Диагностика и лечение микозов кожи и ногтей. Лабораторная диагностика грибковых заболеваний кожи Микроскопическая диагностика грибковых заболеваний

Клиническая картина грибковых заболеваний кожи весь­ма полиморфна, поэтому во всех случаях диагноз должен быть подтвержден лабораторными методами исследования. Для лабораторной диагностики микозов используют микроскопический, люминесцентный, культуральный, иммунологический (аллергологический и серологический) методы иссле­дования, а также эксперименты на животных.

Лабораторная диагностика микозов складывается из не­скольких этапов. В обычной клинической практике обычно ограничиваются микроскопическим и культуральным иссле­дованием зараженного материала. При необходимости эти методы дополняются иммунологическими, гистологическими исследованиями, заражением экспериментальных животных. При некоторых микозах кожи важную вспомогательную роль в диагностике играет люминесцентный метод.

Взятие патологического материала.

Успех лабораторного исследования микозов во многом зависит от правильного взятия патологического материала. Поскольку грибы способны поражать различные органы че­ловека, при подозрении на микоз необходимо исследовать различный патологический материл. В дерматологической практике чаще всего приходится иметь дело с микозами, при которых исследованию на грибы подлежат кожные чешуйки, волосы, ногти. При подозрении на глубокие и системные микозы может возникнуть необходимость лабораторной диа­гностики на грибы мокроты, промывных вод, мочи, фекалий, гноя, отделяемого слизистых оболочек, крови, кусочков орга­нов и биопсированной ткани.

В очагах поражения на коже, из которых предполагается брать патологический материал, за несколько дней или не­дель необходимо прекратить всякое лечение. Следует иметь в виду, что использование слабых дезинфицирующих раство­ров или даже индифферентных средств может помешать ис­следованию. Непосредственно перед забором патологическо­го материала очаг поражения необходимо обработать 96% спиртом или раствором ксилола. Материал лучше всего брать со свежих, но уже полностью развившихся очагов по­ражения. Кожные чешуйки необходимо соскабливать с пе­риферии очагов, грибы здесь встречаются чаще всего как в виде мицелия, так и спор. Кожные чешуйки снимаются скальпелем, корочки - эпиляционным пинцетом.

У больных микозами волосистой части головы поражен­ные волосы извлекают эпиляционным пинцетом. Для исследования необходимо брать короткие, перекрученные, изогну­тые в виде дуги или запятой, а также длинные, но покрытые чехлом в основании, волосы. При подозрении на фавус необ­ходимо помнить о том, что волосы не обламываются, но ста­новятся тусклыми, безжизненными, седоватыми.

Соскобы с поверхностных очагов пораженных ногтевых пластинок делают скальпелем, утолщенные ногтевые пластинки срезают скальпелем или маникюрными кусачками.

Жидкий патологический материал собирают асептично в стерильную посуду, чешуйки кожи, ногтя и волосы – на листочки простой или мягкой пергаментной бумаги.

Отделяемое со слизистых оболочек для посева берут тампоном из гигроскопической ваты, который затем помеща­ют в сухую стерильную пробирку или пробирку с 2 мл пи­тательной среды (сусло Сабуро). Материал из влагалища получают из заднего свода; с головки полового члена – из области ве­нечной борозды.

Материал из наружного слухового прохода берут петлей или тампоном, который помещают в пробирку.

Поступивший в лабораторию материал исследуют в течение 1 ч после взятия при хранении в условиях комнатной температуры или не более чем через 3 ч при хранении в холодильнике при температуре 4 °С.

Кровь для исследования на грибы берут из локтевой вены в количестве 5 – 10 мл и вносят сразу с колбочку с жидкой питательной средой или равным количеством цитрата натрия.

При необходимости исследования на грибы биопсийного материала его помещают в стерильную чашечку Петри и используют для микроскопии, посевов на питательные среды и приготовления гистологических препаратов.

Микроскопическое исследование.

Микроскопическое исследование патологического мате­риала на грибы производят в нативных и окрашенных препаратах. Для приготовления неокрашенных препаратов полученный материал размельчают при помощи скальпеля или препаровальной иглы и помещают на середину предметного стекла. Для более четкого выявления элементов гриба производят просветление (мацерацию) материала. С этой целью прибегают к помощи различных веществ, чаще всего едкой щелочи (КОН, NaOH), которые растворяют эпидермальные чешуйки, слизь, гной, просветляют пигмент волоса и тем са­мым делают грибы доступными для исследования.

В некоторых лабораториях просветление препаратов для микроскопического исследования проводят 15 - 30% раство­ром КОН, в который добавляют 5 - 10% коммерческих тем­но-синих чернил фирмы Паркер (Parker"sSuperchromeBlue-BlackInk). При этой окраске гифы и споры окрашива­ются в голубой цвет.

Содержание

Выявить поражение и определить возбудителя при поражении грибка на первых этапах крайне сложно. Диагностирование осложнено тем, что патология сразу никак не проявляется или имеет разнообразную симптоматику. Для определения возбудителя берут биоматериал с того участка, который поразила патогенная микрофлора: мокроту, часть кожи, зараженный ноготь, кровь, биопсию лимфоузлов или внутренних органов.

Что такое грибковые заболевания

Как выглядит

Причиной обращения к дерматологу становятся, как правило, первые патологические проявления болезни. Клинические признаки будут отличаться в зависимости от места заражения, возбудителя грибкового заболевания. Выделяют следующие типы патогенных микроорганизмов:

• грибок Кандида (Candida) – вызывает кандидозные инфекции;
• Трихофитии (Trichophyton) – провоцирует инфекционные патологии ногтей, кожи, слизистых оболочек;
• Криптококкоз – атакует внутренние органы, легкие;
• Аспергиллез – грибковое заболевание, вызванное снижением иммунитета.

При диагностике может быть определена одна из 2 групп инфекции по локализации:

Проникает патогенная микрофлора через ранки на поверхности эпидермиса, микротравмы, причиной заболевания может стать любая царапина, которая спровоцирует микоз гладкой кожи. Не справляется организм с атакой возбудителя при снижении защитных функций. При диагностике часто определяют заражение родом трихофитон или Кандида. Последние вызывают такие заболевания:

• молочница;
• кандидоз у мужчин;
• кандидоз ротовой полости.

Существует более нескольких десятков возбудителей, их делят по методу поражения тканей. При диагностике могут выявить следующие виды грибковых микроорганизмов:

• глубокие системные микозы провоцирует Histoplasma capsulatum;
• субкутанные подкожные микозы вызывает Sportrichum schenckii;
• эпидермомикозы развиваются из-за Epidermophyton floccosum;
• отрубевидный лишай, поверхностный микоз - Malassezia furfur;
• оппортунистические грибковые заболевания - Candida albicans.

Классификация микозов

Общее название всех болезней этого типа скрывает под собой разные виды поражения организма человека грибами. При диагностике врачи разделяют заболевания кожи на 4 группы:

1. Кератомикозы. Местом локализации становится роговой слой эпидермиса, в других слоях кожи воспалительные явления отсутствуют (пьедра, разноцветный лишай, парша, споротрихоз). Вызывают эту разновидность патологии следующие грибы: Sporotrichium, Trichosporon, Piedraia, Exophiala, Pityrosporum.
2. Дерматомикозы. Характеризуются выраженным воспалительным процессом, локализуются на коже, волосистой части головы, на ногтях (фаус, трихофития, эпидермофития, микроспория). Провоцируют патологии следующие штаммы грибов: Epidermophyton, Microsporum, Trichophyton.
3. Кандидамикозы. Затрагивает этот вид грибков слизистые оболочки, кожу и ее придатки. Часто объектом атаки грибков рода Кандида становятся внутренние органы.
4. Глубокие микозы. Провоцируют тяжелые заражения всех слоев кожи, внутренних органов, слизистых оболочек, костей, мышц (мукороз, пенициллиоз, аспергиллез).

Выделяют отдельно псевдомикозы (актиномикоз, эритразма), которые не являются заболеваниями грибкового типа, но по симптомам схожи с истинными микозами. В этих случаях обязательно нужна дифференциальная диагностика. Диагностика в таких случаях очень важна, потому что помогает определить тип грибкового поражения или исключить его. От этого зависит назначения схемы лечения, ее длительность и эффективность.

Дерматомикозы

Грибки-дерматофиты глубокого проникаются в кожу, провоцируют дерматомикозы, к примеру, следующие известные патологии:

• микроспория;
• трихофития;
• эпидермофития;
• руброфития;
• фавус.

Относят этот вид патологии к разным болезням, которые создают рубцовые изменения, деформацию кистей рук, ногтей стоп, изменение структуры и выпадение волос. Поражают возбудители верхние, глубокие слои кожи, что приводит к появлению фурункулоподобных узлов, пустулезных высыпаний, обширных очагов воспаления. Для развития благоприятным условием становится нарушение гигиены стоп. Сначала грибок растет на коже ног, в межпальцевых промежутках, затем переходит на ногти.

Кандидозы

Патогенные микроорганизмы поражают глубокие и поверхностные слои кожи, распространяются на ногти, волосы, внутренние органы. Вызывают болезни грибы рода Кандида, болезни относятся к группе кандидамикозов. Выделяют следующие типы этих недугов:

• генерализованные;
• поверхностные;
• висцеральные.

Относятся грибы Candida к условно-патогенным. Дрожжеподобные возбудители можно обнаружить при диагностике в кишечнике, ротовой полости и у здорового человека. Сдерживает распространение патогенных микроорганизмов сильный иммунитет, а при его ослаблении начинается активное размножение кандид, что приводит к поражению кожного покрова туловища, ступней, головы, кистей. Клинические изменения отмечаются при всех типах кандидамикозов. Лечение зависит от тяжести течения, вида поражения.

Глубокий микоз

Это вид заболеваний, которые затрагивают глубокие слои кожи, внутренние органы. Болезни развиваются при сильном снижении защитных сил организма, изменении гормонального фона, нарушении обмена веществ. Относят следующие патологии к глубоким микозам:

• кокцидиоидоз;
• хромомикоз;
• риноспоридиоз;
• гистоплазмоз;
• споротрихоз;
• бластомикоз;
• мукороз;
• цефалоспориоз;
• мицетома;
• кладоспориоз;
• мадурская стопа;
• аспергиллез.

Кератомикоз

Это группа патологий, которые локализуются только на кутикулах волос, роговом, поверхностном слое кожи. Характерным признаком кератомикоза становится отсутствие воспалительных явлений. Возбудителями болезни являются плесневелые, дрожжеподобные грибы, дерматофиты (около 70 видов патогенов). Провоцируют они следующие заболевания:

• шимбери;
• белый лишай;
• черный лишай;
• черепицеобразный микоз;
• тропический белый и желтый лишай;
• узловатая трихоспория;
• пьедра;
• разноцветный (отрубевидный) лишай.

Как диагностировать грибок

Далее начинается визуальный осмотр, который помогает определить масштабность поражения, какие участки поверглись воздействию грибков. Врач должен обратить внимание на наличие иммунодефицитного состояния пациента. Для определения типа возбудителя необходимо сделать забор материала, который отправляют на лабораторное исследование. Опытный врач может при первичном осмотре поставить диагноз, но для составления схемы терапии нужно все равно провести изучение биоматериала. Для диагностики грибковых заболеваний применяют следующие методы:

• микроскопия – исследование под микроскопом биоматериала, распространенный и простой метод диагностики;
• исследование под лампой Вуда – специальный спектр ультрафиолетового освещения (люминесценция) помогает заметить грибковые поражения;
• бактериологический посев – точный способ диагностики, но проведение его занимает 2-3 недели, пока не вырастет колония на питательной среде;
• ПЦР-диагностика – самый точный способ определения вида патогенной микрофлоры, но для точного диагноза может потребоваться проведение нескольких анализов, что требует траты денег.

Лабораторные методы

Только своевременный точно поставленный диагноз поможет назначить эффективную схему терапии и сократить длительность курса. Лабораторная диагностика грибковых заболеваний является самым эффективным методом для определения типа возбудителя. Для выявления используют такие варианты исследования:

• бактериологический посев;
• гистологический анализ;
• ПЦР-диагностирование;
• иммунологическое исследование;
• микробиологические исследования;
• культкуральное исследование.

Дифференциальная диагностика микозов

Постановку точного диагноза затрудняет то, что при разных видах микоза появляются различные симптомы. В таких случаях используют дифференциальный метод диагностики, сравнивают с другими дерматологическими патологиями микоз. Часто признаки микоза путают с псориазом, но при соскабливании чешуек грибковая патология не будет кровоточить. Схожая симптоматика наблюдается и с парапсориазом.

Врач должен исключить вероятность развития нуммулярной экземы. Это особый вид патологии, который можно выявить только при лабораторной диагностике. Часто признаки грибка принимают за полиморфный фотодерматоз, который может развиваться только у взрослого человека и никогда не встречается у ребенка. Лабораторная и дифференциальная диагностика обязательна для постановки точного диагноза, назначения грамотного лечения.

Микробиологическая диагностика микозов

Это самый простой и распространенный метод выявления микоза на коже и в крови. Для точного диагноза необходимо собрать материал для исследования. При поражении волосистой части головы нужно при помощи пинцета собрать пораженные волосы, а с кожи сделать соскоб поврежденного участка. Лабораторные исследования при грибковых заболеваниях по микробиологическому методу проводятся при помещении биоматериала в раствор гидроксида калия 30%, потом на предметное стекло.

Анализ поможет вывить, где расположен грибок (снаружи или внутри кожи, волоса), его размеры. Если забор материала провести неверно, то анализ может дать ошибочный результат. Используют для диагностики следующие методы микробиологической диагностики:

• микроскопия с нативными и неокрашенными препаратами;
• микроскопия с окрашенными препаратами.

Методы исследования

При диагностике специалист должен учитывать структуру мицелия (строение гиф, их септированность, цвет), особенности строения спор, кондиев, учитывается их цвет, форма и размер, строение клеточной стенки и т.д. Для исследования готовят нативные, окрашенные препараты. Последние требуют обработки материала разными способами:

1. PAS-окрашивание. Окраска такого типа помогает определить в стенках микроорганизмов нейтральные полисахариды. К ним относится глюкан-маннановый комплекс, который находится в клеточной стенке многих эумицетов. Он и провоцирует процесс окрашивания.
2. PAS-реакция. Используется для диагностики грибковой инфекции тканевой формы. В лаборатории применяют для этого исследования разные модификации, к примеру, окраска по Гридли или реакция Бауэра.
3. Метод Грама. Окраска этим способом помогает выявить наличие сопутствующих микрорганизмов.
4. Окраска по Циль-Нильсону. Помогает определить кислотоустойчивые микроорганизмы. Если биоматериал жидкий, то готовят специальный неокрашенный мазок в просветляющих жидкостях для микроскопии: в равных пропорциях смешивают глицерин и спирт.

Культуральное исследование на грибы

Помещают посев биоматериала на питательную среду (выращивание), чтобы выделить чистую культуру при комнатной температуре. Диморфные грибы в таких условиях образуют мицелий, при росте до 37 градусов начинают формироваться дрожжеподобные клетки. Среда Сабуро применяется для дерматофитов и грибов Candida, для плесневелых (гифальных) необходима среда Чапека. Часто добавляют в состав антибиотик. Глубокие микозы могут определить только в клинико-лабораторных центрах из-за высокой контагиозности.

Люминесцентная диагностика грибковых заболеваний

Для определения пораженных участков кожи патогенной микрофлорой рода Микроспорум используют ультрафиолетовую лампу. Это вариант экспресс-диагностики, которая применяется при необходимости подтвердить наличие кожной инфекции, симптомы лишайных заболеваний. Ультрафиолетовое излучение не является главным способом определения грибка, это вспомогательный метод, поэтому выполнять его не обязательно.

Для осмотра больного используют лампу Вуда, они испускает УФ излучения, под их действием продукты жизнедеятельности грибка светятся ярким светом. Цвет зависит от того, какой вид возбудителя поразил пациента:

• зеленоватый – лишай волосистой части головы;
• голубой – красная волчанка на губах;
• желтоватый – плоские лишайные образования.

Иммунологический ферментный анализ крови на грибок

Для обнаружения микозов, поразивших кожные покровы, внутренние органы (гистоплазмоз, кокцидиоидоз) используют иммунологический ферментный анализ крови на грибковые заболевания. Часто используют эту методику в случае, если взять биопсию тканей для изучения по определенным причинам не получается. Основывается методика на поиск титра антител к конкретному типу грибкового заболевания.

Для этих целей используют определение IgG к аспергиллезу, кандидозу. Точность анализа составляет около 80%, в редких случаях можно получить ложноположительный результат при отсутствии глубоких микозов. Случается это при наличии у больного грибка слизистой оболочки рта или запущенной формы молочницы. Для ИФА требуется забор венозной крови, берут его утром рано или, спустя 4 часа после последнего приема пищи. Другой подготовки для проведения анализа не требуется.

Ответ на анализ будет через несколько суток после забора биоматериала. Редко длительность ожидания превышает 5 дней. Влияет на скорость проведения исследования качество оборудования в лаборатории, если есть причины провести дополнительное изучение образцов крови. Пациенту выдают по завершении процедуры заключение, где будет указано одно из значений:

• при подтверждении наличия грибка будет написано «положительный результат»;
• при отсутствии полной уверенности, что был обнаружен грибок в крови, пишут «сомнительный результат»;
• при отсутствии патогенной микрофлоры в образце биоматериала пишут «отрицательный результат»;
• при наличии хорошего оборудования при исследовании крови могут определить концентрацию клеток микоза и указать показатель в заключение.

ПЦР-диагностика грибковых заболеваний

Самым точным и достоверным способом диагностики грибка и других инфекционных заболеваний является полиразмерная цепная реакция. Обладает метод диагностики следующими преимуществами:

• низкая стоимость анализа;
• высокая точность;
• исследование биоматериала проводится быстро;
• для анализа можно собрать любой образец тканей (частичку кожи, слизистой, соскоб с подошвы стоп, пальцев рук, поверхности ногтей, волосы, кровь).

Главный недостаток этого исследования – узкая направленность. Чтобы диагностировать микоз, нужно точно знать, где он поразил организм человека. ПЦР определяет тип возбудителя, концентрацию в организме больного. Результаты будут известны через сутки, в некоторых случаях (при отсутствии неблагоприятных условий), ответы приходят в день сдачи (через 5-6 часов). Скорость выполнения исследования зависит от правильности забора образца, опытности медперсонала, загруженности работой лаборатории.

Как определить грибок в домашних условиях

При умении распознать симптоматику микозных патологий и применении домашних методов диагностирования, можно определить вид патогена. Пациент должен правильно оценить течение болезни, можно на первых этапах грибковое заболевание спутать с псориазом или лишаем. Чтобы этого избежать, нужно знать основные признаки микоза, которые отличают его от других недугов. Симптомы поражения грибком:

• ногти становятся желтого цвета, начинают слоиться;
• изменение формы ногтевой пластины;
• нет периодов ремиссии и обострения, начинается полное отслоение пластины, что не происходит при кожных патологиях и псориазе;
• место поражения имеет неприятный запах, болит при прикосновенно, появляется зуд, шелушение, могут образовываться бляшки на поверхности кожи;
• поражает грибок, как правило, межпальцевые промежутки на одной или обеих ногах, затем недуг распространяется на ноготь и остальную ступню.

Диагностика грибка ногтей на ногах с помощью перманганата калия

Если вы заметили, что ногти на руках, ногах начали видоизменяться, появился неприятный запах, то можно прямо дома проверить наличие или отсутствие инфекции. Вам понадобится для проведения анализа марганец, теплая вода и емкость. Процедура проводится следующим образом:

• при наличии признаков кожного заболевания нанести тонким слоем йод на этот участок;
• подождите 2 минуты;
• если проблема есть, то очаги поражения примут насыщенный окрас;
• здоровые участки кожи выделять не будут.

Сколько стоит диагностика грибковых заболеваний в клиниках Москвы

Видео

Внимание! Информация, представленная в статье, носит ознакомительный характер. Материалы статьи не призывают к самостоятельному лечению. Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению, исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Согласно инструкции СП 1.2.036-95 Госкомэпиднадзора РФ, Москва, 1996 г. "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности” по эпидемиологической опасности дрожжевые и плесневые грибы, а также дерматофиты относятся к III-IV группам возбудителей инфекционных болезней, поэтому при работе с ними необходимо соблюдать особые правила техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены, направленные на обеспечение личной и общественной профилактики заражения, аллергизации и распространения инфекции.

Лаборатория для работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности укомплектовывается легко дезинфицирующейся мебелью, включая шкафы для чистой лабораторной посуды, реактивов, питательных сред, соответствующим оборудованием и инструментами. Для работы необходимы спиртовки или газовые горелки, микробиологические петли, микологические лопаточки, шпатели, эпиляционные и анатомические пинцеты, кусачки маникюрные, скальпели, ножницы, ложечки Фолькмана, пипетки, пастеровские пипетки, иглы препаровальные, стеклянные палочки, шприцы, низкоскоростная центрифуга, аппарат для встряхивания, чашки Петри, пробирки, стеклянная посуда, ультрафиолетовая лампа Вуда с фильтром, микроскопы, осветители, термостаты, автоклавы, холодильники, сухожаровые шкафы, бактерицидные лампы.

Взятие материала для исследования

Микроскопическая диагностика микозов подразумевает обнаружение мицелия и спор в исследуемом биоматериале. В качестве исследуемого биоматериала рассматриваются чешуйки эпидермиса, волосы и ногти. Непременным требованием перед проведением исследования является отсутствие местного лечения в течение, как минимум, десяти дней и системного лечения – в течение месяца. Следует иметь в виду, что использование пациентом моющих средств (особенно содержащих антисептики) способно повлиять на достоверность результатов исследования, поэтому за 3-4 дня до его проведения запрещают мытьё.

Инструментарий для взятия биоматериала и приготовления препарата представлен на рисунке:

Фото. Инструментарий для взятия биоматериала и приготовления препарата.

При подозрении на микоз гладкой кожи, микоз кистей и стоп без поражения ногтевых пластинок исследуются чешуйки эпидермиса с поверхности очага поражения. При микозе гладкой кожи является предпочтительным исследование эпидермиса с краевой зоны очага поражения, так как в центральной зоне патологический процесс нередко разрешается. При этом не следует забывать о возможности поражения пушковых волос, что определяет выбор дальнейшей тактики лечения. Волосы извлекают эпиляционным пинцетом. При микозе кистей и стоп без поражения ногтевых пластинок исследуются чешуйки эпидермиса из третьей и четвертой межпальцевых складок, а также с ладоней и со свода стоп.

При подозрении на грибковое поражение длинных волос (волосистой части головы, бороды, усов и лобка), а также пушковых волос выполняется их микроскопическое исследование. При трихофитии волосистой части головы волосы обламываются на расстоянии 1-2 мм над уровнем устья волосяного фолликула, напоминая при этом пеньки и точки. Если волос не удаётся захватить эпиляционным пинцетом, то в этом случае его стараются извлечь острым концом скальпеля или препаровальной иглой.

При микроспории волосистой части головы волосы обламываются на высоте 5-6 мм, напоминая «скошенный луг». При микроскопии исследуются именно эти обломанные волосы. Волосы из очагов поражения извлекают с помощью пинцета.

При фавусе исследуют истончённые волосы над поверхностью скутулы.

При подозрении на онихомикоз исследуется легко измельчающийся материал из зоны подногтевого гиперкератоза, а также сами измененные ногтевые пластинки.

Необходимо понимать, что любой исследуемый материал от пациента потенциально заразен, поэтому его взятие необходимо осуществлять в помещении, где осуществляется ежедневная влажная уборка с применением дезинфицирующих средств (5% раствор хлорамина, 5% осветленная хлорная известь), а воздух стерилизуется ультрафиолетовыми облучателями (их включают на 1-1,5 ч и входят в помещение через 20 мин после выключения). Термостаты еженедельно протирают 0,5% раствором хлорамина, стены обрабатывают дезсредствами 1 раз в месяц. Врач при работе должен быть защищён маской, защитными очками, халатом и перчатками. Инструментарий для взятия биоматериала, перчатки, предметные и покровные стёкла, одноразовые пелерины и салфетки обеззараживают после использования, погружая в 1,5% раствор клиндезина-экстра (5% раствор фенола или 5% раствор лизола) на 30 минут. Оставшийся патологический материал (волосы, кожные и ногтевые чешуйки) автоклавируют при 2 атм. и 132˚ С в течение 20 мин (контроль - мочевина) или при 1,5 атм. и 126˚ С в течение 30 мин (контроль - бензойная кислота), либо кипятят 1 час в воде или 30 мин в 1% мыльно-содовом растворе.

Патологический материал транспортируют в лабораторию в специальной таре или металлических биксах, защищая его от прямых солнечных лучей. В сопроводительном документе указывают фамилию, имя, отчество, пол, возраст и адрес больного, предполагаемый клинический диагноз, наименование исследуемого материала, время его взятия, локализацию очага, номер истории болезни, фамилию врача и учреждение, направляющее материал.

Приготовление препарата

После получения чешуек эпидермиса с очага поражения производится приготовление препарата для микроскопического исследования. На исследуемый материал, помещенный на предметное стекло, наносят 1-2 капли 20% КОН, после чего предметное стекло подогревают над пламенем горелки до появления белесоватого ободка кристаллизованной щелочи по периферии. Затем препарат накрывают покровным стеклом (которое придавливают препаровальной иглой) и микроскопируют. Исследование необходимо проводить не позднее 2-х часов после приготовления препарата из-за возможности кристаллизации щёлочи.

Способ приготовления препарата волоса при подозрении на его грибковое поражение соответствует ранее описанному, с той лишь разницей, что покровное стекло не придавливается препаровальной иглой (во избежание раздавливания волоса).

Фото. Появление ободка кристаллизованной щелочи.

Для приготовления препарата кусочки срезанных ногтевых пластинок опускают в пробирку с 20% КОН и экспонируют в термостате в течение 1 часа (t≈37˚C), а затем получившуюся желеобразную массу переносят на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют под микроскопом.

В отличие от ногтевых пластинок образцы из легко измельчающегося материала зоны подногтевого гиперкератоза помещают на предметное стекло, на них наносят 1-2 капли 20% КОН, после чего предметное стекло подогревают над пламенем горелки до появления белесоватого ободка кристаллизованной щелочи по периферии (рис.65). Затем препарат накрывают покровным стеклом, которое осторожно придавливают препаровальной иглой, и исследуют под микроскопом.

Микроскопия препарата

Для проведения микроскопического исследования используют лабораторный микроскоп без применения иммерсии. Микроскопия чешуек эпидермиса, чешуек из зоны подногтевого гиперкератоза, а также растворенных ногтевых пластинок производится вначале на малом увеличении (×100), а при обнаружении нитей мицелия, напоминающих «карту рек» (железных дорог), объектив переводится на бȯльшее увеличение (×400). Мицелий на среднем увеличении напоминает причудливой формы стеклянные палочки, изменяющие степень преломления света при работе микровинтом микроскопа.

Микроскопия препарата волоса производится сразу на среднем увеличении (×200 или ×400). При трихофитии внутри волоса обнаруживаются крупные споры, расположенные рядами, тогда как при микроспории внутри волоса имеется множество мелких мозаично расположенных спор (отсюда термин «микроспория»). Иногда отмечают наличие чехлика снаружи волоса – это характерно для как трихофитии (вариант ectothrix, споры при этом крупные), так и для микроспории (в этом случае чехлик состоит из мелких спор). При микроскопии пораженных волос при фавусе, внутри волоса кроме скоплений спор круглой или многоугольной формы, обнаруживаются пузырьки воздуха и нити мицелия.

Препараты необходимо просмотреть не позднее 2 часов с момента их приготовления из-за возможности кристаллизации щелочи. Для повышения надежности диагностики следует сделать несколько препаратов (не менее двух) из одного очага поражения. Возможные ошибки при микроскопической диагностике микозов могут быть связаны как с некачественным приготовлением препаратов (перегревом над пламенем горелки, что сопровождается преждевременной кристаллизацией щелочи), а также с недостаточным опытом исследователя (когда за нити мицелия нередко принимают волокна ткани, случайно оказавшейся в препарате).

Основой диагностики грибковых заболеваний является микроскопическое исследование препаратов, приготовленных из пораженных участков кожи и ногтей. Однако микроскопическая картина при разных видах микозов сходная: в кожных чешуйках и ногтях видны споры грибков и ветвистый септированный мицелий диаметром 4-7мкм. Поэтому род и вид гриба в большинстве случаев не может быть определен по микроскопической картине в кожной чешуйке или в соскобе с ногтя. Для идентификации возбудителя проводят посевы на питательные среды, чаще всего на среду Сабуро.

Эпидермофития. Поражается роговой слой кожи, чаще всего стоп, и ногти нижних конечностей. Волосы никогда не поражаются. На ногтях появляются желтые пятна или полосы, затем развивается гиперкератоз (утолщение ногтей), их деформация и разрушение. На коже стоп появляется пластинчатое шелушение подошв и межпальцевых складок, покраснение. Иногда образуются пузыри, опрелости, трещины. Заболевание сопровождается зудом, жжением, болезненностью.

При микроскопическом исследовании соскобов, чешуек, покрышек пузырей определяются малосептированные нити мицелия диаметром 3-5мм, часть нитей распадается на круглые и прямоугольные споры.

Трихофития. Это грибковое заболевание кожи и ее придатков с особой склонностью поражать волосы [лат. trichos волос + phyton грибок]. На волосистой части головы появляются многочисленные очаги поражения диаметром около 1,5см. Кожа на них отечная, гиперемирована, покрыта чешуйками. Волосы в очагах обламываются на уровне 2-3мм над поверхностью кожи, откуда и название «стригущий лишай».

Микроскопическое исследование выявляет характерную особенность грибов вида трихофитон - расположение их спор цепочками. В зависимости от свойств грибов различают:

Endothrix (возбудитель поверхностной трихофитии). Грибы растут внутри волоса, резко изменяя его структуру. Весь волос заполнен (нафарширован) параллельными рядами цепочек, состоящих из крупных округлых или квадратных спор;

Ectothrix (возбудитель глубокой трихофитии), при котором волос окутан чехлом из мелких или крупных спор, расположенных вдоль оси цепочками.

Фавус – парша. Поражаются волосы и кожа, реже – ногти. Волосы становятся тонкими, тусклыми, «припудренными», как старинные парики, но не обламываются. Для поражения кожи характерно появление корочек желто-серого цвета (щитков) с приподнятыми, как у блюдцев, краями.

При микроскопическом исследовании выявляются пузырьки воздуха внутри пораженного волоса.

Микроспория. Поражаются кожа и волосы. В очагах поражения волосы обламываются на уровне 6-8мм над поверхностью кожи. Вокруг оставшихся пеньков заметны беловатые чехлы.

При микроскопическом исследовании пораженных волос видны споры, располагающиеся вокруг и внутри волоса мозаично (беспорядочно). Они очень мелкие (1-3мм), отсюда и название болезни. Диагностике микроспории помогает характерное люминесцентное свечение волос.

При микроскопическом исследовании обнаруживают округлые почкующиеся клетки, часто в виде виноградной грозди.

Глубокие (плесневые) микозы. Чаще встречаются как профессиональные заболевания на предприятиях по производству антибиотиков, у сельскохозяйственных рабочих, контактирующих с заплесневевшим зерном, сеном, компостом и т.д. Возбудитель пенициллиоза (гриб-кистевик) имеет грубый, широкий, септированный мицелий, заканчивающийся кисточкой. Возбудитель мукороза имеет широкий несептированный мицелий, заканчивающийся сумкой со спорами. Возбудитель аспергиллеза (леечная плесень) часто содержится на заплесневевших фруктах, хлебе. Имеет грубый септированный мицелий, заканчивающийся расширением, от которого отходят нити со спорами, напоминающими лейку со струйками воды.

Актиномикоз. Вызывается разными видами лучистого грибка. Характеризуется образованием на коже, слизистых оболочках и во внутренних органах плотных инфильтратов, склонных к нагноению и появлению свищей. На глаз в отделяемом свищей видны мелкие желтые зернышки с характерным лучистым краем – друзы актиномицета. Препараты для микроскопии готовят из отделяемого свищей и мокроты.

При малом увеличении друзы лучистого грибка имеют вид желтоватых образований округлой формы со светлой аморфной серединой и более темной окраской по краям. При большом увеличении в центре друзы определяются нити мицелия, а по периферии – колбовидные вздутия. При окраске по Граму нити мицелия Г+, а колбочки Г-.

Болезни, вызванные грибками или микозы, являются распространенной проблемой. Возбудителей микозов насчитывается невероятное количество.

Ежегодно открываются учеными и описываются новые виды грибков. Несмотря на это, диагностика и лечение микозов - давно отлаженный и четкий механизм.

Виды грибковых заболеваний

У человека большинство грибков поражают слизистые оболочки и кожу.

К болезням, при которых причиной развития заболевания являются грибки, относятся:

• дерматомикоз
• кандидоз
• онихомикоз
• пёстрый или отрубевидный, разноцветный лишай
• чёрный лишай
• себорея
• аспергиллёз

Методы диагностики микозов

Одна из самых популярных методик - микробиологическая диагностика микозов.

Современные методы диагностики позволяют точно определить, какой грибок был причиной возникновения болезни. В дальнейшем, это дает возможность подобрать оптимальный курс лечения. На данный момент существует три основных метода лабораторной диагностики микозов.

К ним относятся:

• микроскопический
• культуральный
• серологический

Каждый из методов имеет свои преимущества. Культуральная диагностика микозов позволяет определить вид грибков. При этом есть возможность оценить чувствительность колоний к различным препаратам.

Подобный метод позволит подобрать эффективный препарат. Данный способ требует много времени на посев и выращивание колоний.

Микроскопический и серологические методы диагностики микозов требуют меньше времени на проведение. При их использовании тоже определяется вид возбудителя, но проверить его чувствительность к препаратам невозможно. В некоторых случаях возможно использование люминесцентного метода диагностики. Данный метод менее распространен ввиду его сложности.

Люминесцентный метод возможно применять лишь при поражении грибками волос. Метод малоэффективен для диагностики на ранних стадиях. Это обусловлено тем, что эффект свечения будет проявляться лишь при обильном поражении грибком волос.

Диагностика микоза стопы

Микоз стопы является одним из наиболее распространенных дерматомикозов.

Под этим термином принято понимать грибковое поражение кожи стопы и ногтей.

Помните! Заболевание отличается рецидивирующим течением.

Во время диагностики микоза стопы необходимо провести дифференциацию с рядом иных заболеваний. Диагностика микоза стопы базируется на клинических проявлениях и микроскопическом исследовании. Возможно применение культурального метода.

Лечение микозов

Ведущую роль в лечении микозов составляют противогрибковые препараты местного и системного действия.

Лечение местными антимикотиками направлено непосредственно на очаг заболевания. При этом негативное воздействие на организм в целом является минимальным.

Противомикозные препараты системного действия назначают, если:

• местные противогрибковые препараты малоэффективны
• заболевание имеет системный характер

Десенсибилизирующее и антигистаминные препараты назначают, когда микозы сопровождаются воспалительным процессом или аллергическими реакциями. Если к микозам присоединяется вторичная инфекция, возможно назначение антибактериальных препаратов.

Лечение грибковых заболеваний важно начинать на ранних стадиях болезни. Если процесс давний, для лечения может потребоваться больше времени.

При появлении первых симптомов незамедлительно обращайтесь за помощью к нашему врачу.