivisen reaktion, niin testattu veri kuuluu B(III)-ryhmään. Jos kaikki kolme seerumia antoivat positiivisia reaktioita, eli rakeisuutta esiintyi kaikkialla, testattu veri kuuluu AB (IV) ryhmään. Kaikki muut yhdistelmät viittaavat virheeseen määritelmässä. Virheiden syyt veriryhmien määrittelyssä ja toimenpiteet niiden estämiseksi. 1. Liikaa verta, jos otetaan liian suuri pisara. Veripisaran tulee olla 10 kertaa pienempi kuin pisara seerumia. 2. Jos seerumi on heikko tai potilaan punasolut eivät tartu hyvin yhteen, voit tarkastella agglutinaatiota (katso), koska reaktio alkaa myöhään tai on lievä. On tarpeen ottaa luotettavia seerumeja, joiden aktiivisuus on testattu ja joiden viimeinen käyttöpäivä ei ole umpeutunut. 3. Matalissa ympäristön lämpötiloissa voi esiintyä epäspesifistä kylmäagglutinaatiota - panagglutinaatiota. Isotonisen natriumkloridiliuoksen lisääminen ja sen jälkeen levyn heiluttaminen eliminoi yleensä kylmäagglutinaation. Tämän välttämiseksi ympäristön lämpötila ei saa olla alle 12 ja korkeintaan 25°. 4. Pitkäaikaisessa tarkkailussa seos alkaa kuivua reuna-alueelta, jossa joskus esiintyy rakeisuutta. Jos seoksen nestemäisessä osassa ei ole rakeisuutta, voidaan puhua negatiivisesta agglutinaatioreaktiosta.

Kun lääkäri on määrittänyt veriryhmän, hänen on välittömästi tehtävä muistiinpano etusivulle. Työn päätyttyä levy, pipetit ja objektilasit on pestävä perusteellisesti hanan alla lämpimällä vedellä, pyyhittävä kuivaksi ja asetettava kaappiin. ampulleissa tai injektiopulloissa säilytetään kuivassa ja lämpimässä huoneessa lukitussa kaapissa enintään 20°:n lämpötilassa.

Veriryhmän määrittämistä tavallisilla punasoluilla (ns. kaksoisreaktio) käytetään vain laboratorioissa ja asemilla. Jokapäiväisessä työssä he käyttävät agglutinaatioreaktiota standardiseerumien kanssa edellä kuvatun menetelmän mukaisesti.

Verisolujen (erytrosyytit) muodostavien antigeenien tyypeistä riippuen määritetään tietty veriryhmä. Jokaiselle ihmiselle se on jatkuvaa eikä muutu syntymästä kuolemaan.

Punasolujen määrä määrittää veriryhmän

Kuka keksi ihmisen veriryhmän?

Itävaltalainen immunologi Karl Landsteiner onnistui tunnistamaan ihmisen biologisen materiaalin luokan vuonna 1900. Tällä hetkellä punasolujen kalvoista tunnistettiin vain 3 antigeenityyppiä - A, B ja C. Vuonna 1902 oli mahdollista tunnistaa 4. erytrosyyttien luokka.

Karl Landsteiner löysi ensimmäisenä veriryhmät

Karl Landsteiner pystyi tekemään toisen tärkeän saavutuksen lääketieteessä. Vuonna 1930 tiedemies yhdessä Alexander Wienerin kanssa löysi veren Rh-tekijän (negatiivinen ja positiivinen).

Veriryhmien ja Rh-tekijän luokittelu ja ominaisuudet

Ryhmäantigeenit luokitellaan yhden AB0-järjestelmän mukaan (a, b, nolla). Vakiintunut konsepti jakaa verisolujen koostumuksen 4 päätyyppiin. Niiden erot ovat plasman alfa- ja beeta-agglutiniinit sekä spesifisten antigeenien läsnäolo punasolujen kalvolla, jotka on merkitty kirjaimilla A ja B.

Taulukko "Veriluokkien ominaisuudet"

Ihmisten kansallisuus tai rotu ei vaikuta ryhmän jäsenyyteen.

Rh-tekijä

AB0-järjestelmän lisäksi biologinen materiaali luokitellaan veren fenotyypin mukaan - spesifisen antigeenin D läsnäolo tai puuttuminen siinä, jota kutsutaan Rh-tekijäksi (Rh). Proteiini D:n lisäksi Rh-järjestelmä kattaa 5 muuta pääantigeeniä - C, c, d, E, e. Ne sisältyvät punasolujen ulkokalvoon.

Rh-tekijä ja verisolujen luokka vakiintuvat lapsen kohdussa ja välittyvät hänelle hänen vanhemmiltaan koko elämän ajan.

Veriryhmän ja Rh-tekijän määritysmenetelmä

Ryhmään kuulumisen tunnistamismenetelmät

Useita menetelmiä käytetään spesifisten antigeenien havaitsemiseen erytrosyyteissä:

  • yksinkertainen reaktio - otetaan luokkien 1, 2 ja 3 standardiseerumi, johon verrataan potilaan biologista materiaalia;
  • kaksoisreaktio - menetelmän ominaisuus ei ole vain standardiseerumien (verrattuna tutkittaviin verisoluihin), vaan myös standardien erytrosyyttien (verrattuna potilaan seerumiin) käyttö, jotka on valmistettu valmiiksi verensiirtokeskuksissa;
  • monoklonaalisia vasta-aineita - käytetään anti-A- ja anti-B-sykloneja (valmistettu geenitekniikalla steriilien hiirten verestä), joihin verrataan tutkittavaa biologista materiaalia.

Menetelmä veriryhmän tunnistamiseksi käyttämällä monoklonaalisia vasta-aineita

Plasman tutkimisen spesifisyys sen ryhmään kuulumisen suhteen on potilaan biologisen materiaalin näytteen vertaaminen standardiseerumiin tai standardeihin punasoluihin.

Tämän prosessin järjestys on seuraava:

  • laskimonesteen kerääminen tyhjään mahaan 5 ml:n määränä;
  • vakionäytteiden jakelu lasilevylle tai erikoislevylle (jokainen luokka on allekirjoitettu);
  • Potilaan veri asetetaan rinnakkain näytteiden kanssa (materiaalin määrän tulee olla useita kertoja pienempi kuin standardiseerumin pisaroiden tilavuus);
  • verineste sekoitetaan valmistettujen näytteiden (yksinkertainen tai kaksoisreaktio) tai syklonien (monokliinisten vasta-aineiden) kanssa;
  • 2,5 minuutin kuluttua lisätään erityistä suolaliuosta niihin tippoihin, joissa on tapahtunut agglutinaatiota (A-, B- tai AB-ryhmän proteiineja on muodostunut).

Agglutinaation (punasolujen tarttuminen ja saostuminen vastaavilla antigeeneillä) esiintyminen biologisessa materiaalissa mahdollistaa punasolujen luokittelun johonkin luokkaan (2, 3, 4). Mutta tällaisen prosessin puuttuminen osoittaa nolla (1) -muotoa.

Kuinka määrittää Rh-tekijä

Rh-sukuisuuden havaitsemiseen on useita menetelmiä - anti-Rhesus-seerumien ja monoklonaalisen reagenssin (ryhmän D proteiinit) käyttö.

Ensimmäisessä tapauksessa menettely on seuraava:

  • materiaali kerätään sormesta (säilykeveri tai itse punasolut, jotka muodostuivat seerumin laskeutumisen jälkeen, ovat sallittuja);
  • 1 tippa anti-reesusnäytettä laitetaan koeputkeen;
  • pisara tutkittavaa plasmaa kaadetaan valmistettuun materiaaliin;
  • pieni ravistelu mahdollistaa seerumin tasaisen jakautumisen lasisäiliössä;
  • 3 minuutin kuluttua säiliöön lisätään natriumkloridiliuos, jossa on testattava seerumi ja verisolut.

Koeputken useiden käännösten jälkeen asiantuntija tulkitsee sen. Jos agglutiniinit näkyvät kirkastetun nesteen taustalla, puhumme Rh+:sta - positiivisesta Rh-tekijästä. Seerumin värin ja koostumuksen muutosten puuttuminen osoittaa negatiivisen Rh:n.

Veriryhmän määritys Rh-järjestelmän mukaan

Reesuksen tutkimukseen monoklinaalista reagenssia käyttämällä käytetään coliclon anti-D super (erikoisliuos). Analyysimenettely sisältää useita vaiheita.

  1. Reagenssi (0,1 ml) levitetään valmistetulle pinnalle (levy, lasi).
  2. Liuoksen viereen laitetaan pisara potilaan verta (enintään 0,01 ml).
  3. Kaksi tippaa materiaalia sekoitetaan.
  4. Dekoodaus tapahtuu 3 minuuttia tutkimuksen alkamisen jälkeen.

Useimmilla planeetan ihmisillä on punasoluissaan Rh-järjestelmän agglutinogeeni. Jos tarkastelemme prosentteja, 85 prosentilla vastaanottajista on proteiini D ja he ovat Rh-positiivisia, ja 15 prosentilla ei ole sitä - tämä on Rh-negatiivinen tekijä.

Yhteensopivuus

Veren yhteensopivuus vastaa ryhmää ja Rh-tekijää. Tämä kriteeri on erittäin tärkeä elintärkeää nestettä siirrettäessä sekä raskauden suunnittelun ja raskauden aikana.

Mikä veriryhmä lapsella tulee olemaan?

Genetiikan tiede mahdollistaa lasten ryhmänkuuluvuuden ja reesuksen perimisen vanhemmiltaan. Geenit välittävät tietoa verisolujen koostumuksesta (agglutiniini alfa ja beeta, antigeenit A, B) sekä Rh.

Taulukko "Veriryhmien periytyminen"

Vanhemmat Lapsi
1 2 3 4
1+1 100
1+2 50 50
1+3 50 50
1+4 50 50
2+2 25 75
2+3 25 25 25 25
2+4 50 25 25
3+3 25 75
3+4 25 50 25
4+4 25 25 50

Punasoluryhmien sekoittaminen eri Rh:lla johtaa siihen, että lapsen Rh-tekijä voi olla joko "plus" tai "miinus".

  1. Jos Rh on sama puolisoiden välillä (D-ryhmän vasta-aineet ovat läsnä), 75 % lapsista perii hallitsevan proteiinin ja 25 % puuttuu.
  2. Jos äidin ja isän punasolujen kalvoissa ei ole erityistä D-proteiinia, lapsi on myös Rh-negatiivinen.
  3. Naisella Rh- ja miehellä Rh+ - yhdistelmä viittaa Rh:n esiintymiseen tai puuttumiseen lapsessa suhteessa 50-50, jolloin äidin ja vauvan antigeenin välillä voi olla ristiriita.
  4. Jos äidillä on Rh+ ja isällä ei ole anti-D:tä, Rh siirtyy vauvalle todennäköisyydellä 50/50, mutta vasta-aineristiriitaa ei ole.

On tärkeää ymmärtää, että Rh-tekijä välittyy geneettisellä tasolla. Siksi, jos vanhemmat ovat Rh-positiivisia ja lapsi on syntynyt Rh-, miesten ei pitäisi kiirehtiä kyseenalaistamaan isyyttään. Tällaisten ihmisten perheessä on yksinkertaisesti henkilö, jonka punasoluissa ei ole hallitsevaa proteiinia D, jonka vauva peri.

Verityyppi verensiirtoon

Verensiirtoa (verensiirtoa) suoritettaessa on tärkeää säilyttää antigeeni- ja reesusryhmien yhteensopivuus. Asiantuntijat ohjaavat Ottenbergin sääntöä, jonka mukaan luovuttajan verisolut eivät saa tarttua yhteen vastaanottajan plasman kanssa. Pieninä annoksina ne liukenevat suureen määrään potilaan biologista materiaalia eivätkä saostu. Tämä periaate koskee elintärkeän nesteen siirtoja 500 ml:aan asti, eikä se sovellu, kun henkilöllä on vakava verenhukka.

Ihmisiä, joiden ryhmä on nolla, pidetään yleisluovuttajina. Heidän verensä sopii kaikille.

Harvinaisen 4. luokan edustajat soveltuvat 1., 2. ja 3. verinesteen verensiirtoon. Heitä pidetään yleisinä vastaanottajina (ihmiset, jotka saavat veri-infuusiota).

Potilaille, joilla on 1 (0) positiivinen, luokka 1 (Rh+/-) soveltuu verensiirtoon, kun taas henkilölle, jolla on negatiivinen Rh, voidaan antaa vain nolla Rh-.

Ihmisille, joilla on 2 positiivista, 1 (+/-) ja 2 (+/-) sopivat. Rh-potilaat voivat käyttää vain 1 (-) ja 2 (-). Tilanne on samanlainen kolmannella luokalla. Jos Rh+ – voit lisätä 1 ja 3, sekä positiivisia että negatiivisia. Rh-:n tapauksessa vain 1 ja 3 ilman anti-D:tä ovat sopivia.

Yhteensopivuus syntyessä

Raskautta suunniteltaessa miehen ja naisen Rh-tekijän yhdistelmä on erittäin tärkeä. Tämä tehdään Rh-konfliktin välttämiseksi. Tämä tapahtuu, kun äidillä on Rh- ja lapsi perii Rh+:n isältä. Kun hallitseva proteiini joutuu ihmisen vereen, missä sitä ei ole, voi tapahtua immunologinen reaktio ja agglutiniinien tuotanto. Tämä tila provosoi tuloksena olevien punasolujen tarttumista ja niiden tuhoamista.

Veren yhteensopivuustaulukko lapsen syntymistä varten

Äidin ja lapsen Rhesus-yhteensopimattomuus ensimmäisen raskauden aikana ei aiheuta vaaraa, mutta ennen toista hedelmöitystä on parempi keskeyttää anti-Rhesus-kappaleiden tuotanto. Naiselle ruiskutetaan erityistä globuliinia, joka tuhoaa immunologisia ketjuja. Jos tätä ei tehdä, Rh-konflikti voi aiheuttaa raskauden keskeytyksen.

Voiko veriryhmäsi muuttua?

Lääketieteessä on tapauksia, joissa ryhmäkuuluvuus muuttuu raskauden aikana tai vakavien sairauksien vuoksi. Tämä johtuu siitä, että tällaisissa olosuhteissa punasolujen tuotanto voi lisääntyä voimakkaasti. Samalla punasolujen liimautuminen ja tuhoutuminen hidastuu. Analyysissä tällainen ilmiö heijastuu plasman koostumuksen markkerien muutoksena. Ajan myötä kaikki loksahtaa paikoilleen.

Veriluokka, kuten Rh-tekijä, määräytyy ihmisessä geneettisesti ennen syntymää, eikä se voi muuttua koko elämän ajan.

Ruokavalio veriryhmän mukaan

Ryhmäravitsemuksen pääperiaate on valita elintarvikkeet, jotka ovat geneettisesti lähellä kehoa ja joiden avulla voit parantaa ruoansulatuskanavan toimintaa sekä laihtua.

Ensimmäinen henkilö, joka ehdotti veriryhmän huomioon ottamista ruokaa valittaessa, oli amerikkalainen Peter D'Adamo. Naturopaattinen lääkäri julkaisi useita kirjoja, joissa hän esitti ajatuksensa terveellisestä syömisestä. Jos valitset oikean ruoan, voit unohtaa ravintoaineiden huonon imeytymisen ja maha- ja suoliongelmat.

Taulukko "Ruovalio veriryhmän mukaan"

Veriryhmä Sallittu ruoka Ruokaa tulee rajoittaa mahdollisimman paljon
1 (0) Merikala

Mikä tahansa liha (paistettu, haudutettu, keitetty, marinoitu ja keitetty tulella)

Elintarvikelisäaineet (inkivääri, neilikka)

Kaikenlaiset vihannekset (paitsi perunat)

Hedelmät (paitsi sitrushedelmät, mansikat)

Kuivatut hedelmät, pähkinät

Vihreä tee

Maito ja sen johdannaiset

Jauhotuotteet

Vehnä, maissi, kaurapuuro, hiutaleet, leseet

2 (A) Kalkkuna, kana

Kananmunat

Jogurttia, kefiiriä, fermentoitua leivottua maitoa

Hedelmät (paitsi banaanit)

Vihannekset (erityisen arvokkaita kesäkurpitsaa, porkkanaa, parsakaalia, pinaattia)

Pähkinät, siemenet

Vehnä- ja maissipuuro

Jauhotuotteet

Munakoiso, tomaatit, kaali, peruna

Maito, raejuusto

3 (B) Rasvainen kala

Maito ja maitotuotteet

Mausteet (pippuriminttu, inkivääri, persilja)

Kanan liha

Tattari

Linssit

4 (AB) Meri- ja jokikalat

Soija tuotteet

Raejuusto, jogurtti, kefiiri

Parsakaali, porkkana, pinaatti

Marinoituja kurkkuja, tomaatteja

Merikaali

Kanaa, punaista lihaa

Tuore maito

Joen valkoinen kala

Tattari, maissipuuro

Ryhmäruokavalioon kuuluu alkoholin ja tupakoinnin rajoittaminen. Aktiivinen elämäntapa on tärkeä - juoksu, kävely raittiissa ilmassa, uinti.

Luonnepiirteet veriryhmittäin

Veriryhmä ei vaikuta vain kehon fysiologisiin ominaisuuksiin, vaan myös ihmisen luonteeseen.

Nolla ryhmä

Maailmassa noin 37 % on nollaveriryhmän kantajia.

Heidän luonteensa pääpiirteet ovat:

  • stressin kestävyys;
  • johtamistaidot;
  • päättäväisyys;
  • energia;
  • rohkeutta;
  • kunnianhimo;
  • kommunikointitaidot.

Nollaryhmän haltijat harrastavat mieluummin vaarallisia urheilulajeja, rakastavat matkustamista eivätkä pelkää tuntematonta (he ottavat helposti vastaan ​​minkä tahansa työn, oppivat nopeasti).

Haittoja ovat lyhyt luonne ja ankaruus. Tällaiset ihmiset ilmaisevat usein mielipiteensä hämärästi ja ovat ylimielisiä.

2. ryhmä

Yleisin ryhmä on 2 (A). Sen kantajat ovat huomaamattomia ihmisiä, jotka pystyvät löytämään lähestymistavan vaikeimpiin persoonallisuuksiin. He yrittävät välttää stressaavia tilanteita ja ovat aina ystävällisiä ja ahkeria. Ryhmän 2 omistajat ovat erittäin taloudellisia, suorittavat tunnollisesti velvollisuutensa ja ovat aina valmiita auttamaan.

Luonnevirheitä ovat itsepäisyys ja kyvyttömyys vuorotella työtä ja vapaa-aikaa. Tällaisia ​​ihmisiä on vaikea motivoida tekemään hätiköityjä tekoja tai odottamattomia tapahtumia.

3 ryhmää

Ihminen, jonka veressä on B-ryhmän antigeenit hallitseva, on muuttuva luonne. Tällaisille ihmisille on ominaista lisääntynyt emotionaalisuus, luovuus ja riippumattomuus muiden mielipiteistä. He matkustavat helposti ja ottavat vastaan ​​uusia asioita. Ystävyydessä he ovat omistautuneita, rakkaudessa aistillisia.

Negatiivisia ominaisuuksia ovat usein mm.

  • toistuvat mielialan vaihtelut;
  • epäjohdonmukaisuus toimissa;
  • korkeat vaatimukset muille.

Veriryhmän 3 omaavat yrittävät usein piiloutua maailman todellisuuksilta fantasioissaan, mikä ei aina ole positiivinen luonteenpiirre.

4 ryhmää

Ryhmän 4 puhujilla on hyvät johtajuusominaisuudet, mikä ilmenee kykynä neuvotella ja olla kerättynä ratkaisevalla hetkellä. Tällaiset ihmiset ovat seurallisia, tulevat helposti toimeen muiden kanssa, kohtalaisen tunnepitoisia, monitahoisia ja älykkäitä.

Monista luonteeltaan eduista huolimatta ryhmän 4 edustajat eivät usein pääse yhteiseen päätökseen, kärsivät tunteiden kaksinaisuudesta (sisäinen konflikti) ja ovat hitaita.

Veren spesifinen koostumus ja hallitsevan tekijän (antigeeni D) läsnäolo tai puuttuminen siinä välittyy henkilölle, jolla on geenejä. Veriryhmiä on 4 ja Rh-tekijä. AB0- ja Rh-järjestelmän mukaisen luokituksen ansiosta asiantuntijat ovat oppineet turvallisesti siirtämään luovuttajaveren, määrittämään isyyden ja välttämään Rh-konfliktin lapsen syntymän aikana. Jokainen voi laboratoriossa tarkistaa kuulumisensa ryhmään luovuttamalla biologista materiaalia sormesta tai suonesta.

Plasman (seerumin) antigeenit ovat tiettyjä aminohappo- tai hiilihydraattikomplekseja veriplasman (seerumin) proteiinimolekyylien pinnalla.

VERIRYHMÄN KÄSITE

VERIRYHMÄ on yhdistelmä veren normaaleja immunologisia ja geneettisiä ominaisuuksia, jotka määräytyvät perinnöllisesti ja ovat jokaisen yksilön biologinen ominaisuus.

Veriryhmät ovat periytyviä, muodostuvat kohdunsisäisen kehityksen 3-4 kuukauden aikana ja pysyvät muuttumattomina koko elämän ajan. Uskotaan, että ihmisen veriryhmä sisältää useita kymmeniä antigeenejä erilaisissa yhdistelmissä. Näitä yhdistelmiä - veriryhmiä - voi itse asiassa olla useita miljardeja. Ne ovat käytännössä identtisiä vain identtisissä kaksosissa, joilla on sama genotyyppi.

Käytännön lääketieteessä termi "veriryhmä" kuvastaa yleensä ABO-järjestelmän punasoluantigeenien ja Rh-tekijän sekä vastaavien veriseerumin vasta-aineiden yhdistelmää.

RYHMÄVASTA-AINEET

Jokaiselle tunnetulle antigeenille on havaittu samannimiset vasta-aineet (anti-A, anti-B, anti-Rh, anti-Kell jne.). Ryhmäveren vasta-aineet eivät ole niin pysyvä ihmiskehon ominaisuus kuin antigeenit. Vain ABO-ryhmäjärjestelmässä vasta-aineet ovat veriplasman normaali luontainen ominaisuus. Näitä vasta-aineita (agglutiniinit a ja b) on jatkuvasti läsnä ihmisen plasmassa.

Veriryhmän määritys AVO-järjestelmällä

1. Veriryhmät AVO-järjestelmän mukaan

Termi "yhteensopivuus" ymmärretään luovuttajan ja vastaanottajan veren yhdistelmäksi antigeenien ja vasta-aineiden suhteen, joka ei aiheuta immunologisia vuorovaikutuksia.

Riippuen agglutinogeenien A ja B esiintymisestä erytrosyyteissä ja vastaavien agglutiniinien a ja b esiintymisestä seerumissa, kaikki ihmiset jaetaan neljään ryhmään:

Ryhmä O (I) - erytrosyyteissä ei ole agglutinogeenejä, seerumissa agglutiniinia a ja b.

Ryhmä A (II) - agglutinogeeni A erytrosyyteissä, aglutiniini b seerumissa.

Ryhmä B (III) - agglutinogeeni B erytrosyyteissä, agglutiniini a seerumissa.

Ryhmä AB (IV) - erytrosyytit sisältävät agglutinogeenejä A ja B, seerumissa ei ole agglutiniinia.

Antigeeni A ei ole homogeeninen, sillä on kaksi pääalatyyppiä: Tämän mukaisesti ryhmässä A (II) on kaksi alaryhmää A (P) ja A 2 (II) ja ryhmässä AB (IV) on AB (IV) ja A 2 B (IV).

Ryhmän B antigeeni on homogeenisempi, vaikka harvinaisia ​​muunnelmia on kuvattu. Tällä ei kuitenkaan ole merkittävää kliinistä merkitystä.

Menetelmä veriryhmien määrittämiseen

ABO-järjestelmän mukainen veriryhmä määritetään agglutinaatioreaktiolla. Tällä hetkellä käytetään kolmea menetelmää veriryhmien määrittämiseen ABO-järjestelmän avulla:

Standardin isohemagglutinoivan seerumin mukaan

Standardin isohemagglutinoivan seerumin ja standardi erytrosyyttien mukaan (crossover-menetelmä),

Monoklonaalisten vasta-aineiden käyttö (koliklonit anti-A ja anti-B).

Rutiinitutkimuksessa sairaalalääkäri määrittää veriryhmän isohemagglutinoivalla tavanomaisilla seerumeilla tai kolikloneilla ja lähettää sitten veren serologiseen laboratorioon tarkastamaan ryhmän poikkileikkausmenetelmällä.

Veriryhmä katsotaan määritetyksi vasta, kun laboratorio vahvistaa sairaalalääkärin saamat tiedot. Jos tutkimustulokset eroavat toisistaan, molemmat tutkimukset on toistettava.

Hätätilanteessa (verenvuototapauksessa kiireellinen verensiirto on tarpeen) sairaalalääkäri määrittää ryhmän itse (uudelleentarkastus suoritetaan laboratoriossa, mutta sen jälkeen).

VERITYYPIEN MÄÄRITTÄMINEN STANDARDIN ISOHEMAGLUTINOINTISEERUMILLA

Yleisin kliinisissä ja laboratoriokäytännöissä.

Menetelmän ydin on A- ja B-ryhmän antigeenien havaitseminen testiverestä käyttämällä standardeja isohemagglutinoivaa seerumia. Suorita hyvin valaistussa huoneessa 15-25°C lämpötilassa.

a) Tarvittavat varusteet

Kahden eri sarjan ryhmien O (I), A (II), B (III) ja AB (IV) standardi isohemagglutinoiva seerumi. Heran tulee olla läpinäkyvää, ilman mädäntymisen merkkejä. Mukavuuden vuoksi eri ryhmien tavalliset hemagglutinoivat seerumit on sävytetty tietyllä värillä: O (I) - väritön (harmaa), A (II) - sininen, B (III) - punainen, AB (IV) - kirkkaan keltainen. On huomattava, että nämä värit ovat mukana kaikissa verivalmisteiden merkinnöissä, jotka liittyvät ryhmään (veri, punasolut, plasma jne.).

Valkoiset posliini- tai emalilautaset tai muut kostutetulla pinnalla olevat lautaset, jotka on merkitty 0(1), A(P), V(W), AB(IV).

Isotoninen natriumkloridiliuos.

Neulat, pipetit, lasitangot (diat).

b) Reaktiotekniikka

1. Ryhmien I, II, III standardi isohemagglutioivaa seerumia levitetään levylle (levylle) tilavuudessa 0,1 ml (yksi iso pisara, halkaisijaltaan noin 1 cm). Virheiden välttämiseksi levitetään kaksi seerumisarjaa kustakin ryhmästä. Yhteensä saadaan 6 tippaa.

2. Kuusi tippaa testiverta, noin 0,01 ml:n neulanpään kokoinen (pieni pisara), siirretään peräkkäin kuivalla lasisauvalla levylle 6 pisteessä, kukin pisaran viereen standardiseerumia (verimäärä). testatun määrän tulee olla noin 10 kertaa pienempi kuin tavallisen seerumin määrä), sekoita ne sitten huolellisesti käyttämällä pyöristettyjä reunoja olevia lasisauvoja.

3. Ravista levyä säännöllisesti sekoittamisen jälkeen.

Agglutinaatio alkaa ensimmäisten 10-30 sekunnin kuluessa.

4. Lisää yksi tippa isotonista natriumkloridiliuosta niihin tippoihin, joissa on tapahtunut agglutinaatiota, minkä jälkeen reaktion tulos arvioidaan.

Jos reaktio on positiivinen, yleensä ensimmäisten 10-30 sekunnin aikana, seokseen ilmaantuu pieniä punaisia ​​rakeita (agglutinaatteja), jotka koostuvat liimautuneista punasoluista, jotka näkyvät paljaalla silmällä.

Jos kaikkien kolmen ryhmän seerumit antoivat positiivisen reaktion, tämä osoittaa, että testattu veri sisältää molemmat agglutinogeenit - A ja B ja kuuluu ryhmään AB (IV). Tällaisissa tapauksissa ei-spesifisen agglutinaatioreaktion (kylmäagglutinaatio, agglutinaatio, allergia) sulkemiseksi pois on kuitenkin tarpeen suorittaa testiveren lisäkontrollitutkimus standardilla AB(IV)-ryhmän isohemagglutinoivalla seerumilla, joka ei sisällä agglutiniineja. . Ainoastaan ​​agglutinaation puuttuminen tässä pisarassa agglutinaation läsnä ollessa pisaroissa, jotka sisältävät ryhmien 0 (1), A (II) ja B (III) standardiseerumia, mahdollistaa sen, että voimme pitää reaktion spesifisenä ja luokitella testiveren ryhmään AB 0 (IV).

On huomattava, että jos testiveressä on heikko antigeeni A:n alatyyppi, agglutinaatioreaktio ryhmien 0(1) ja B(III) hemagglutinoivalla seerumilla alkaa myöhemmin (3-4 minuutin kohdalla). Antigeeni A:n alatyypin määrittämiseksi tarkasti tarvitaan lisäreaktio niin kutsutun anti-A-reagenssin kanssa.

VERITYYPIEN MÄÄRITTÄMINEN ISOHEMAGLUTINOIVASTA STANDARDISEERUMILLA JA STANDARDIERYTROSYYTEILLÄ (RISTIMENETELMÄ)

Menetelmää käytetään useimmiten serologisissa laboratorioissa. Menetelmän ydin on määrittää A- ja B-ryhmän antigeenien läsnäolo tai puuttuminen testiverestä käyttämällä tavanomaisia ​​isohemagglutinoivia seerumeita sekä ryhmän vasta-aineita a ja b käyttämällä standardeja erytrosyyttejä.

Laitteisto reaktioon tavallisten erytrosyyttien kanssa eroaa siinä, että agglutinaatioreaktioon tarvitaan kolmen veriryhmän standardi erytrosyyttejä: 0(1), A(II), B(III).

Tavallisia punasoluja valmistetaan sellaisten luovuttajien verestä, joilla on aiemmin tunnettu veriryhmä, ja niitä säilytetään 4-8 °C:ssa.

Yksi iso pisara koeveriseerumia koeputkesta (0,1 ml) levitetään merkitylle levylle kuusikuoppaisella pipetillä ja niiden viereen yksi pieni pisara (0,01 ml) ryhmien 0(1) standardeja punasoluja, A(P), V(SH) (kukin kaksi jaksoa).

Eräs tavanomaisten erytrosyyttien kanssa tapahtuneen reaktion tulosten tulkinnan erikoisuus on, että ryhmän 0(1) punasolut ovat kontrollia (ne eivät sisällä antigeenejä, mikä tekee spesifisen agglutinaatioreaktion minkään seerumin kanssa pohjimmiltaan mahdottomaksi).

VERITYYPPIEN MÄÄRITTÄMINEN MONOKLONAALISILLA VASTA-AINEILLA

Veriryhmän määrittämiseen käytetään monoklonaalisia vasta-aineita, jotka tuotetaan hybridoomabioteknologialla.

Hybridooma on soluhybridi, joka muodostuu fuusioimalla luuytimen kasvainsolu (myelooma) immuunilymfosyytillä, joka syntetisoi spesifisiä monoklonaalisia vasta-aineita. Hybridooma saa molempien "vanhempien" ominaisuudet: kasvainsolulle ominaisen rajattoman kasvun ja immuunilymfosyytille ominaisen kyvyn syntetisoida vasta-aineita.

Vakioreagensseja on kehitetty - monoklonaalisia vasta-aineita (MAb:t): anti-A- ja anti-B-kolikloneja, joita käytetään erytrosyyttien agglutinogeenien määrittämiseen. Zoliklonit ovat lyofilisoitua punaista (anti-A) tai sinistä (anti-B) värillistä jauhetta, joka laimennetaan isotonisella natriumkloridiliuoksella juuri ennen tutkimusta.

Anti-A- ja anti-B-tsolikloneja levitetään valkoiselle tabletille, yksi suuri tippa (0,1 ml) asianmukaisten merkintöjen alle: anti-A tai anti-B. Yksi pieni pisara (0,01 ml) testattavaa verta levitetään vasta-ainepisaroiden viereen. Komponenttien sekoittamisen jälkeen agglutinaatioreaktiota havaitaan 2-3 minuuttia.

RH-TEKIJÄN MÄÄRITTÄMINEN

Vuonna 1940 K. Landsteiner ja A. S. Wiener löysivät ihmisen punasoluista täysin uuden antigeenin, jota he kutsuivat Rh-tekijäksi (Rh). Rh-tekijää on veressä 85 prosentilla ihmisistä, ja 15 prosentilla ihmisistä ei ole tätä tekijää. Joten se on nimetty Rhesus-makakin mukaan, jolla on se aina.

Rh-antigeenit luokitellaan lipoproteiineiksi. Ne ovat erittäin aktiivisia ja kykenevät indusoimaan immuunivasta-aineiden muodostumista.

Rh-antigeenin läsnäolo havaitaan ihmissikiössä 5-8 viikon iässä ja ilmentyy hyvin 3-4 kuukauden ikäisessä alkiossa.