Serumska salmonela polivalentna ABCDE. Monoreceptor serum aglutinirajuća salmonela (O) Serumska dijagnostika salmonela adsorbirana

Lijek je liofilizirani imunološki adsorbirani krvni serum kunića ili ovaca. Adsorbirani serumi sadrže antitijela koja aglutiniraju kulture Salmonele koje sadrže homologne O- i H-antigene i ne aglutiniraju kulture Salmonele koje sadrže heterologne O- i H-antigene.

Svrha: serološka identifikacija bakterija roda Salmonella u testu aglutinacije na predmetnom predmetu.

1. Otopiti lijek nakon otvaranja ampule u 1 ili 2 ml 0,9% otopine natrijevog klorida. Otopljeni serumi mogu se čuvati u epruvetama zatvorenim gumenim čepovima na temperaturi od 7 stupnjeva 1 mjesec.

2. Kap otopljenog seruma odpipetirajte na predmetno staklo, blizu njega petlju kulture uzgojene 18-24 sata na nutritivnom kosom agaru na temperaturi od 37 stupnjeva, samljeti u serumu. Za određivanje O-antigena potrebno je uzeti kulturu s vrha agara, a za određivanje H-antigena s dna agara.

3. Rezultati se bilježe:

++++ -izraziti aglutinirati s potpunim prosvjetljenjem tekućine

+++ -izrazita aglutinacija na pozadini zamućene tekućine

++ - blago aglutinirati na pozadini zamućene tekućine

+ - mala količina aglutinata na pozadini zamućene tekućine

Homogena mutna tekućina

Reakcija aglutinacije s intenzitetom od najmanje +++ smatra se pozitivnom.

8. Diferencijacija (RA s bakteriofagom Salmonella).

9. Isporuka rezultata.

10.05 - rad u serologiji - provedena RPHA (Heddelsonova reakcija na brucelozu).

Priprema staklenog posuđa za serološka ispitivanja.

Obrada tableta: 1. Potopiti u 1% otopinu klorovodične kiseline najmanje 1 sat.

2. Operite u toploj vodi sa sapunom, obrišite svaku jažicu pamučnim štapićem.

3. Isperite 20 puta u tekućoj vodi.

4 .Pour dist. vode i ostaviti do jutra.

5. Ujutro ocijedite vodu iz tablete.

6. Osušiti na sobna temperatura.

7. Prije postavljanja reakcije, svaka se jažica obriše tamponom s vatom natopljenom fiziološkom otopinom.

Obrada slijetanja na dozatoru

1. Stavite mlaznice u staklenu posudu i ulijte 3-6% otopinu vodikovog peroksida.

2. Stavite posudu s mlaznicama u termostat zagrijanu na temperaturu od 50 stupnjeva i držite na toj temperaturi 3 sata.

3. Prebacite mlaznice u posudu s destiliranom vodom, zatvorite poklopac i držite na sobnoj temperaturi 5 minuta.

4. Sušite mlaznice na temperaturi od 50 stupnjeva 15 minuta.

Provjerio sam pH fiziološke otopine pomoću indikatorske trake (normalni pH = 7,2-7,4)

Metoda ploče (reakcija aglutinacije na staklu)

1. Stavio sam masku i rukavice, reakciju sam stavio na obično, temeljito oprano staklo bez masti.

2. Staklo crtam na kvadrate, svaki veličine 4x4 cm.

3. Iznad zapisujem brojeve test seruma

4 .U sljedećim kvadratićima ulijevam mikropipetom ispitani serum u sljedećim dozama: 0,04; 0,02; 0,01 mm, kontrola seruma i antigena.

5. Staklenom šipkom pažljivo miješam serum s antigenom, počevši od minimalne doze.

6 .Staklo se lagano zagrijava nad plamenom plamenika kako bi se cijela površina stakla zagrijala ravnomjerno. U slučaju pozitivne reakcije u kapima seruma s antigenom u prvim minutama pojavljuju se pahuljice.

7 .Obradio stol dezinficijensom

8. Skinula je masku i rukavice i oprala ruke.

digitalno izvješće

Priprema seruma-6

Reakcije Hedelsona i Wrighta-1

Obračun imunoloških reakcija-1

Izdavanje rezultata-1

Izvod protokola-1

Dvanaesti dan vježbe.

Sanitarno-bakteriološka studija vode.

Cilj: Uzorkovanje vode iz slavine i sjetva prema GOST-u metodom membranskih rezultata. Uzorkovanje hrane. Uzorkovanje zraka u kutiji za bakterijsku kontaminaciju. Obračun i izdavanje rezultata.

Metoda membranskog filtra.

Prvi dan istraživanja

Izmjereni volumen ispitne vode ulijeva se u lijevak montiranog i steriliziranog Seitz filtarskog uređaja. Pomoću pumpe stvara se vakuum u prihvatnoj posudi (obično se voda filtrira kroz filtere br. 2 i 3). Na kraju filtracije sterilnom ili vatrom izgorjelom pincetom izvadite filter i stavite ga na Endo medij u Petrijevu zdjelu tako da površina s mikrobom na njemu bude okrenuta prema gore (na jednu posudu se mogu postaviti 3-4 membranska filtera ). Usjevi se inkubiraju u termostatu na temperaturi od 37°C 18-24 sata.

Drugi dan istraživanja

Čaše s usjevima (filtri) se uklanjaju iz termostata. Odsutnost sumnjivih kolonija daje pravo negativnog odgovora. Sve crvene i ružičaste kolonije sa ili bez metalnog sjaja podliježu registraciji. Od izraslih kolonija rade se razmazi, obojeni po Gramu (slika 56.).

Riža. 56. Određivanje koli-indeksa vode metodom membranskih filtera

U prisutnosti gram-negativnih štapića, postavlja se test na oksidazu. Pozitivan oksidazni test daje pravo na negativan odgovor. Uz negativan oksidazni test, inokulacija se provodi na polutekući medij s glukozom i indikatorom ili na HPS medij s fermentacijskim epruvetama - radi otkrivanja fermentacije ugljikohidrata u kiselinu i plin. U prisutnosti kiseline i plina izračunava se coli indeks. Na primjer, na svim filterima na Endo mediju izrasle su 3 kolonije, kroz filter je propušteno 300 ml vode.

Izračun. 300 ml - 3 kolonije

x = 1; ako-indeks 1

Uzorkovanje vode

Za uzorkovanje vode koristi se jednokratno posuđe ili spremnici za višekratnu upotrebu izrađeni od materijala koji ne utječu na vitalnu aktivnost mikroorganizama posebno dizajnirani za te svrhe. Spremnici moraju biti opremljeni čvrsto zatvorenim (silikonskim, gumenim ili drugim materijalima) čepovima i zaštitnim poklopcem (od aluminijske folije, debelog papira). Posuđe za višekratnu upotrebu, uključujući čepove, mora biti u stanju izdržati sterilizaciju suhom toplinom ili autoklaviranjem.

Uzorak se uzima u sterilne posude u skladu s pravilima sterilnosti. Spremnik se otvara neposredno prije uzorkovanja, uklanjajući čep zajedno sa sterilnim poklopcem. Tijekom uzorkovanja, pluto i rubovi posude ne smiju ništa dodirivati. Zabranjeno je ispiranje posuđa.

Prilikom ispitivanja vode iz distribucijske mreže, uzorkovanje iz slavine provodi se nakon njezine preliminarne sterilizacije pečenjem i naknadnim spuštanjem vode najmanje 10 minuta s potpuno otvorenom slavinom. Ako se voda uzima nakon dezinfekcije kemijskim reagensima, tada se za neutralizaciju preostale količine dezinficijensa u posudu namijenjenu uzorkovanju prije sterilizacije dodaje natrijev sulfat u obliku kristala ili koncentriranu otopinu u količini od 10 mg na 500 ml. od vode.

Nakon punjenja, spremnik se zatvara sterilnim čepom i čepom. Odabrani uzorak je označen i popraćen aktom uzorkovanja vode u kojem se navodi naziv uzorka, mjesto uzorkovanja, datum (godina, mjesec, dan, sat), svrha istraživanja, gdje se uzorak šalje na istraživanje. , te potpis osobe koja je uzela uzorak.

Lijek je dijagnostički. Sadrži antitijela. Predstavlja krvni serum životinja imuniziranih ubijenom kulturom salmonele. Dizajniran za serološku identifikaciju bakterija iz roda Salmonella u testu aglutinacije na staklu. salmonela koja aglutinira monoreceptor u serumu (O) Članstvo u grupi

Dijagnostičar. Ah, mačka. primamo u 3 faze: u 1. odabiremo salmonelu (npr. S.typhimurium sa Ag strukturom O-1,4,5,12; Mi 1,2) zagrijavamo u vodenoj kupelji da uništi H-Ag flagelu , odmor. Samo O-Ag 1,4,5,12. U drugoj fazi, zečevi se hiperimuniziraju preostalom salmonelom O-Ag, u kuniću nastaju O-1,4,5,12 At. Ovo je polivalentni serum. U 3. fazi provodimo iscrpljivanje seruma prema Castellaniju. Da biste to učinili, i dobili sirutku se dodaje prethodno zagrijana u vodu. Bath iz iste ser.skupine na primjer S.hudelberg o-45.12 Ag, postojat će veza između Ag i preostalog O-1 At. Rezultirajući serum koristi se za seroidifikaciju salmonele u RA u 3. stupnju bakt. analiza.

47 Aglutinirajući adsorbirani polivalentni serum na Shigella flexneri I-V.

48 Aglutinirajući adsorbirani receptor salmonele O-seruma 9.

Lijek je dijagnostički. Sadrži antitijela. Predstavlja krvni serum životinja imuniziranih ubijenom kulturom salmonele. Dobiveno Castellanijevom metodom. Dizajniran za serološku identifikaciju bakterija iz roda Salmonella u testu aglutinacije na staklu.

50. Aglutinirajući adsorbirani polivalentni O-serum salmonele (skupine A, B, C, D, E).

Lijek je dijagnostički. Sadrži antitijela na O-antigen. Predstavlja krvni serum životinja imuniziranih ubijenom kulturom salmonele. Dobiveno Castellanijevom metodom. Dizajniran za serološku identifikaciju bakterija iz roda Salmonela u reakciji aglutinacije na staklu.

51 Aglutinirajući adsorbirani Salmonella H-serum receptor d

Lijek je dijagnostički. Sadrži antitijela na receptor H-antigena d. Predstavlja krvni serum kunića imuniziranih ubijenom kulturom salmonele. Dobiveno Castellanijevom metodom. Dizajniran za serološku identifikaciju bakterija iz roda Salmonella u testu aglutinacije na staklu.

50. Aglutinirajući adsorbirani polivalentni serum na Shigella flexneri I-V.

Lijek je dijagnostički. Sadrži antitijela. To su serumi zečeva imuniziranih formaliziranim i živim suspenzijama tipičnih Shigella u svim aspektima. U interakciji s odgovarajućim mikroorganizmima, serumi uzrokuju njihovu aglutinaciju. Dizajniran za serološku identifikaciju Shigella flexneri I-V. Dijagnostički serumi šigeloze su liofilizirani adsorbirani zečji serumi koji sadrže monoreceptorska protutijela na 38 antigena. Za osam skupina antigena proizvode se polivalentni serumi. Pripravci su namijenjeni identifikaciji bakterija iz roda Shigella u reakciji aglutinacije. Dijagnostički serumi šigeloze imaju titar antitijela u reakciji aglutinacije najmanje 1:40. Pomoću ovih seruma možete odrediti bilo koju bakteriju iz roda Shigella prema međunarodnoj klasifikaciji. Lijek se ulijeva u ampule od 2 ml. Pušten na suho. Rok trajanja monoreceptorskih suhih seruma je 5 godina, polivalentnih suhih seruma 3 godine kada se čuvaju na suhom i tamnom mjestu na temperaturi od 4-80 C.

Set reagensa "Dijagnostički salmonella sera adsorbirani O-polivalent za reakciju aglutinacije" namijenjen je identifikaciji pomoću reakcije aglutinacije (RA) na staklenom predmetu bakterija roda Salmonella izoliranih iz ljudskog biološkog materijala (urin, izmet, ispiranje želuca, povraćanje).

Opisano je više od 2400 patogenih serovara salmonele koji uzrokuju akutni gastroenteritis u ljudi, tifusne i septikopiemične oblike bolesti, objedinjene pod nazivom salmoneloza. Glavni uzročnici salmoneloze su Salmonella serovars enteritidis, typhi murium, cholerae-suis, haifa itd.

Set reagensa "Dijagnostički salmonella sera adsorbirani O-polivalent za reakciju aglutinacije" namijenjen je identifikaciji takvih bakterija u svrhu propisivanja pravilno liječenje bolesna.

Set je dostupan u 4 konfiguracije:

Set br. 1 Salmonella polivalentni O-serum glavnih skupina (A, B, C, D, E):

Set br. 1/1 - Salmonella polivalentni O-serum glavnih skupina, suhi;

Set br. 1/2 - Salmonella polivalentni O-serum glavnih skupina, tekući;

Set №2 Salmonella polivalentni O-serum rijetke skupine:

Set br. 2/1 - Salmonella polivalentni O-serum rijetkih skupina, suhi;

Set broj 2/2 - Salmonella polivalentni O-serum rijetkih skupina, tekući.

Svaka varijanta kompletnog seta u 2 izvedbe.

SASTAV I KOMPLET

Komponente kompleta su pakirane u kutiju, u kutiji su i upute za uporabu.Skraćena shema antigenske strukture bakterije Salmonella. .

GLAVNE KARAKTERISTIKE POTROŠAČA

Osnovne verzije kompleta dizajnirane su za proučavanje 200 (verzija 1) ili 40 uzoraka (verzija 2).

NAČELO RADA

Adsorbirani serumi sadrže antitijela koja aglutiniraju kulture Salmonele koje sadrže homologne O antigene i ne aglutiniraju kulture Salmonele koje sadrže heterologne O antigene.

UZORCI PROUČAVANJA

Proučava se kultura izolirana tijekom bakterioloških ispitivanja iz biološkog materijala (urin, izmet, ispiranje želuca, povraćanje) i uzgojena u epruvetama na kosom nutritivnom agaru 18-20 sati na temperaturi od 37 0 C.

Dopušteno je čuvati izoliranu kulturu na hranjivom agaru na temperaturi od +2 - +8 2 dana.

Prikupljanje, skladištenje i priprema ljudskog biološkog materijala treba provoditi u skladu s GOST R 53079.4-2008 "Osiguranje kvalitete kliničke laboratorijsko istraživanje", MU 4.2.2723-10 " Laboratorijska dijagnostika salmoneloze, otkrivanje salmonele u prehrambenim proizvodima i objektima okoliša.

ANALITIČKE I DIJAGNOSTIČKE KARAKTERISTIKE

Specifična aktivnost:

Analitička osjetljivost: određena homolognim muzejskim testnim sojevima Salmonella i iznosi 100%

Analitička specifičnost : određen heterolognim muzejskim testnim sojevima Salmonella i 100%

Reproducibilnost rezultata je 100%.

Dijagnostička osjetljivost (s razinom pouzdanosti od 95%) bila je:

Dijagnostička specifičnost (s razinom pouzdanosti od 95%) bila je:

Muzejski testni sojevi Salmonele - 98,07% -100%;

Kulture salmonele izolirane iz kliničkog materijala bolesnika - 98,25% -100%.

MJERE OPREZA

Komplet je biološki siguran, međutim, uzorci za testiranje moraju se rukovati kao potencijalno zarazni materijal.

Mjere opreza pri radu s kompletom - pridržavajte se pravila „Upute za mjere za sprječavanje širenja zarazne bolesti pri radu u kliničko-dijagnostičkim laboratorijima medicinskih ustanova "(Odobreno od strane Ministarstva zdravstva SSSR-a 17. siječnja 1991.), GOST R 52905-2007 (ISO 15190:2003).

Skup reagensa, u skladu sa SanPiN 2.1.7.2790-10 "Sanitarni i epidemiološki zahtjevi za obradu medicinskog otpada" pripada klasi B (epidemiološki opasan otpad).

Recikliranje ili uništavanje, dezinfekcija kompleta reagenasa treba provesti u skladu sa SanPiN 2.1.7.2790-10 "Sanitarni i epidemiološki zahtjevi za gospodarenje medicinskim otpadom" i MU 287-113 "Smjernice za dezinfekciju, čišćenje prije sterilizacije i sterilizaciju medicinskih uređaja."

NAČIN PRIMJENE

Oprema i materijali (za "ručno" podešavanje)

Štoperica;

Hladnjak sa temperaturni režim 2-8 0 S;

Poluautomatske pipete s radnim rasponima: 5-50 µl, 20-200 µl;

Jednokratni vrhovi za određene pipete;

Spremnici za tekući i čvrsti otpad;

Rukavice od gume ili lateksa, sredstva za dezinfekciju;

Petlja je bakteriološka;

Stakleni dijapozitivi;

Povećalo s povećanjem (2x);

0,9% otopina natrijevog klorida;

Termostat suhog zraka koji održava temperaturu (37 ± 1) °S;

70% otopina etilnog alkohola i 6% otopina vodikovog peroksida (otopine za dezinfekciju) ili otopine drugih dezinficijensa odobrenih za uporabu prema SP 1.32322-08.

NAČIN PRIMJENE

Postavljanje RA na staklu

Polivalentni O-serum salmonele

Suha sirutka se otopi u 2 ml 0,9% vodene otopine natrijevog klorida

Jedna kap (oko 50 μl) seruma i jedna kap 0,9% vodene otopine natrijevog klorida nanose se na predmetno staklo. Prepoznatljiva kultura uzgajana u epruvetama na kosom nutritivnom agaru 18-20 sati na temperaturi od 37 °C ukloni se s gornjeg dijela agara petljom, nanese na staklo blizu kapi 0,9% vodene otopine natrijevog klorida otopina i emulgirana (kontrola odsutnosti spontane aglutinacije). U nedostatku spontane aglutinacije, manipulacija se ponavlja u kapi O - seruma, tvoreći jednoličnu neprozirnu suspenziju. Snimanje rezultata provodi se 1-2 minute, lagano protresajući staklo. Homogena suspenzija ukazuje na negativan rezultat.
U prisutnosti aglutinina u ispitivanom soju, u kapi seruma unutar 1-2 minute pojavljuje se ljuskavi aglutinat.

Računovodstveni rezultat RA proizvodi vizualno pomoću povećala (2x) prema četverokrakom sustavu

Rezultati RA uzimaju se u obzir i ocjenjuju kako slijedi:

Izraziti aglutinat s potpunim prosvjetljenjem tekućine u kapi (100%).

Izrazita aglutinacija na pozadini zamućene tekućine (75%)

Beznačajna aglutinacija na pozadini zamućene tekućine (50%)

Tragovi aglutinirane, zamućene tekućine u kapi (25%)

(-) - negativan rezultat, homogeno zamućena tekućina u kapi (0%).

RA s dijagnostičkim serumom uzima se u obzir samo ako je rezultat kontrole spontane aglutinacije negativan.

Proučavana kultura pripada odgovarajućoj O-skupini ako se RA s polivalentnim serumom ove skupine dobije na staklu najmanje (+++).

ROK TRAJANJA

Set br.1/1, br.1/2. Salmonella polivalentni O-serum, suhi - 3 godine od datuma prihvaćanja od strane OPF-a proizvođača.

Set br.2/1, br.2/2. Salmonella polivalentni O-serum, tekući - 1 godina od datuma prihvaćanja od strane OPF-a proizvođača.

SKLADIŠTENJE I TRANSPORT

Skladištenje

U pakiranju proizvođača na temperaturi od 2 ° C do 8 ° C. Zamrzavanje nije dopušteno.

Nakon otvaranja pakiranja, neiskorišteni reagensi mogu se čuvati u dobro zatvorenim pakiranjima na temperaturi od 2 do 8 °C 1 mjesec.

Prijevoz

Na temperaturi od 2 do 8 o Uz transport svih vrsta u natkrivenim vozila u skladu s prijevoznim pravilima koja se primjenjuju na ovu vrstu prijevoza. Zamrzavanje nije dopušteno. Prijevoz je dopušten na temperaturi od 9°C do 25°C 14 dana.

ODMORNI UVJETI

Za zdravstvene ustanove.

Primite na isti način kao i druge dijagnostičke serume. Koristi se za serotipizaciju salmonele u reakciji aglutinacije.

Salmonella O- i H-monodiagnosticums. To su suspenzije salmonele ubijene zagrijavanjem (O-dijagnostika-mi) ili tretmanom formalinom (H-diagnosticums). Koristi se za serodijagnostiku trbušnog tifusa kod Vidalove reakcije.

Tipični bakteriofagi salmonele. Koristi se za pha-tipizaciju salmonele.

Jednostruko cjepivo protiv tifusa i alkoholno cjepivo protiv tifusa obogaćeno Vi-antigenom. Primjenjuje se za specifičnu aktivnu prevenciju trbušnog tifusa.

Polivalentni tifusni bakteriofag. Dostupan u obliku tableta s premazom otpornim na kiseline. Prijaviti se za hitna prevencija trbušni tifus.

Coli-bakterin. Sadrži liofilizirane žive stanice E coli soj M17, koji ima izražena antagonistička svojstva prema nizu patogenih crijevnih bakterija. Koristi se za normalizaciju crijevne mikroflore kod disbakterioze i liječenja dizenterije, uglavnom u djece.

Bifidumbacterin. Sadrži zamrznutu suspenziju živih stanica B. bifidum. Koristi se za liječenje kroničnih crijevne infekcije neobjašnjiva etiologija u djece i dizenterija.

Bificol. Sadrži mješavinu osušenih živih bakterija E coli soj M17 i B. bifidum. Indikacije za uporabu su iste.

laktobakterin. Sadrži otpadne produkte laktobacila. Dostupan u obliku tableta. Koristi se za liječenje disbakterioze u djece.

antibiotici: sulfonamidi, polusintetski penicilini, cefalosporini 2-4 generacije, kloramfenikol, tetraciklini, fluorokinoloni, polimiksin.

Tema 13.3. PATOGENI U HRANI

TOKSIČNE INFEKCIJE, INTOKSIKACIJE, KOLERA

I DRUGE BAKTERIJSKE CRIJEVNE INFEKCIJE

Plan

Program

1. Biološka svojstva uzročnika kolere, toksičnih infekcija hranom i intoksikacija. Njihova patogenost, ekologija, značajke infekcije i epidemiologija uzrokovanih bolesti.

2. Laboratorijska dijagnostika.

3. Dijagnostički, profilaktički i terapijski lijekovi.

Demonstracija

1. Razmazi iz čistih kultura uzročnika trovanja hranom crijevnih infekcija: Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Vibrio cholerae. Bojenje po Gramu.

2. Dijagnostički i terapijsko-profilaktički pripravci.

Zadatak studentima

1. Mikroskopski i izvući razmaze iz čistih kultura uzročnika crijevnih infekcija.

2. Bakteriološka dijagnoza kolere.

2.1. Navedite materijal za istraživanje.

2.2. Identifikacija čiste kulture vibrija izoliranih od pacijenta:

1) za proučavanje morfoloških i tinktorijalnih svojstava: mikroskopski razmaz iz čiste kulture izolirane od pacijenta;

2) za proučavanje antigenskih svojstava: zabilježiti rezultate opsežne reakcije aglutinacije s dijagnostičkim O1-serumom;

3) proučiti biokemijska svojstva: zabilježiti rezultat heksamin testa;

4) odrediti osjetljivost izolirane kulture na dijagnostičke bakteriofage;

5) uočiti sposobnost rasta na mediju s polimiksinom;

6) dati zaključak.

3. Dijagnoza botulizma:

1) naznačiti materijal za istraživanje;

2) analizirati rezultate RIGA za otkrivanje botulinum toksina u krvnom serumu pacijenta (Boydenova reakcija). Dajte zaključak.

4. Upoznajte se s stručnjacima za dijagnostiku i liječenje
mliječni pripravci.

Smjernice

■ MIKROBIOLOŠKA DIJAGNOSTIKA TOKSIČNIH INFEKCIJA BAKTERIJSKOG HRANOM

Mikrobiološka dijagnostika toksičnih infekcija hranom uzrokovanih Escherichia spp., Salmonella spp., Proteus spp.

MATERIJAL ZA PROUČAVANJE: izmet, povraćanje, ispiranje želuca bolesnika, ostaci hrane – mogući izvori i čimbenici prijenosa infekcije.

METODE DIJAGNOSTIKE:

Proizveden sjetvom

Materijal za diferencijalno dijagnostičke i elektivne podloge (Endo, bizmut sulfitni agar, itd.) za izolaciju čiste kulture Salmonella i Escherichia, kao i za kondenzacijsku vodu u epruveti s kosim hranjivim agarom za identifikaciju bakterija iz roda Proteus. Nakon inkubacije inokulacija na 37 °C tijekom 20-24 sata, boja kolonija na pločama s diferencijalnim medijem i prisutnost "puzajućeg" rasta, karakteristična za Proteus spp., u epruveti s kosim hranjivim agarom. Sumnjive kolonije se subkulturiraju na nutritivnom agar kosom obliku kako bi se dobile čiste kulture i istovremeno se s njima stavi približna reakcija aglutinacije na staklo pomoću mješavine dijagnostičkih seruma. Sljedećeg dana, s čistom kulturom, provodi se detaljna reakcija aglutinacije s odgovarajućim monoreceptorskim serumom i vrši se zasijavanje na podloge "šarene" serije. Kada se isti serovar Salmonella ili Escherichia izolira iz tijela bolesnih ljudi i prehrambeni proizvod donijeti konačan zaključak o etiologiji trovanja hranom – izvoru bolesti. U prisutnosti "puzajućeg" rasta na kosom nutritivnom agaru, iz kondenzacijske vode se uzima omča za pripremu pripravka "viseće" kapi radi uspostavljanja pokretljivosti i za razmaz koji se boji po Gram metodi. i mikroskopski. Zatim se izolira čista kultura, određuju se biokemijski i drugi znakovi i utvrđuje oblik: P.vulgaris, P.mirabilis, P.morganii i P. rettgeri.

Ocjenu uloge oportunističkih mikroorganizama u etiologiji toksičnih infekcija hranom treba strogo argumentirati: a) bakteriološko, serološko, epidemiološko i kliničko isključenje salmoneloze, dizenterije, kolere; b) izolacija identičnih sojeva oportunističkih bakterija iz povraćanja, ispiranja želuca, izmeta, produkata.

■ MIKROBIOLOŠKA DIJAGNOSTIKA INTOKSIKACIJA HRANOM BAKTERIJSKE PRIRODE

Mikrobiološka dijagnoza stafilokokne intoksikacije hranom

MATERIJAL ZA ISTRAŽIVANJE: povraćanje, ispiranje želuca, sumnjivi prehrambeni proizvodi.

METODE DIJAGNOSTIKE:

Ekspresne dijagnostičke metode: imunokemijske, biokemijske i molekularno biološke studije. Imunokemijske studije. Dijagnoza se temelji na otkrivanju enterotoksina u ispitivanom materijalu. Entero-toksin Staphylococcus spp. ekstrahiran izotoničnom otopinom

rum natrijevog klorida, tada se njegova prisutnost i serološka specifičnost određuju reakcijom precipitacije u gelu s imunološkim antitoksičnim serumima A, B, C. Tehnika reakcije je gore opisana (vidi sliku 10.1.6). Također se koriste lateks aglutinacija, ELISA, RIA itd.

bakteriološko istraživanje. Kako bi se izolirala čista kultura stafilokoka, ispitni materijal, koji može sadržavati vitalne bakterije, inokulira se u ploče s JSA. Čiste kulture dobivene prema shemi (vidi temu 12.1) testiraju se na sposobnost proizvodnje enterotoksina. Za epidemiološku analizu masovnih stafilokoknih intoksikacija, fagotipizacija izoliranih kultura provodi se pomoću seta stafilokoknih faga.

Biotest. Za otkrivanje enterotoksina možete koristiti biotest - hranite proučavani materijal mačićima koji sišu, u kojima stafilokokni enterotoksin uzrokuje povraćanje i proljev 30-60 minuta nakon hranjenja.

Slične informacije.